重癥急性胰腺炎時AngⅡ與腎臟微循環(huán)變化及依那普利拉干預(yù)的實驗研究.pdf

1、目的：重癥急性胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis，SAP)發(fā)病急驟，病情危重，且常并發(fā)多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)，其胰外器官損傷中腎功能障礙發(fā)生率僅次于肺功能障礙，且大多伴有其它器官系統(tǒng)的損害，發(fā)展至急性腎功能衰竭(acute renal failure，ARF)后死亡率極高，成為SAP患者死亡的重要原因之一。因此，及早的防治腎功能衰竭

2、就顯得尤為重要，近年來研究認(rèn)為：SAP時腎臟微循環(huán)障礙是腎臟損害的主要因素。依那普利拉(Eenalaprilat)是前體藥物馬來酸依那普利在體內(nèi)的活性代謝物，體內(nèi)有抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶活性作用。目前依那普利拉注射液主要用于重度高血壓的治療；依那普利片雖已有報道以灌胃途徑用于SAP，但以靜脈途徑用于SAP的治療尚無報道。因此本實驗采用經(jīng)胰膽管逆行注射5％?；悄懰徕c制成大鼠SAP模型。觀察胰腺及腎臟組織大體和病理改變，測定血清淀粉酶(AMY

3、)、脂肪酶(LIP)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)，觀察并測定腎皮質(zhì)微循環(huán)血液灌注量、毛細(xì)血管管徑及血管密度，測定血漿血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)，并研究依那普利拉干預(yù)后上述指標(biāo)的變化。旨在探討SAP時腎臟微循環(huán)障礙機制，并發(fā)掘有效的藥物干預(yù)，為指導(dǎo)臨床治療提供實驗理論依據(jù)。 方法：健康SD雄性大鼠72只，體重250±30g，隨機分成9組，每組8只，包括：假手術(shù)2、6、12小時(SO 2h、6h、12h)組；SAP 2、6、12小

4、時(SAP 2h、6h、12h)組；依那普利拉治療2、6、12小時(Ena2h、6h、12h)組。采用經(jīng)胰膽管逆行注射5％?；悄懰徕c制各大鼠SAP模型，并建立經(jīng)尾靜脈給藥途徑，各組在手術(shù)完成即刻給藥并間斷補液。按設(shè)定時點進(jìn)行胰腺、腎臟組織大體觀察，測量腹水量，用LISCA激光多普勒組織灌注圖像儀測定。腎皮質(zhì)微循環(huán)血液灌注量，用WX-9B型微循環(huán)顯微鏡觀察腎皮質(zhì)微循環(huán)(RCM)，測定腎皮質(zhì)毛細(xì)血管管徑及血管密度，留取血液及組織標(biāo)本。測定胰

5、腺、腎臟病理評分。檢測血清AMY、LIP、BUN、Cr，用放免方法檢測血漿血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)。實驗數(shù)據(jù)利用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果： 1.腹水情況：SAP各時點組均有大量紅色或暗紅色混濁腹水，腹水量在3-12ml之間，且腹水量隨時間延長有明顯增加(P＜0.05)； 2.胰腺及腎臟病理形態(tài)學(xué)改變： 2.1 大體觀察：SAP各時點組胰腺存在不同程度充血水腫，片狀出血及黑色壞死，散在皂化斑；腎周

6、脂肪囊散在皂化斑外，未見明顯異常，以上情況隨時間延長逐漸加重； 2.2 光鏡下觀察：胰腺：SAP各時點組可見程度不同的腺泡及間質(zhì)水腫、片狀出血及壞死，胰腺病理評分明顯增高(P＜0.01)；腎臟：SAP各時點組可見腎小球出血，腎小管內(nèi)紅細(xì)胞管型，管腔內(nèi)有脫落上皮細(xì)胞，腎臟病理評分明顯增高(P＜0.01)，并隨時間延長，情況加重： 3.SAP各時點組AMY、LIP及BUN、Cr水平明顯升高(P＜0.01)。 4 腎臟微循環(huán)變

7、化：SAP各時點組腎皮質(zhì)血液灌注量降低(P＜0.01)，隨著時間延長逐漸減少；毛細(xì)血管網(wǎng)變模糊，甚至消失，且隨時間延長逐漸加重；毛細(xì)血管管徑變小(P＜0.01)，毛細(xì)血管密度降低(P＜0.01)，隨時間延長逐漸加重。 5 SAP各時點組血漿AngⅡ水平明顯增加(P＜0.01)，且隨時間延長逐漸增加。 6 Ena各時點組情況變化： 6.1 腹水情況：各時點腹水量均明顯減少(P＜0.05)； 6.2 胰腺及腎

8、臟病理形態(tài)學(xué)改變： 6.2.1 大體觀察：胰腺水腫、充血、壞死程度減輕，胰周、腎周脂肪囊皂化有不同程度減輕； 6.2.2 光鏡下觀察：胰腺：依那普利拉干預(yù)后大鼠以水腫及點片狀出血為主，炎細(xì)胞侵潤程度減輕，壞死范圍縮小，胰腺病理評分明顯降低(P＜0.01)；腎臟病理變化減輕，病理評分明顯降低(P＜0.05)； 6.3 各時點AMY、LIP及BUN、Cr水平明顯降低(P＜0.01)。 6.4 腎臟微循環(huán)變化：

9、腎皮質(zhì)血液灌注量明顯升高(P＜0.05)，毛細(xì)血管管徑變大(P＜0.05)，毛細(xì)血管密度增高(P＜0.01)。 6.5 各時點血漿AngⅡ水平明顯降低(P＜0.01)。 結(jié)論： 1.經(jīng)大鼠胰膽管逆行注射5％?；悄懰徕c，可成功制備大鼠SAP模型，此實驗方法穩(wěn)定，重復(fù)性好。 2.SAP時，腎組織發(fā)生病理改變，腎功能產(chǎn)生障礙，且隨時間延長而加重，說明SAP時可并發(fā)腎臟損傷性變化。 3.SAP時，腎組織微

10、循環(huán)發(fā)生障礙，且程度越重，腎組織病理改變越嚴(yán)重，腎功能障礙程度越重，說明微循環(huán)障礙導(dǎo)致了。腎臟損傷性變化。 4 隨著SAP的進(jìn)展，血漿AngⅡ水平升高，腎組織微循環(huán)發(fā)生障礙，腎組織發(fā)生病理改變，腎功能產(chǎn)生障礙，說明SAP時RAS激活，導(dǎo)致腎組織微循環(huán)發(fā)生障礙；AngⅡ是腎臟微循環(huán)障礙，進(jìn)而導(dǎo)致腎臟損傷性變化的重要介質(zhì)。 5 應(yīng)用依那普利拉治療，血漿AngⅡ水平下降，腎臟微循環(huán)障礙改善，腎臟病理改變減輕，腎功能改善，說明依那普利拉