三七、淫羊藿提取物和片劑的質(zhì)量研究.pdf

1、中藥作為中華民族科學、文化和歷史的偉大寶庫，是我國在自然科學領域最具有優(yōu)勢、最有特色、最有希望的學科之一。三七、淫羊藿是我國傳統(tǒng)中藥，通過現(xiàn)代藥理實驗研究表明，淫羊藿和三七配伍使用，對防治阿爾茨海默病(AD)有積極意義。 本次研究的片劑在此指導下研制，為了配合藥物的研究開發(fā)，本文按照中藥新五類的申報要求，對三七、淫羊藿提取物幫片劑的持質(zhì)進行了研究。 一、三七、淫羊藿提取物的質(zhì)置研究 目的:對三七、淫羊藿提取物的質(zhì)

2、量進行全面研究。 方法: 1)選用AgilentEXtend-c18色譜柱(250×4.6mm，5μm)，乙腈-水為流動相，梯度洗脫，檢測波長203nm，進樣量10μL,流速:1.0mL.min-1,測定三七提取物中三七皂苷Rl、人參皂苷Rgl、人參皂苷Re和人參皂苷Rb1含量；采用香蘭素比色法，人參皂苷Re為對照，550nm波長，測定三七提取物中總皂苷含量；參考《中國藥典》有關規(guī)定，對三七提取物的水分、熾灼殘渣、重金屬

3、、砷鹽進行了檢查；選用硅膠G薄層板，三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酵-水(32：l：16：4)為展開劑，點樣1μL，對三七提取物進行了鑒別:采用標準溶液加入法，Agilent Hp-INNOWAX(30mx0.32mm，0.25μm)毛細管色譜柱，F(xiàn)lD檢測器，測定了三七提取物中7種有機溶劑殘留量;用確定的含量測定方法，考察三七提取物的影響因素。 2)選用Agilent SB-18色譜柱(250X4.6mm，5μm)，乙腈-水<26：7

4、4)為流動相，檢測波長270nm，進樣量10μL,流速：1.0mL·min-1，測定淫羊藿提取物中淫羊藿苷含量；采用紫外法，淫羊藿苷為對照，270nm波長，測定淫羊藿提取物中總黃酮含量；參考《中國藥典》有關規(guī)定，對淫羊藿提取物的水分、熾灼殘渣、重金屬、砷鹽進行了檢查；選用硅膠H薄層板，乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10：1:1：1)為展開劑，點樣10μL，對淫羊藿提取物進行了鑒別;用確定的含量測定方法，考察淫革藿提取物的影響因素。

5、結果: 1)4種皂苷含量測定中，在考察的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關系(三七皂苷R1r=0.9997，人參皂苷Rg1r=0.9999，人參皂苷Re r=0.9997和人參皂苷Rb1 r=0.9999)，不同濃度的回收率95.29％-104.5％，日內(nèi)精密度RSD均<4.4％，日間精密度RSD均<6.8％?？傇碥蘸繙y定中，對照品質(zhì)量范圍為0　0678-0　21696mg時，吸光度和質(zhì)量呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為Y=4.1135

6、X-0.0127，相關系數(shù)r=0.9993，不同濃度的回收率96.88％-101.8％，日內(nèi)、日間精密度RSD均<5.0％。三批三七提取物的水分含量為3.236％，4.501％，3.266％，熾灼殘渣所得殘渣為0.2262％，0.2696％，0.2409％，重金屬均<10ppm，砷鹽均<3.3ppm。薄層鑒別中，提取物中幾種皂苷得到了很好的分離。殘留溶劑測定中，在考察的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關系(乙醇r=0.9994，正已烷r=0.9

7、982，苯r=0.9999，甲苯r=0.9991，二翠苯r=0.9994，苯乙烯r=0.9997和二乙烯苯r=0.9932)，回收率81.74％～111.2％，日內(nèi)、日間精密度RSD均小于10.0％。三七提取物經(jīng)高溫試驗(40℃和60℃)、高濕度試驗(RH75±5％　和RH90±5％)和強光照射試驗(4500±500Lx)下放置lO天，發(fā)現(xiàn)高溫對提取物的外觀、含量影響不大，但在高濕度下提取物吸濕性較明顯，在強光下提取物含量有所下降，提示

8、提取物需避光、干燥保存。 2)淫羊藿苷含量測定中，在0.0208-0.208mg·mL-1濃度范圍內(nèi)峰面積和濃度呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為Y=12085X-24.245，相關系數(shù)r=0.9998，不同濃度的回收率96.22％～101.0％，日內(nèi)、日間精密度RSD均<2.0％?？傸S酮含量測定中，在0.00208-0.0208mg·mL-1濃度范圍內(nèi)吸光度和濃度呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為Y=34.876X＋0.0083,相關

9、系數(shù)r=0.9996，不同濃度的回收率95.81％～97.70％，日內(nèi)、日間精密度RSD均<2.0％。三批淫羊藿提取物的水分含量為4。438％，4.428％，4.423％，熾灼殘渣所得殘渣為1.266％，1.330％，1.282％，重金屬均《10ppm，砷鹽均<2ppm。薄層鑒別中，提取物中幾種黃酮得到了很好分離。淫羊藿提取物經(jīng)高溫試驗(60℃)、高濕度試驗(RH7525％和RH90-5％)和強光照射試驗(4500±500tx)下放置1

10、0.0天，發(fā)現(xiàn)高溫和強光對提取物的外觀、含量影響不大，在高濕度下，提取物性狀發(fā)生改變，提示提取物需密閉、干燥保存。 結論:建立的各種方法可用于考察三七、淫羊藿提取物的質(zhì)量，為制定提取物的質(zhì)量標準提供了依據(jù)。 二、三七、淫羊藿片劑的質(zhì)量研究 目的:建立三七、淫羊藿片劑含量測定和溶出度測定方法。 方法: 1)選用AgilentSB-C18色譜桂(250X4.6mm，5μm)，乙腈-水為流動楣，梯度洗脫

11、，檢測波長203nm和270mm，進樣量5μL，流速：1.0mL·min-1，測定片劑中4種皂苷(三七皂苷Rl，人參皂苷Rgl，人參皂苷Re和人參皂苷Rbl)和淫羊藿營含量；采用香蘭素比色法，人參皂菅Re為對照，550rim波長，測定片劑中總皂營含量；采用紫外法，淫羊藿苷為對照，270nm波長，測定片劑中總黃酮含量。 2)采用槳法，以經(jīng)過脫氣處理的900mL水為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為100rpm.，HPLC法測定片劑中4種皂營(三七皂

12、苷R1,人參皂苷Rg1，人參皂菅Re和入?yún)⒃碥誖b1)溶出量和淫羊藿苷溶出量，紫外法測定總黃酮溶出量。 結果: 1)HPLC法：在考察的濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關系(三七皂苷R1r=0.9991,人參皂苷Rg1r=0.9993，人參皂苷Rer= 0.9991，人參皂苷Rb1r=0.9992和淫羊藿苷r=0.9994)，不同濃度的回收率95.07％～104.6％，日內(nèi)、日間精密度RSD均<5.0％。比色法:對照品質(zhì)量范強為

13、0.08136-0.24408mg時，吸光度和質(zhì)量呈現(xiàn)良好的線性關系，線性方程為Y=4.1538X-0.1764，相關系數(shù)，r=0.9993，不同濃度的回收率97.63％～101.3％，日內(nèi)、日聞精密度RSD均暮途窮<4.0％。紫外法：在0.00909～0.021816mg·mL-1濃度范圍內(nèi)吸光度和濃度呈現(xiàn)良好的線性關系，Y=36.578X-0.0075，r=0.9993，不同濃度的回收率97.10％～100.6％，日內(nèi)、日間精密度R