國產(chǎn)乙烯乙烯醇聚合物（EVAL）的實驗研究.pdf

1、目的：合成國產(chǎn)乙烯一乙烯醇聚合物(EVAL)進行性能測試、生物學(xué)檢測和體外栓塞實驗，探討其作為一種新型栓塞材料的可行性。應(yīng)用EVAL聚合物栓塞豬顱底微血管網(wǎng)(RMB)，探討其栓塞腦動靜脈畸形(AVM)的技術(shù)可行性、可控性和組織病理學(xué)變化。 材料和方法: 1．實驗室研究 在4～5 MPa的壓力下，以叔丁醇作溶劑，乙烯和醋酸乙烯發(fā)生自由基共聚反應(yīng)，生成乙烯-醋酸乙烯共聚物(EVA)。然后以甲醇為溶劑，強堿為催化劑，醇

2、解得到聚合物EVAL。反應(yīng)完畢后，將聚合物EVAL溶解于二甲亞砜(DMSO)中，加入一定量的鉭粉，120℃高溫滅菌30min，進行輸送模擬試驗。應(yīng)用體外腦動靜脈畸形模型進行體外模擬栓塞試驗，樣品送國家食品藥品管理局濟南醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心進行全性能檢測。 2．動物實驗 健康家豬6頭，體重25～30Kg，性別不限。分三組：急性期實驗動物(栓塞后1天、1周)2頭，亞急性期(栓塞后4周)1頭，慢性期(栓塞后8周、12周、2

3、4周)3頭。術(shù)前肌注阿托品1mg，應(yīng)用鹽酸氯胺酮結(jié)合米唑安定進行動物全麻。經(jīng)股動脈途徑，應(yīng)用5F造影導(dǎo)管行頸總動脈插管。后更換導(dǎo)引導(dǎo)管并經(jīng)此將Ultra Flow HPC微導(dǎo)管超選擇插入咽升動脈，微導(dǎo)管頭端放置在咽升動脈咽支的遠端，行微導(dǎo)管造影。經(jīng)微導(dǎo)管用1ml注射器注入國產(chǎn)EVAL，注入EVAL前用二甲亞砜(DMSO)沖洗微導(dǎo)管，以防共聚物在微導(dǎo)管內(nèi)凝聚，然后再注射栓塞劑。按預(yù)定分組時間復(fù)查造影，觀察有無血管再通現(xiàn)象。后處死動物，開顱

4、完整取出雙側(cè)RMB和腦進行組織學(xué)檢查，觀察RMB血管內(nèi)及其周圍的變化。 結(jié)果: 1．實驗室研究在210℃條件下，EVAL共聚物的熔融指數(shù)為4～15g/10min，可以滿足使用要求。EVAL溶解在二甲亞砜中后，二甲亞砜能迅速擴散在水性溶液中，EVAL以沉淀的形式迅速析出，沉淀時間符合醫(yī)用要求。對EVAL聚合物的二甲亞砜溶液進行了粘度測試及微粒含量測試，結(jié)果表明，均符合醫(yī)用要求。輸送模擬試驗表明，選擇鉭粉作為對比劑比較合適，

5、不影響共聚物的沉淀栓塞；而使用不同的微導(dǎo)管發(fā)現(xiàn)，除了Ultra Flow HPC微導(dǎo)管外，其他微導(dǎo)管內(nèi)壁均有不同程度的腐蝕。體外模擬栓塞實驗表明，樣品能夠成功地栓塞體外腦動靜脈畸形模型，微導(dǎo)管腔內(nèi)無共聚物粘附。生物檢測表明，樣品無細菌生長，內(nèi)毒素含量<20EU/支，溶血率3.2﹪，無急性全身毒性，細胞毒性反應(yīng)Ⅰ級，無皮內(nèi)刺激反應(yīng)，致敏率0﹪，植入體內(nèi)4、12和26周后，生物相容性良好，無異常組織學(xué)反應(yīng)，炎癥反應(yīng)程度符合GB/T16175

6、中的規(guī)定，無遺傳毒性反應(yīng)，重金屬含量<1.0μg/ml，pH變化值小于1.5。全性能檢測符合標(biāo)準(zhǔn)要求。 2．動物實驗 共對6頭家豬的7個RBM(1頭豬由于栓塞過程中血管痙攣，改換另一側(cè))進行了栓塞，EVAL的用量為1.3ml，平均為0.19ml。栓塞及隨訪過程中，所有的動物均生存良好，沒有感覺及運動異常。栓塞效果較為滿意，栓塞過程沒有發(fā)生堵管現(xiàn)象，除了1頭由于反流過度造成“擠管”外，拔管均很順利。作為聚合物的顯影劑鉭粉，

7、在透視下能清晰顯示栓塞部位的血管情況。栓塞后即刻造影及隨訪造影顯示，所有動物栓塞側(cè)的咽升動脈/RMB均未見顯示，只是部分奇網(wǎng)通過發(fā)自頜內(nèi)動脈的兩側(cè)支RA和AA顯影，并且與栓塞前血管造影相比，RA和AA有不同程度的增粗。動物處死后解剖，肉眼觀察腦組織，5頭未見異常變化，有1頭后交通動脈內(nèi)可見黑色栓塞物，存留于大腦腳表面，病理未見異常；RMB血管內(nèi)可見不同程度栓塞，栓塞劑在血管內(nèi)自尾側(cè)向頭側(cè)均勻彌散，所栓塞的RMB較對側(cè)質(zhì)實，RMB容易自破

8、裂孔處剝離。組織學(xué)檢查所見：急性期，栓塞的血管管腔內(nèi)可見黑色物沉著，其內(nèi)可見急性血栓形成，栓塞劑周圍可見炎性細胞浸潤，主要為中性粒細胞，血管內(nèi)膜破壞，內(nèi)彈力層、肌層及外膜尚完整，管壁也可見中性粒細胞浸潤，血管外周可見大量的紅細胞、嗜酸性粒細胞及中性粒細胞浸潤。左側(cè)大腦腳處(大體標(biāo)本發(fā)現(xiàn)有黑色鉭粉沉著處)，光鏡下除有少量炎細胞浸潤外，未見明顯異常。亞急性期，栓塞的管腔內(nèi)可見黑色栓塞物沉著，周圍有肉芽組織形成，栓塞劑周圍可見炎性細胞浸潤，內(nèi)

9、膜破壞，內(nèi)彈力層、部分肌層及外膜不完整，血管周圍可見單核細胞、少量異物巨細胞及組織細胞浸潤以及少量肉芽組織形成。慢性期，栓塞側(cè)血管內(nèi)及周圍仍可見不同程度的炎性浸潤，包括單核細胞、淋巴細胞、組織細胞及異物巨細胞，栓塞劑在血管內(nèi)存留良好，血管壁不同程度的變薄及破壞，血管內(nèi)及周圍可見不同程度的肉芽組織/纖維化。 結(jié)論: 1．國產(chǎn)EVAL生物相容性好，無全身毒性和遺傳毒性。 2．國產(chǎn)EVAL具有非粘附性，可以有效栓塞體外