運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方治療小兒遷延性腹瀉機(jī)理的研究.pdf

1、小兒遷延性腹瀉（IPD）是兒科常見病，嚴(yán)重危害小兒健康成長(zhǎng)。近年來研究表明，IPD與患兒免疫功能低下、腸道菌群失調(diào)、胃腸激素紊亂以及胃腸動(dòng)力異常有關(guān)。中醫(yī)理論認(rèn)為引起小兒泄瀉的原因，以感受外邪、內(nèi)傷飲食和脾胃虛弱等為多見，其主要病變?cè)谄⑽福蛭钢鞲焖?，脾主運(yùn)化精微，如脾胃受病，則飲食入胃，水谷不化，精微不布，合污而下，致成泄瀉。根據(jù)綜合文獻(xiàn)資料，中醫(yī)證型構(gòu)成分布，1093例遷延性腹瀉中醫(yī)證型的構(gòu)成以脾虛證居首位，占51.97％，其余

2、依次為脾虛濕困證（19.67％）、脾腎陽(yáng)虛證（7.78％）、脾虛挾實(shí)證（7.14％）、傷食瀉證（3.88％）等。但不論其病因是什么，病機(jī)只有一個(gè)，就是脾胃功能失調(diào)，水谷不能轉(zhuǎn)輸，清濁并趨于腸，瀉泄即作。治療上要“察其有滯無滯，詳辨其虛實(shí)而治之”。治療應(yīng)以健脾益氣為本，脾胃運(yùn)化正常，則諸癥消除，腹瀉自止。 運(yùn)脾溫陽(yáng)法組方是郁曉維教授在已故中醫(yī)兒科學(xué)專家江育仁教授“脾健不在補(bǔ)貴在運(yùn)”[3]的治脾原則基礎(chǔ)上擬訂的，以運(yùn)脾溫陽(yáng)法為大法，

3、方以蒼術(shù)為主藥，醒脾助運(yùn)，苦溫燥濕，配合山楂消積導(dǎo)滯、炮姜、肉豆蔻溫運(yùn)脾陽(yáng)、茯苓、澤瀉健脾滲濕，具有運(yùn)脾溫陽(yáng)，消積滲濕的功效。在臨床上用于治療小兒遷延性腹瀉，在減少患兒大便次數(shù)、改善大便性狀、增進(jìn)食欲方面有具有良好的治療效果。前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，運(yùn)脾溫陽(yáng)方具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌、止瀉作用，能降低胃排空、抑制胃動(dòng)力。 在此研究的基礎(chǔ)上，我們將運(yùn)脾溫陽(yáng)方按照其組方原則及藥性配伍拆方為運(yùn)脾方（蒼術(shù)、山楂）、健脾方（茯苓、澤瀉）、溫陽(yáng)方（炮

4、姜、肉豆蔻），觀察運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方對(duì)胃腸粘膜的微觀結(jié)構(gòu)、胃腸消化酶以及免疫方面的影響，以期探索運(yùn)脾溫陽(yáng)方對(duì)小兒遷延性腹瀉的作用機(jī)理，同時(shí)探討方中各配伍組中藥的配伍意義，為豐富對(duì)“運(yùn)脾溫陽(yáng)”功效中藥的認(rèn)識(shí)，擴(kuò)展其應(yīng)用提供支持。 整個(gè)研究分為三部分內(nèi)容： 第一部分研究苦寒瀉下結(jié)合飲食失節(jié)法致脾虛大鼠模型的建立。將180g～220g大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和模型組。模型組大鼠按2ml/100g灌胃100％大黃水煎液，正常對(duì)照組

5、給予等體積生理鹽水，連續(xù)15天。灌胃前禁食12小時(shí)。實(shí)驗(yàn)中觀察大鼠一般狀態(tài)，記錄體重變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束取胸腺稱重，計(jì)算臟器指數(shù)。打開腹腔取十二指腸下1cm處的腸組織，在光學(xué)顯微鏡下觀察大鼠小腸病理組織學(xué)變化情況。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)期間，模型組動(dòng)物體重下降，逐漸出現(xiàn)便溏，肛門污穢，消瘦，活動(dòng)逐漸減少，拱背，扎堆，眼瞇，毛發(fā)于枯無光澤。實(shí)驗(yàn)?zāi)?，模型組大鼠體重嚴(yán)重下降，胸腺指數(shù)與正常對(duì)照組比較有所降低。病理檢查結(jié)果顯示，模型組大鼠大部分小腸粘膜中到重度絨

6、毛變矮變小甚至消失，粘膜上皮中到重度大片壞死，上皮細(xì)胞消失，腺體破壞亦比較嚴(yán)重。粘膜層可見較多嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。部分血管擴(kuò)張充血。結(jié)果提示，用大黃苦寒瀉下結(jié)合飲食失節(jié)可導(dǎo)致大鼠小腸粘膜結(jié)構(gòu)破壞，影響胃腸運(yùn)動(dòng)，免疫功能降低，同時(shí)造成大鼠出現(xiàn)類似脾虛的證候，如精神萎靡、畏寒、毛發(fā)稀疏豎立、體重減輕，泄瀉等現(xiàn)象與臨床上的脾虛癥狀極為相似?？勺鳛橐环N有效的脾虛動(dòng)物模型，用于評(píng)價(jià)相關(guān)藥物的作用。 第二部分研

7、究運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方對(duì)脾虛大鼠消化系統(tǒng)功能的影響。第一節(jié)中采用苦寒瀉下法制作脾虛動(dòng)物模型，在造模的同時(shí)各給藥組按1ml/100g體重灌胃給藥，觀察運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方對(duì)大鼠小腸粘膜結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果：運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方能夠改善脾虛大鼠小腸粘膜上皮，恢復(fù)微絨毛，促進(jìn)腺體再生，對(duì)小腸黏膜有不同程度的修復(fù)作用。在恢復(fù)程度中，復(fù)方效果最好，運(yùn)脾方與健脾方次之，而溫陽(yáng)方雖也能恢復(fù)病變小腸，但作用不及以上三組。第二節(jié)中，檢測(cè)了運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方對(duì)脾虛大

8、鼠血清淀粉酶和小腸二糖酶的影響。結(jié)果：模型對(duì)照組血清淀粉酶、二糖酶活性低于正常對(duì)照組非常明顯，經(jīng)運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方干預(yù)后，各組血清淀粉酶活性均有所提高，其中復(fù)方組改善最明顯，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05），其他各拆方組淀粉酶活性有所提高，但與模型組比較無顯著性差異。而在二糖酶活性方面，復(fù)方組、運(yùn)脾組、健脾組、溫陽(yáng)組活性均有所增強(qiáng)，與模型對(duì)照組比較均有顯著性差異（P<0.01）。其中復(fù)方改善效果最好，運(yùn)脾方次之。各給藥組間比較無

9、顯著性差異。 第三部分研究了運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方對(duì)脾虛大、小鼠免疫功能的影響。第一節(jié)中檢測(cè)了運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方對(duì)脾虛大鼠分泌型IgA和小腸PGE2的含量，結(jié)果顯示，脾虛模型對(duì)照組大鼠小腸PGE2與正常對(duì)照組相比顯著性升高（P<0.01），經(jīng)運(yùn)脾溫陽(yáng)方干預(yù)后，復(fù)方組、運(yùn)脾組、健脾組、溫陽(yáng)組PGE2含量均有所降低，與模型組比較具有顯著性差異（P<0.01）。而模型組SIgA與正常對(duì)照組比較明顯降低（P<0.01），復(fù)方組、運(yùn)脾組、健脾

10、組、溫陽(yáng)組較模型組相比SIgA均有所升高（P<0.05，P<0.01）。且四個(gè)給藥組組間比較中，都以復(fù)方作用最好。第二節(jié)用MTT法檢測(cè)運(yùn)脾溫陽(yáng)方在體內(nèi)對(duì)大黃致脾虛小鼠脾細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果顯示治療組能顯著促進(jìn)ConA和LPS誘導(dǎo)的正常及脾虛小鼠的脾細(xì)胞增殖反應(yīng)，與脾虛模型組相比較有顯著性差異。第三節(jié)觀察運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方含藥血清對(duì)正常及脾虛小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果顯示，運(yùn)脾溫陽(yáng)方及拆方中運(yùn)脾方、溫陽(yáng)方均能不同程度的促進(jìn)ConA誘導(dǎo)

11、的脾虛小鼠T淋巴細(xì)胞增殖，且以復(fù)方作用最強(qiáng)，而健脾組對(duì)T淋巴細(xì)胞的增殖未見明顯促進(jìn)作用。對(duì)LPS誘導(dǎo)的正常小鼠B淋巴細(xì)胞增殖方面，運(yùn)脾溫陽(yáng)復(fù)方及其拆方運(yùn)脾方、健脾方、溫陽(yáng)方均能促進(jìn)其脾細(xì)胞增殖，且同樣以復(fù)方作用最強(qiáng)。 結(jié)論：苦寒瀉下結(jié)合飲食失節(jié)法制作脾虛大鼠模型是成功的，可作為一種有效的IPD動(dòng)物模型，用于評(píng)價(jià)相關(guān)藥物的作用。運(yùn)脾溫陽(yáng)方及其拆方可以改善脾虛動(dòng)物的狀態(tài)，恢復(fù)小腸粘膜結(jié)構(gòu)與功能，調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)、消化、吸收、內(nèi)分泌等功能