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1、G蛋白門控的內(nèi)向整流鉀離子通道(G protein gatedinwardly rectifying K channels,GIRK)是內(nèi)向整流鉀通道家族中的一員,存在5種亞單位(GIRK1-5),它們與神經(jīng)興奮性和心率的調(diào)節(jié)有關(guān),特別在維持神經(jīng)元的靜息電位及慢突觸后抑制中起重要作用。GIRK通道的分子組成已經(jīng)得到鑒定,是Kir3.x鉀通道家族的成員。GIRK通道的功能除了受G蛋白的調(diào)節(jié)外,另外還受到磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP<
2、,2>)、細(xì)胞內(nèi)的鈉、乙醇及機(jī)械性牽張作用的調(diào)節(jié)。GIRK1和GIRK4主要分布在心房和竇房結(jié)細(xì)胞中,在調(diào)節(jié)心臟興奮性中起重要作用,由迷走神經(jīng)釋放的遞質(zhì)乙酰膽堿(Acetylcholine,ACh)通過(guò)興奮Ⅱ型毒蕈堿樣受體(M2)以及下游的PTX敏感的Gi蛋白激活GIRK通道,引起膜動(dòng)作電位超極化,減少動(dòng)作電位的頻率,減慢心率。GIRK2主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng),許多神經(jīng)遞質(zhì)如γ-氨基丁酸、多巴胺、5-羥色胺和阿片肽類等通過(guò)激活PTX敏感
3、的Gi蛋白激活GIRK通道,調(diào)節(jié)神經(jīng)細(xì)胞的興奮性。已有研究表明,Gi/o偶聯(lián)的受體激活后能夠激活而Gq及Gs G蛋白偶聯(lián)的受體激活后卻不能激活GIRK通道,表明G蛋白偶聯(lián)的受體在調(diào)節(jié)GIRK功能中有特異性。例如,在心肌組織中,只有與PTX敏感的G蛋白(Gi/Go)偶聯(lián)的受體如M2毒蕈堿樣受體,A1嘌呤能受體及EDG 家族的神經(jīng)鞘脂類受體能夠激活GIRK通道,而與PTX不敏感的G蛋白(Gs)偶聯(lián)的受體如β腎上腺素能受體卻不能激活G
4、IRK通道。研究表明Gi蛋白是通過(guò)激活后釋放的Gβγ亞單位激活GIRK通道的,目前已發(fā)現(xiàn)了至少5種β亞單位和12種γ亞單位,然而,幾乎所有不同組合形式的Gβγ亞單位均能激活GIRK通道,所以受體激活GIRK通道的選擇性不能用Gβγ二聚體的不同組合類型來(lái)解釋。我們前期工作表明Gα亞單位在受體激活GIRK通道的選擇性中可能起重要的作用。本研究重點(diǎn)觀察了Gα亞單位與GIRK通道的直接結(jié)合情況。在本實(shí)驗(yàn)中以非洲爪蟾卵母細(xì)胞為表達(dá)系統(tǒng),研究了內(nèi)源
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