Nampt在限食改善代謝功能中的作用.pdf

1、越來越多的代謝機能失調被認為與久坐不動的生活方式和高熱量飲食攝入密切相關。限食(calorie restriction，CR)是一種飲食干預的調理手段，通過限制高熱量飲食攝入，達到改善代謝功能，延緩衰老的目的。它是目前控制體重、延緩衰老重復性最好的實驗手段之一。限食在多種動物模型中被證明在抗衰老，預防疾病，提升生活質量等方面具有重大意義。然而限食改善代謝功能的潛在機制至今未被完全闡明。
　　 煙酰胺磷酸核糖轉移酶（nicotin

2、amide pho sphoribo syltransferase，Nampt），又名內臟脂肪素（visfatin），是一種由脂肪細胞分泌的細胞因子。作為哺乳動物NAD+合成途徑的限速酶，Nampt在調節(jié)細胞能量供應、能量轉化的過程中具有非常重要的作用。除了參與細胞能量代謝，多項實驗結果表明，Nampt還參與調控晝夜節(jié)律、抗細胞凋亡、機體免疫反應和炎癥應答等多種生命活動。臨床研究表明，Nampt還與2型糖尿病、脂代謝異常、肥胖、胰島素抵

3、抗、代謝綜合征等多種臨床疾病密切相關。Nampt的酶反應產物NMN在老年性糖尿病小鼠的治療過程中也具有非常重要作用。
　　 由于Nampt是NAD+合成途徑中的限速酶，NAD+又是限食改善代謝功能中關鍵分子SIRT1活性依賴的重要輔酶。因此，我們推測Nampt也可能成為限食在改善代謝過程中的重要分子。基于這樣的假設，我們使用了抑制Nampt酶活的化學抑制劑FK866，全身性抑制Nampt酶活后觀察對限食改善代謝功能的影響。

4、>　　 實驗方法
　　 我們將SD大鼠隨機分為四組:自由飲食組(AL)，限食組(CR)，AL+FK866組，CR+FK866組。FK866通過飲水給予，限食處理八周。通過比較不同組大鼠整體代謝特征、胰島素敏感性及胰島素受體后信號通路活化程度，研究Nampt在限食改善代謝功能中的作用。通過對四組大鼠SIRT1活性的比較，從機制角度對Nampt在調節(jié)限食效應中的作用進行進一步闡述。
　　 實驗結果
　　 1、限食能

5、顯著提高大鼠骨骼肌和白色脂肪組織中Nampt mRNA及蛋白表達水平，增強這兩種組織Nampt酶活性。但給予FK866后，限食介導的Nampt活性上調被抑制。
　　 2、限食能顯著改善機體代謝功能，降低空腹胰島素和血糖水平、胰島素抵抗指數HOMA-IR和血清瘦素(Leptin)水平。但這種代謝改善作用在一定程度上被FK866抑制。
　　 3、限食能提高全身胰島素敏感性，促進胰島素受體后信號通路的活化(Akt、AS160磷

6、酸化增強)，給予FK866會使限食的這種效應受到抑制。
　　 4、限食能顯著上調骨骼肌和白色脂肪組織中SIRT1的表達和活性（FOXO-1和PGC-1α去乙酰化水平上調）。使用FK866抑制Nampt酶活后不影響SIRT1表達，卻抑制限食介導的SIRT1活性增加。
　　 綜上所述，本課題通過實驗證明，Nampt在限食過程中表達和活性上調，阻斷Nampt活性將抑制限食對機體代謝功能的改善和胰島素增敏作用，第一次闡明了Nam