兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在神經(jīng)元增殖與修復(fù)中作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、 國(guó)內(nèi)外很多研究發(fā)現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMMSCs)腦內(nèi)移植能夠治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾患，本課題主要通過(guò)體外的細(xì)胞試驗(yàn)研究，進(jìn)一步探討B(tài)MMSCs在神經(jīng)元增殖與修復(fù)中的作用。 目的：研究BMMSCs誘導(dǎo)分化為神經(jīng)樣細(xì)胞的最佳方案，探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞條件培養(yǎng)基(BMMSCs conditioned medium，B-CM)誘導(dǎo)神經(jīng)干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞的可行性及B-CM對(duì)損傷神經(jīng)元的修復(fù)作用。 方法：30只1天～3月齡、

2、體重0.125～1.5kg的青紫藍(lán)兔用于本研究。經(jīng)過(guò)密度梯度離心骨髓分離培養(yǎng)獲得BMMSCs，體外擴(kuò)增傳代培養(yǎng)。分別用ATP、GM1、堿性成纖維生長(zhǎng)因子，ATP、GM1分別和堿性成纖維生長(zhǎng)因子聯(lián)合誘導(dǎo)BMMSCs。當(dāng)BMMSCs鋪滿瓶底90﹪時(shí)，無(wú)血清培養(yǎng)24小時(shí)，收集細(xì)胞培養(yǎng)的上清液為B-CM。體外分離培養(yǎng)兔紋狀體神經(jīng)干細(xì)胞，并用條件培養(yǎng)基誘導(dǎo)其分化。用新生兔脊髓神經(jīng)元建立谷氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)元損傷模型，觀察B-CM損傷神經(jīng)元的保護(hù)作用，