豬GnRH、GnRHR、EPOR基因的克隆、多態(tài)性分析及表達(dá)譜構(gòu)建.pdf

1、繁殖力是養(yǎng)豬業(yè)中的最重要生產(chǎn)指標(biāo)之一，提高豬的繁殖性能將會(huì)給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)效應(yīng)。豬GnRH基因、GnRHR基因、EPOR基因在豬的繁殖過程中起著重要的作用，是與豬繁殖力有關(guān)的重要候選基因。 本實(shí)驗(yàn)采取TD-PCR的方法克隆了豬的GnRHR基因和EPOR基因，并對(duì)不同豬品種的GnRH基因、GnRHR基因、EPOR基因的關(guān)鍵部位做了PCR-SSCP多態(tài)性分析；應(yīng)用RT-PCR的方法構(gòu)建了3頭大白豬母豬的EPOR基因的組織表達(dá)譜和

2、與下丘腦-腦垂體-性腺軸相關(guān)的重要基因，包括GnRH基因、GnRHR基因、FSH基因、FSH受體基因、LH基因、FST基因、inhibin(a)基因、inhibinβ(a)基因、inhibinβ(b)基因的關(guān)聯(lián)組織表達(dá)譜。得到以下的結(jié)果： 1.克隆了豬GnRHR基因和EPOR基因的大部分基因序列。 2.在這三個(gè)基因的編碼區(qū)均未發(fā)現(xiàn)多態(tài)性。 3.在GnRHR基因的5’側(cè)翼序列上發(fā)現(xiàn)了兩處可能的功能性多態(tài)性位點(diǎn)，其中

3、的一處是含有GAGABox的插入突變序列，另一處由于點(diǎn)突變而形成了一個(gè)轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白IRF-1結(jié)合序列，這兩個(gè)轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列已經(jīng)被證明在動(dòng)物很多基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在含有GAGABox的插入突變處存在AA型、AB型和BB型三種基因型?；蝾l率在不同的豬品種間存在著很大的差異性，其中民豬與它豬品種的差異性最大；IRF-1突變只存在于民豬中，并且只存在AA型和AB型兩基因型。 4.根據(jù)EPOR基因的表達(dá)譜可