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1、目的:探討腹腔復(fù)蘇對(duì)失血性休克大鼠小腸粘膜的保護(hù)作用。 方法:健康雄性SD大鼠50只隨機(jī)分為5組,分別為假手術(shù)組(Ⅰ組)、失血性休克組(Ⅱ組)、靜脈復(fù)蘇組(Ⅲ組)、靜脈復(fù)蘇加生理鹽水腹腔復(fù)蘇組(Ⅳ組)、靜脈復(fù)蘇加PD-2液腹腔復(fù)蘇組(Ⅴ組),每組10只。Ⅰ組依次行右頸總動(dòng)脈、右股靜脈、左股動(dòng)脈插管及全身肝素化;Ⅱ組在Ⅰ組基礎(chǔ)上采用Wiggers改良法經(jīng)左股動(dòng)脈放血(平均動(dòng)脈壓降至40mmHg維持60min)制備失血性休克大鼠模型
2、;Ⅲ組在Ⅱ組基礎(chǔ)上于造模后經(jīng)右股靜脈補(bǔ)入放出的血量及2倍量林格氏液進(jìn)行靜脈復(fù)蘇;Ⅳ組在Ⅲ組基礎(chǔ)上同時(shí)腹腔內(nèi)注入30ml生理鹽水;Ⅴ組在Ⅲ組基礎(chǔ)上同時(shí)腹腔內(nèi)注入30ml2.5% PD-2液。Ⅰ組大鼠經(jīng)右頸總動(dòng)脈、右股靜脈、左股動(dòng)脈插管及肝素化后120min取材(血及小腸標(biāo)本)待測(cè);IⅡ組大鼠于造模后60min取材;Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ組大鼠于復(fù)蘇后60 min取材。采用活性比色法測(cè)定血漿二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)活性,分光
3、光度法測(cè)定血漿D-乳酸(D-lactic acid,D-LA)含量,比濁法測(cè)定血漿內(nèi)毒素(endotoxin)含量,并在光鏡及電鏡下觀察各組大鼠小腸粘膜組織學(xué)和亞細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。 結(jié)果:血漿DAO活性、D-LA含量及內(nèi)毒素含量,Ⅱ組較Ⅰ組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
4、Ⅱ、Ⅲ及Ⅳ組降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05 or P<0.01)。光鏡下見Ⅱ組大鼠小腸粘膜絨毛高度水腫、大片狀壞死、脫落,缺損,粘膜下血管塌陷,固有層內(nèi)腺體灶性區(qū)域壞死;Ⅲ組和Ⅳ組小腸粘膜變化較Ⅱ組略減輕;Ⅴ組大鼠小腸粘膜絨毛輕度水腫,絨毛輕度倒伏,粘膜下血管較充盈。電鏡下見Ⅱ組大鼠小腸粘膜線粒體高度腫脹,嵴缺失,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹或融合,上皮細(xì)胞微絨毛稀疏、缺如,細(xì)胞萎縮,大量細(xì)胞核濃縮,染色質(zhì)邊聚;Ⅲ組、Ⅳ組大鼠小腸粘膜線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)
5、、微絨毛、細(xì)胞核濃縮,染色質(zhì)邊聚較Ⅱ組略減輕;Ⅴ組大鼠小腸粘膜上皮細(xì)胞線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹輕微,上皮細(xì)胞微絨毛排列尚規(guī)整。 結(jié)論:1.本實(shí)驗(yàn)在Wiggers改良法基礎(chǔ)上成功建立了HS大鼠模型;2.靜脈復(fù)蘇加PD-2液腹腔復(fù)蘇可明顯降低血漿DAO活性、D-LA及內(nèi)毒素含量。證明其通過改善HS大鼠小腸粘膜組織病理學(xué)和亞細(xì)胞形態(tài)變化,抑制腸道菌群移位而實(shí)現(xiàn)對(duì)小腸粘膜的保護(hù)作用;3.PD-2液腹腔復(fù)蘇對(duì)HS大鼠小腸粘膜的保護(hù)作用可能優(yōu)于生
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