β-防御素-2在唾液腺腫瘤及炎癥組織中的表達(dá)及調(diào)控.pdf

1、目的：本實驗研究人β-防御素-2(humanbeta-defensin-2,HBD-2)在唾液腺良惡性腫瘤和炎癥組織中的表達(dá)特征及其與臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系,并培養(yǎng)ACC-M涎腺腫瘤細(xì)胞,觀察檢測HBD-2的表達(dá)特征,研究可能對其產(chǎn)生調(diào)控的基因,初步探討其在唾液腺腫瘤細(xì)胞生物學(xué)中的作用及機(jī)制。
　　方法：RT-qPCR、免疫組化方法檢測HBD-2mRNA和蛋白在唾液腺良惡性腫瘤組織、炎癥組織和正常唾液腺組織中的表達(dá),分析免疫組化

2、結(jié)果與唾液腺惡性腫瘤臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系。前期試驗結(jié)果顯示mPGES-1可能與HBD-2的表達(dá)有關(guān),由于PGE2分泌與mPGES-1正相關(guān),所以我們選擇研究PGE2是否為HBD-2的調(diào)控基因。通過培養(yǎng)人涎腺癌細(xì)胞ACC-M,用不同濃度的PGE2分別處理細(xì)胞后RT-qPCR方法檢測HBD-2表達(dá),了解PGE2分泌與HBD-2表達(dá)的關(guān)系。
　　結(jié)果：RT-qPCR結(jié)果顯示,與唾液腺正常組織比較,良性腫瘤組HBD-2mRNA表達(dá)量為其6

3、.468倍,顯著高于涎腺正常組織組(p<0.05);惡性腫瘤組為0.334倍,顯著低于涎腺正常組織組(p<0.05);唾液腺炎癥組為10.563倍,顯著高于唾液腺正常組織組(p<0.05)。良性腫瘤組mPGES-1mRNA表達(dá)量為正常組織的0.896倍,差異無顯著性(p>0.05);惡性腫瘤組為8.326倍,顯著高于涎腺正常組織組(p<0.05);涎腺炎癥組為11.581倍,顯著高于涎腺正常組織組(p<0.05)。免疫組化結(jié)果顯示,在唾

4、液腺癌患者中,HBD-2表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移和TMN分期相關(guān),與患者腫瘤大小、分化程度、年齡、性別等無關(guān)。用不同濃度PGE2處理腫瘤細(xì)胞,10nmol/ml組HBD-2表達(dá)量為對照組的1.142倍,差異無顯著性(P>0.05);50nmol/ml組HBD-2表達(dá)量為對照組的2.364倍(P<0.05);100nmol/ml組HBD-2表達(dá)量為對照組的11.917倍(P<0.05);200nmol/ml組HBD-2表達(dá)量為對照組的13.114倍

5、(P<0.05);1μmol/ml組HBD-2表達(dá)量為對照組的0.453倍(P<0.05)。
　　結(jié)論：良性腫瘤組中HBD-2高表達(dá),mPGES-1表達(dá)無明顯差異;惡性腫瘤組中HBD-2低表達(dá),mPGES-1高表達(dá);炎癥組中HBD-2和mPGES-1均為高表達(dá)。HBD-2的表達(dá)與淋巴轉(zhuǎn)移和TMN分期相關(guān),與患者腫瘤大小、分化程度、年齡、性別等臨床病理因素?zé)o關(guān)。較低濃度(50-200nmol/ml)PGE2能上調(diào)HBD-2mRNA表