先天性肌性斜頸病變組織中細胞外間質(zhì)的變化特點.pdf

1、該研究共分為兩部分。
　　 第一部分先天性肌性斜頸病變組織中脂肪增生與纖維化
　　 目的：觀察先天性肌性斜頸(Congenital Muscular Torticollis，CMT)病變組織中脂肪增生現(xiàn)象及分布特點，分析脂肪增生程度與纖維化和年齡的關(guān)系。
　　 方法：對手術(shù)治療，切除的病理組織，常規(guī)石蠟包埋，并取部分新鮮標本行液氮冰凍處理保存。石蠟標本行常規(guī)HE染色，觀察先天性肌性斜頸病變胸鎖乳突肌基本病理改變和

2、脂肪增生現(xiàn)象。Masson染色，觀察胞外基質(zhì)的纖維化情況。冰凍標本行蘇丹Ⅲ脂肪染色，定性病變肌組織中增生的脂肪組織。
　　 結(jié)果：188例CMT患兒中，男123例，女65例，男女比約2:1；左側(cè)75例，右側(cè)113例，左右比約2:3；冰凍標本31例；年齡最小2月24天，最大16歲，平均年齡2.9歲。所有標本均符合CMT診斷標準及排除其它疾病。①HE染色下CMT病變胸鎖乳突肌肌纖維大小不等，呈萎縮、肥大、壞死等多種改變，部分肌細胞有

3、空泡變性和核中心化表現(xiàn)，間質(zhì)增生纖維化明顯。②Masson染色顯示肌內(nèi)膜、肌束膜輕重不一的纖維化增生，包繞肌纖維。隨著年齡的增長，纖維化程度呈現(xiàn)兩頭高中間低的特點，0-3歲纖維化與年齡負相關(guān)(r=-0.168，P=0.049)，3歲后纖維化與年齡正相關(guān)(r=0.281，P=0.001)。③蘇丹Ⅲ脂肪染色可見橙紅色陽性分布區(qū)域，與HE染色下脂肪分布相對應。④存在脂肪增生的標本占總標本數(shù)的69.68％(131/188)，增生程度輕重不一，標

4、本中可見少量的脂肪細胞，也可見大量脂肪增生；增生的脂肪組織多呈團塊狀或條索狀；大多為纖維化膠原所包繞，也可見穿插于肌纖維間。脂肪增生隨纖維化加重和年齡增大呈增多趨勢，且三者間相互具有正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)。
　　 結(jié)論：CMT的基本病變是病變的胸鎖乳突肌纖維化，纖維化程度隨年齡增長呈現(xiàn)兩頭高中間低的特點。本研究在常規(guī)觀察基本病變組織中，發(fā)現(xiàn)了脂肪增生現(xiàn)象。脂肪增生參與CMT的基本病理變化過程，隨病變胸鎖乳突肌纖維化進程而加重

5、，并可能對肌纖維的病理改變與組織纖維化產(chǎn)生影響。
　　 第二部分先天性肌性斜頸病變組織中肌纖維基底膜的變化特點
　　 目的：觀察先天性肌性斜頸(congenital muscular torticollis，CMT)病變組織中肌纖維基底膜的變化特點，分析基底膜改變程度與對應肌纖維形態(tài)改變和間質(zhì)纖維化程度的關(guān)系，推測基底膜的改變與先天性肌性斜頸病情發(fā)展與改變的內(nèi)在聯(lián)系。
　　 方法：通過手術(shù)治療，切除40例先天性肌

6、性斜頸患兒病變胸鎖乳突肌(sternocleidomastoid muscle，SCM)組織及5例發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位(developmentaldysplasia of the hip，DDH)患兒的內(nèi)收肌組織，常規(guī)石蠟包埋，切片后行HE染色、Masson染色和針對Ⅳ型膠原和層粘連蛋白的免疫組織化學染色，以發(fā)育性髖關(guān)節(jié)脫位患兒手術(shù)切除的內(nèi)收肌作正常對照。觀察Ⅳ型膠原和層粘連蛋白的表達分布特點，并根據(jù)Ⅳ型膠原和(或)層粘連蛋白的免疫組織化學

7、染色所顯示的肌纖維基底膜形態(tài)，分析同一標本不同病變區(qū)域的基底膜改變與對應肌纖維形態(tài)變化的關(guān)系，分析不同標本中基底膜改變與間質(zhì)纖維化程度的關(guān)系。
　　 結(jié)果：HE染色下，CMT病變組織鏡下觀察可見明顯的間質(zhì)增生纖維化，殘存肌纖維被增生的纖維化組織包繞并分離，肌纖維退行性變明顯；但同一標本的不同病變區(qū)域纖維化程度與肌纖維殘存數(shù)量不一，部分標本的病變組織可分為纖維化區(qū)、肌細胞纖維混合區(qū)和肌細胞密集區(qū)。Masson染色顯示，對照組DDH

8、內(nèi)收肌，平均纖維化為8.74±1.54(％)，先天性肌性斜頸病變組織中纖維化程度明顯，為55.06±17.82(％)，經(jīng)兩獨立樣本T檢驗分析，t=15.97，P<0.01。在CMT中，藍色的纖維化區(qū)域呈彌漫性增生，肌內(nèi)膜、肌束膜均有輕重不一的纖維化，包繞殘存肌纖維。免疫組織化學染色結(jié)果顯示Ⅳ型膠原和層粘連蛋白二者的組織內(nèi)表達部位基本一致，即表達在肌纖維基底膜和血管壁上，而在CMT病變組織間質(zhì)表達不明顯。對照組中肌纖維形態(tài)規(guī)則，大小均一，

9、基底膜邊緣光滑，薄且均勻，并緊貼與肌纖維胞膜上，不能區(qū)分。同一CMT標本不同病變區(qū)域肌纖維及其基底膜變化特點是，①纖維化區(qū)，肌纖維零星，Ⅳ型膠原和層粘連蛋白的陽性表達部位僅存在于視野中的血管壁上，而其他區(qū)域的染色結(jié)果為陰性；僅有零星肌纖維的基底膜上，未見表達，完全缺失。②肌細胞纖維混合區(qū)，殘存肌纖維被增生的纖維化組織分割，呈孤島狀態(tài)，肌細胞形態(tài)不規(guī)整，常見肥大、萎縮的表現(xiàn)，部分肌纖維有明顯的核中心化、空泡變性等退行性變，并且這種變化在基

10、底膜缺損嚴重的肌細胞表現(xiàn)更為突出。相應的肌纖維基底膜在部分肌纖維周圍有極少量的陽性表達，缺損明顯，且不連續(xù)；一些部位基底膜顯像彌漫性減弱，表達不連續(xù)，有局部缺失。③肌細胞密集區(qū)，肌纖維數(shù)量較豐富，基底膜表達較好，連續(xù)但不平整，不均一。不同CMT標本間肌纖維基底膜缺損程度與間質(zhì)纖維化程度對比，經(jīng)單因素方差分析結(jié)果提示基底膜缺損越重的標本中，間質(zhì)纖維化程度越高(P<0.05)。
　　 結(jié)論：間質(zhì)增生纖維化是先天性肌性斜頸的基本病理改

11、變，在纖維化的基礎上病變組織中肌纖維基底膜表現(xiàn)出輕重不一的缺損特點。同一標本的不同病變區(qū)域基底膜及其對應肌纖維的形態(tài)改變存在差異，肌細胞密集區(qū)，Ⅳ型膠原和層粘連蛋白染色出較為正常的基底膜。基底膜染色缺損程度與間質(zhì)纖維化程度相關(guān)，即纖維化越重，缺損越明顯。推測肌纖維基底膜的變化特點，反應了生后CMT-SCM的病理演變過程。在肌細胞密集區(qū)較為正常的表達，支持肌細胞較為正常成??；在混合區(qū)和纖維化區(qū)其完整性破壞的表現(xiàn)，可能是CMT-SCM內(nèi)肌纖