川續(xù)斷總皂苷提取純化工藝及質(zhì)量分析研究.pdf

1、川續(xù)斷來源于川續(xù)斷科川續(xù)斷屬植物川續(xù)斷（Dipsacus asperWall.ex Henry）的干燥根，其因能使斷裂的筋骨接續(xù)而得名，主要用于治療腰背酸痛、肢節(jié)瘓痹、跌撲創(chuàng)傷、損筋折骨及胎動等病癥。
　　現(xiàn)代研究結(jié)果表明，川續(xù)斷中的化學(xué)成分主要為三萜皂苷，環(huán)烯醚萜，揮發(fā)油及生物堿類。這些成分在降低妊娠時子宮收縮活性，增強免疫力，抗炎及抗氧化等方面都有一定的藥理作用。其中，川續(xù)斷總皂苷部位是川續(xù)斷的主要活性成分,它在抗骨質(zhì)疏松，促

2、進骨傷愈合方面有顯著作用。本論文對川續(xù)斷總皂苷部位的提取純化工藝及其質(zhì)量進行了相關(guān)研究，以期對川續(xù)斷藥材的后續(xù)研究利用提供一定的參考。
　　本實驗考察了提取次數(shù)，乙醇濃度，提取時間和溶劑用量4個因素對川續(xù)斷總皂苷含量的影響。以提取次數(shù)為單因素考察指標，乙醇濃度，提取時間和溶劑用量為自變量，以川續(xù)斷總皂苷及續(xù)斷皂苷Ⅵ含量的總評歸一值（overall desirability，OD）為評價指標。采用紫外分光光度法測定川續(xù)斷總皂苷含量，

3、高效液相色譜法測量續(xù)斷皂苷Ⅵ含量，星點設(shè)計-響應(yīng)面法優(yōu)化川續(xù)斷總皂苷的提取工藝。結(jié)果：二項式擬合方程（R2=0.9642）優(yōu)于多元線性回歸方程(R2=0.6630)，確定最佳提取工藝為：7倍量55％乙醇回流提取3次，每次3小時。經(jīng)最佳提取工藝提取得到川續(xù)斷總皂苷含量與預(yù)測值偏差1.83%；續(xù)斷皂苷Ⅵ含量與預(yù)測值偏差4.76%。結(jié)果表明星點設(shè)計-響應(yīng)面法優(yōu)化川續(xù)斷總皂苷的提取工藝簡便可行，且預(yù)測性良好，為川續(xù)斷總皂苷的進一步開發(fā)利用提供了

4、依據(jù)。
　　對比D101型，AB-8型和DM-301型大孔吸附樹脂對川續(xù)斷總皂苷提取液的吸附和解吸附能力，采用D101型大孔樹脂富集純化川續(xù)斷總皂苷，以川續(xù)斷總皂苷吸附率和解吸率為評價指標，對大孔樹脂純化川續(xù)斷總皂苷的吸附能力做了系統(tǒng)研究，最后確定了純化工藝為：上樣濃度0.25g生藥/mL，上樣流速2BV/h，上樣量為1.1倍大孔樹脂柱體積，吸附8h后，以純凈水沖至無色，7倍量樹脂柱體積70%乙醇以1BV/h流速洗脫。驗證此最佳提

5、取工藝得：總皂苷平均轉(zhuǎn)移率達到81.3%，純化后提取物中總皂苷含量平均達到了52.9%。
　　采用高效液相色譜-紫外檢測法、半制備高效液相色譜法，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等方法制備分析鑒定川續(xù)斷總皂苷提取物中化學(xué)成分并建立含量測定方法。對川續(xù)斷總皂苷提取物進行了半制備分離，手動收集到8個化合物，其中4個化合物被確認，分別為馬錢苷，續(xù)斷苷A，α-常春藤皂苷和續(xù)斷皂苷Ⅵ。對川續(xù)斷提取物中這4個化合物及總皂苷含量進行測定，測得10批湖北

6、產(chǎn)川續(xù)斷總皂苷提取物中各化合物及總皂苷含量范圍分別為：馬錢苷：0.3047%-0.9099%；續(xù)斷苷A：0.5717%-4.1208%；α-常春藤皂苷：0.3183%-0.9423%；續(xù)斷皂苷Ⅵ：3.4417%-9.8691%；總皂苷：50.5895%-67.4925%。采用HPLC色譜法建立了川續(xù)斷總皂苷提取物的指紋圖譜，標定了10批湖北川續(xù)斷總皂苷提取物的11個共有峰，共有峰均在40min內(nèi)出現(xiàn)，且與對照圖譜相似度9批超過0.9，為