稻瘟病菌潛在蛋白激酶類藥物靶標(biāo)的篩選.pdf

1、稻瘟病是嚴(yán)重影響全球水稻產(chǎn)量的真菌病害，其致病菌稻瘟病菌具有典型的生活史和侵染循環(huán)，與宿主水稻的互作是研究病原真菌-寄主植物互作的模式之一。深入了解稻瘟病菌的致病機(jī)理對(duì)于防治稻瘟病有重要意義。蛋白激酶是一類重要的信號(hào)傳導(dǎo)分子，它通過磷酸化底物蛋白來調(diào)節(jié)其活性和基因表達(dá)。在植物病原真菌中，蛋白激酶整合了細(xì)胞內(nèi)外的信號(hào)來調(diào)節(jié)真菌的整個(gè)生命過程，包括轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞周期以及生理代謝等;許多在植物病原真菌致病過程中起重要作用的蛋白激酶成為潛在的

2、藥物靶標(biāo)。本文主要通過分析蛋白激酶家族基因在稻瘟病菌生長(zhǎng)發(fā)育和致病過程中的作用以期鑒定可以作為藥物靶標(biāo)的蛋白激酶。
　　在稻瘟病菌全基因組序列中共鑒定到113個(gè)蛋白激酶家族基因，除去已被報(bào)道的40個(gè)，我們構(gòu)建了其余73個(gè)蛋白激酶基因的敲除載體并成功得到其中38個(gè)基因缺失突變體。隨后我們系統(tǒng)地分析了此38個(gè)蛋白激酶在稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)、分生孢子產(chǎn)生、有性生殖、致病性和脅迫反應(yīng)等方面的作用。結(jié)果顯示:18個(gè)突變體生長(zhǎng)速率較野生型Guy1

3、1至少下降10％，其中ΔMo02656，ΔMo02757，ΔMo04100生長(zhǎng)速率下降30％。25個(gè)突變體分生孢子產(chǎn)量與野生型菌株Guy11存在較大差異，其中有12個(gè)突變體產(chǎn)孢量下降40％以上，有三個(gè)突變體ΔMo05074，ΔMo13931，ΔMo07012幾乎不產(chǎn)孢。12個(gè)突變體在有性生殖中產(chǎn)生較少的子囊殼。ΔMo07012，ΔMo13931表現(xiàn)出對(duì)細(xì)胞壁脅迫因子敏感。大麥接種實(shí)驗(yàn)顯示，ΔMo07012和ΔMo13931在大麥葉片上幾