負(fù)壓效應(yīng)對人胰腺癌細(xì)胞株SW1990轉(zhuǎn)移抑制作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、胰腺癌是惡性程度很高的腫瘤。由于其早期癥狀隱匿，臨床表現(xiàn)缺乏特異性，早期診斷十分困難，確診時(shí)多已失去了根治性手術(shù)的機(jī)會(huì)，80％的胰腺癌不能手術(shù)切除。雖然傳統(tǒng)的放療、化療能使胰腺癌腫瘤體積縮小，但大部分腫瘤經(jīng)過一段時(shí)間后又出現(xiàn)轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)，絕大多數(shù)死于腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移，故阻止腫瘤轉(zhuǎn)移是生存的關(guān)鍵。
　　 目的：探討負(fù)壓效應(yīng)作用于人胰腺癌SW1990細(xì)胞株后，細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的改變。實(shí)驗(yàn)方法：常規(guī)培養(yǎng)人胰腺癌SW1990細(xì)胞株，建立負(fù)

2、壓培養(yǎng)模型。設(shè)對照組(壓力為0)，低負(fù)壓組(壓力為-300mmHg，1h/次，2 bid)和高負(fù)壓組(壓力為-600mmHg，1h/次，2 bid)。負(fù)壓干預(yù)3天。倒置顯微鏡觀察細(xì)胞生長狀況，采用CCK-8法檢測細(xì)胞活性，繪制細(xì)胞的生長曲線，流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況。利用transwell小室檢測細(xì)胞侵襲能力的變化，實(shí)時(shí)定量PCR檢測MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：倒置顯微鏡下觀察：對照組細(xì)胞生

3、長良好，為梭形或多角形并且融合形成集落。實(shí)驗(yàn)組觀察可見細(xì)胞生長緩慢，細(xì)胞變形，隨著壓力的增加和時(shí)間延長，細(xì)胞變圓、皺縮、漂浮、碎裂、死亡逐漸增加。
　　 CCK-8檢測細(xì)胞活性：第四天高負(fù)壓組0.D值為2.15±0.05，低負(fù)壓組的0.D值為2.86±0.04，對照組的0.D值為3.28±0.04，各組間差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡：高負(fù)壓組細(xì)胞凋亡率為15.22％±0.81％，

4、低負(fù)壓組細(xì)胞凋亡率為2.31％±0.06％，對照組的細(xì)胞凋亡率為1.91％±0.13％，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 Transwell小室法檢測細(xì)胞遷移：在200倍鏡下平均每視野下遷移細(xì)胞數(shù)：高負(fù)壓組為11.07±3.01，低負(fù)壓組為18.93±3.67，對照組為53.60±4.14，各組間差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義((P<0.01)。
　　 各組細(xì)胞實(shí)時(shí)定量PCR測定結(jié)果：與對照組的MMP-2 mRNA

5、水平比較，低負(fù)壓組的MMP-2 mRNA水平為對照組的0.1169±0.0030倍，高負(fù)壓組的MMP-2 mRNA水平為對照組的0.0605±0.0054倍，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；與對照組的MMP-9 mRNA水平比較，低負(fù)壓組的MMP-9 mRNA水平為0.2182±0.0230倍，高負(fù)壓組的MMP-9 mRNA水平為0.1124±0.0102倍，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　 結(jié)論