LOX-1介導(dǎo)氧化應(yīng)激在大鼠主動脈損傷后再狹窄中的作用及藥物干預(yù)研究.pdf

1、目的：探討LOX-1介導(dǎo)的氧化應(yīng)激在大鼠腹主動脈球囊損傷后新生內(nèi)膜中的作用，以及藥物瑞舒伐他汀抑制內(nèi)膜增生可能的分子機(jī)制，為瑞舒伐他汀臨床防治血管重建術(shù)后再狹窄提供理論依據(jù)。
　　 方法：健康SD雄性大鼠42只，隨機(jī)分為正常對照組（6只），假手術(shù)組（12只），模型組（12只）和干預(yù)組（12只）。除對照組外，每組按處死時間又分為7d、14d組。2F Fogarty導(dǎo)管造成大鼠腹主動脈損傷，建立再狹窄動物模型。干預(yù)組術(shù)前3d始連續(xù)每

2、天予瑞舒伐他汀5mg/(kg·d)灌胃，至處死前一天。各組于術(shù)后7天、14天手術(shù)切取損傷腹主動脈作為實驗標(biāo)本。分別進(jìn)行下列檢測:(1)血管形態(tài)學(xué)檢測:病理切片HE染色，光鏡下觀察血管內(nèi)膜增生情況，并在計算機(jī)圖像分析儀下測量、分析血管內(nèi)膜面積;(2)冰凍切片熒光染色檢測活性氧ROS產(chǎn)生水平;(3) TBA法檢測大鼠血清丙二醛(MDA)的含量;(4)SP染色法免疫組織化學(xué)檢測血管壁組織LOX-1蛋白表達(dá)，高倍光鏡下觀察并計算陽性細(xì)胞百分比;

3、(5)Real Time RT-PCR檢測各組血管壁組織LOX-1mRNA表達(dá)并進(jìn)行半定量分析。
　　 結(jié)果：⑴HE染色病理切片示:與對照組和假手術(shù)組比，模型組內(nèi)膜明顯增厚，I/M比值升高;干預(yù)組內(nèi)膜增生較模型組明顯減輕，I/M比值降低。(P＜0.05)。⑵正常對照組及假手術(shù)組動脈有ROS和MDA的少量表達(dá)，但水平較低。術(shù)后7天，ROS和MDA表達(dá)增多，且絕大多數(shù)在新生內(nèi)膜表達(dá)。術(shù)后14天ROS和MDA表達(dá)進(jìn)一步增加，血管全層都

4、有ROS的表達(dá)。與假手術(shù)和對照組相比，均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。干預(yù)組較相應(yīng)時間點模型組ROS和MDA表達(dá)明顯減少，但仍高于正常(P＜0.05)。⑶免疫組化染色結(jié)果顯示:正常對照和假手術(shù)組未見陽性表達(dá)，模型7d組LOX-1表達(dá)增多，主要集中在新生內(nèi)膜區(qū)域，模型14d組LOX-1的陽性表達(dá)增強(qiáng)，棕黃色顆粒粗大。干預(yù)7d組和14d組與相應(yīng)時間點的模型組比較，LOX-1的陽性表達(dá)明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。⑷Real Time RT-P

5、CR結(jié)果顯示正常動脈LOX-1 mRNA表達(dá)極少，術(shù)后7天LOX-1 mRNA表達(dá)升高，術(shù)后14天時表達(dá)進(jìn)一步升高，與對照組及假手術(shù)側(cè)相比，有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.01);干預(yù)7天和14天組LOX-1 mRNA表達(dá)亦明顯升高，但較模型組相應(yīng)時間點明顯減少(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：①大鼠腹主動脈球囊損傷后內(nèi)膜不同程度增生，瑞舒伐他汀可顯著抑制內(nèi)膜增生，證實瑞舒伐他汀防治PTA術(shù)后再狹窄的作用。②大鼠腹主動脈球囊損傷后LOX-1