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文檔簡介
1、目的:
探討萊菔硫烷(SFN)對(duì)前列腺癌細(xì)胞系PC-3環(huán)氧化酶(COX)-2蛋白表達(dá)的影響,以及其能否通過p38信號(hào)途徑發(fā)揮對(duì)COX-2的作用,從而為SFN的臨床應(yīng)用價(jià)值提供參考。
方法:
用不同濃度的SFN進(jìn)行體外對(duì)前列腺癌細(xì)胞系PC-3孵育24h后,RT-PCR和Western blot分別檢測(cè)細(xì)胞COX-2 mRNA和蛋白的表達(dá)。提取刺激后的細(xì)胞總蛋白,Western blot檢測(cè)細(xì)胞 p38的磷酸化
2、情況。最后用p38特異性抑制劑SB202190以及p38激活劑茴香霉素與SFN處理過的PC-3細(xì)胞共同孵育,觀察細(xì)胞COX-2蛋白的表達(dá)情況。
結(jié)果:
RT-PCR結(jié)果顯示,PC-3細(xì)胞在靜息狀況下COX-2呈一定豐度表達(dá),0~20μmol/L SNF處理后,COX-2 mRNA隨SNF濃度的遞增而表達(dá)量逐漸降低。Western blot進(jìn)一步證實(shí)COX-2蛋白水平也隨之降低。20μmol/L SFN于0~24h處理
3、PC-3細(xì)胞后,COX-2蛋白水平隨孵育時(shí)間的延長而逐漸降低。不同濃度的SFN處理24h后,能顯著誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞p38磷酸化,經(jīng)SB202190處理后COX-2表達(dá)明顯增高,而 p38激活劑茴香霉素處理后能進(jìn)一步降低細(xì)胞內(nèi)COX-2蛋白的水平。
結(jié)論:
1.SFN可能在基因和蛋白水平抑制前列腺癌細(xì)胞系PC-3表達(dá)COX-2;
2.SFN可能能誘導(dǎo)PC-3細(xì)胞中p38磷酸化;
3.SFN降低細(xì)胞C
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