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1、溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目I里叢膣擔(dān)差性8艮痘(墜Q2登叢魚皇仝蕉細(xì)胞差昱麥達(dá)凹l墾!=QB叢壘的麴壟筮造答辯委員會(huì)主席:盜至簟答辯委員會(huì)成員:礁弛叁墨望—j狂筆二一一一一溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文甲狀腺相關(guān)性眼病(TAO)靜脈血單個(gè)核細(xì)胞差異表達(dá)microRNA的初步篩選摘要目的甲狀腺相關(guān)性眼病(TAO)的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜且尚未明確。本文旨在以免疫學(xué)機(jī)制作為切入口,初步篩選出甲狀腺相關(guān)性眼病患病組與正常對(duì)照組表達(dá)差異的microRNA
2、,為進(jìn)一步研究與甲狀腺相關(guān)性眼病相關(guān)的特異性microRNA以及功能探索打下基礎(chǔ),也為尋找臨床上甲狀腺相關(guān)性眼病的特異診斷指標(biāo),以及治療新靶點(diǎn)提供新的角度。方法收集正常對(duì)照組、TAO靜止期組和TAO急性期組各3例外周靜脈血,提取人外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheralbloodmononuclearcells,PBMC),提取RNA做新一代高通量microRNA測序,構(gòu)建TAO及正常對(duì)照組的microRNA表達(dá)圖譜并分析,篩選出不同組別
3、差異表達(dá)的microRNA,選取TAO靜止期組與正常對(duì)照組、TAO急性期組與正常對(duì)照組之間共同差異表達(dá)明顯的4個(gè)microRNA。然后利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QuantitativeRealtimePCR,qrt—PCR)技術(shù),在正常對(duì)照組、TAO靜止期組和TAO急性期組各5例的擴(kuò)大樣本中驗(yàn)證上述篩選出的microRNA。結(jié)果1microRNA測序結(jié)果:TAO靜止期組與正常對(duì)照組相比,T檢驗(yàn)P值2的microRNA共有17個(gè),分別為:h
4、sa—miR3155a、hsamiR6718—5p、hsa—miR一939—3p、hsa—miR一653、hsa—miR一44335p、hsamiR一378a3p、hsa—miR一3160—3p,hsa—miR1298,hsamiR4646—3p,hsamiR65033p,hsa—miR一378c、hsa—miR一18b3p、hsamiR一2467—5p、hsamiR548c一5p、hsa—miR一19a一5p、hsa—miR一30c2
5、3p、hsamiR一31365p、hsa—miR一629—3D。TAO急性期組與正常對(duì)照組相比,T檢驗(yàn)P值2的microRNA共有34個(gè),分別為:hsa—miR一6515—3p、hsa—miR一1306—5D、hsa—miR一4797—3p、hsa—miR一1306—3p、hsa—miR一424—3p、hsa—miR一5001—5p、hsa—miR一6718—5p、hsa—miR一46403p、hsamiR一46803p、hsamiR一
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