血紅素氧合酶誘導(dǎo)的JNK在腦出血后腦損傷中的作用.pdf

1、目的:
　　 1.觀察大鼠ICH后血腫周圍腦組織中HO-1、JNK、p-JNK的表達規(guī)律、對神經(jīng)功能、腦水腫的影響,以及應(yīng)用誘導(dǎo)劑Hemin和抑制劑ZnPP后的變化情況。
　　 2.探討HO-1、JNK在ICH后腦損傷中的作用。
　　 方法:
　　 第一部分:
　　 1.將SD大鼠隨機分為5組,ICH組(ICH組)、氫氧化鈉組(作為溶劑對照組,Na組)、Hemin組(誘導(dǎo)劑,H組)、ZnPP組(抑

2、制劑,Z組)、生理鹽水組(作為假手術(shù)對照組,同側(cè)尾狀核內(nèi)注射生理鹽水,NS組)。Na組、H組,Z組在造模前2h時分別經(jīng)腹腔注入0.1％NaOH溶液、2.5％Hemin溶液、2.0％ZnPP溶液2ml/kg。
　　 2.大鼠麻醉后固定于立體定向儀上,經(jīng)立體定向向右側(cè)尾狀核區(qū)注入50μl自體血,NS組注入50μl生理鹽水。
　　 3.于造模后各時間點(6h,12h,24h,48h,72h,5d)用Berderson評分方法進

3、行神經(jīng)功能評分,處死大鼠并取血腫及周圍組織,采用免疫組化方法檢測HO-1、JNK、p-JNK的表達及分布。
　　 4.造模后48h(HO-1表達高峰時間點),采用干濕重法測腦組織含水量。造模后48h應(yīng)用HE染色法觀察炎性細(xì)胞浸潤,并將以上結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 第二部分:
　　 將SD大鼠隨機分組,制作ICH模型后,按時間點(6h,12h,24h,48h,72h,120h)分別處死并取血腫及周圍組織,采用We

4、stern blot方法檢測血腫及周圍腦組織HO-1含量的動態(tài)變化。在HO-1表達高峰時間點,分別比較ICH組、Na組、H組、Z組、NS組HO-1、JNK、p-JNK的含量變化。
　　 結(jié)果:
　　 1.ICH后大鼠出現(xiàn)神經(jīng)功能缺損,3d達高峰;ICH組、Na組、H組與Z組的神經(jīng)功能評分比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.ICH組、Na組、H組腦組織含水量高于NS組,Z組較ICH組、Na組、H組腦組織含水量降低。<

5、br>　　 3.在造模后6h,血腫周圍有少量HO-1、p-JNK陽性細(xì)胞,12～120h HO-1陽性細(xì)胞數(shù)均明顯增多,HO-1在48 h達到峰值,而p-JNK在72 h達到峰值。NS組病灶周圍HO-1、p-JNK的表達水平均明顯低于其它各組,且細(xì)胞著色淺,不同時間點差別無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 4.Western-blotting結(jié)果顯示HO-1、JNK、p-JNK蛋白表達趨勢和免疫組化結(jié)果一致。
　　 5.造模后48h