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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:觀察染料木素對(duì)去卵巢大鼠活體疲勞后皮質(zhì)骨微損傷、微結(jié)構(gòu)和骨生化指標(biāo)的影響,為染料木素在絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥皮質(zhì)骨骨量和骨質(zhì)量方面的作用研究提供動(dòng)物實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:36只7月齡SD雌性大鼠行去卵巢手術(shù)后4周建立骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型,隨機(jī)分成四組,每組9只,分別為去卵巢對(duì)照2周組(OVX2W),去卵巢對(duì)照3周組(OVX3W),染料木素2周組(GEN2W)和染料木素3周組(GEN3W)。骨質(zhì)疏松模型建立后開(kāi)始行骨微損傷試驗(yàn),即在2%
2、戊巴比妥鈉麻醉下,通過(guò)利用在本課題組專利骨疲勞試驗(yàn)機(jī)基礎(chǔ)上改進(jìn)的平行雙夾具更有效率的對(duì)活體鼠右側(cè)尺骨進(jìn)行動(dòng)態(tài)疲勞。再對(duì)四組進(jìn)行干預(yù),OVX2W組、OVX3W組予生理鹽水腹腔內(nèi)注射2周或3周,GEN2W組、GEN3W組則按染料木素5mg/Kg體重腹腔內(nèi)注射2周或3周。實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)時(shí)行腹主動(dòng)脈取血,剝離左右尺骨、右側(cè)股骨及脛骨和腰椎。離心血清凍存于-80℃待測(cè)骨生化指標(biāo)。剔除骨周圍組織后-80℃凍存待測(cè)骨密度,再行右尺骨大塊組織堿性品紅染色、塑
3、料包埋、切片,顯微鏡下觀察骨微損傷及微結(jié)構(gòu)相關(guān)參數(shù)。三點(diǎn)彎曲試驗(yàn)檢測(cè)最大載荷、彈性模量力學(xué)參數(shù)。腰椎骨灰化比較礦物質(zhì)成分。
結(jié)果:
1.骨生化指標(biāo)Ⅰ型原膠原氨基端前肽(PINP)沒(méi)有差異,但是在去卵巢組間可觀察到其隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而降低,染料木素組間則相反;抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)亦出現(xiàn)與PINP相似的時(shí)間變化趨勢(shì),且其GEN3W組比OVX3W組升高明顯;骨鈣素(OC)在去卵巢組和染料木素組均隨著時(shí)
4、間延長(zhǎng)而明顯下降。
2.左右尺骨、右股骨、右脛骨及腰椎的骨密度(BMD)和骨礦鹽含量(BMC)無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但可觀察到左右尺骨的BMD和BMC在染料木素組比其同時(shí)期的去卵巢組輕微增高,各腰椎的BMC在GEN3W組亦比OVX3W組輕微增加;四組的左尺骨(非疲勞側(cè))第1亞區(qū)域和GEN3W組的左尺骨第2亞區(qū)域的BMC比其右尺骨(活體疲勞側(cè))相應(yīng)區(qū)域均有顯著增加;OVX2W組、OVX3W組和GEN2W組的左尺骨第1亞區(qū)域和OVX3
5、W組、GEN3W組的左尺骨第2亞區(qū)域BMD比其右尺骨相應(yīng)區(qū)域亦有顯著增加;染料木素組的右尺骨第1、2亞區(qū)域和左尺骨第1、2亞區(qū)域的BMD和BMC分別較去卵巢組同時(shí)期同側(cè)部位輕微增高。
3.骨微損傷及微結(jié)構(gòu)參數(shù)均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;去卵巢組間的骨微損傷平均長(zhǎng)度隨時(shí)間而增長(zhǎng),染料木素組間則隨時(shí)間而減短;且染料木素組的微損傷表面密度和微損傷密度均較去卵巢組同時(shí)期減少。
4.右股骨及右脛骨的最大載荷、彈性模量無(wú)明顯差異。
6、 5.灰含量百分比和有機(jī)質(zhì)含量百分比在去卵巢組間和染料木素組間存在差異;GEN2W組體積有機(jī)質(zhì)含量比OVX2W組明顯增加,GEN3W組則比GEN2W組明顯下降。
結(jié)論:
1.在去卵巢大鼠活體疲勞后短期內(nèi),染料木素協(xié)同外界力學(xué)刺激,增強(qiáng)破骨作用,加速骨吸收,并增加骨形成,可能對(duì)特定部位骨量(受力局部骨量和松質(zhì)骨豐富的腰椎骨量)具有一定的保留作用;
2.短期的染料木素干預(yù)后對(duì)骨力學(xué)性能和骨結(jié)構(gòu)沒(méi)有顯著影響,但是
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