力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對(duì)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞及肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的影響.pdf

1、目的:
　　 研究力竭運(yùn)動(dòng)及鈍挫傷對(duì)大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞及肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的影響。
　　 方法:
　　 七周齡雄性wistar大鼠24只，隨機(jī)分為4組，每組6只:安靜對(duì)照組(control，C)、力竭運(yùn)動(dòng)即刻組(Exhaustive，E0)、力竭后24h組(E24)、力竭后48h組(E48)。力竭運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行一次力竭性下坡跑運(yùn)動(dòng)均達(dá)到力竭狀態(tài)。力竭運(yùn)動(dòng)組和安靜對(duì)照組分別于末次力竭運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)間點(diǎn)和安靜狀態(tài)下，采用腹腔注

2、射20％的烏拉坦進(jìn)行麻醉，宰殺后從腹主動(dòng)脈取血5ml以制備血清，測(cè)定肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的變化。取一側(cè)股直肌樣本快速用2.5％戊二醛固定，以制作電鏡切片，通過(guò)透射電子顯微鏡觀察骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的變化。取另一側(cè)股直肌樣本液氮保存，用于測(cè)定肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子的變化。
　　 另取4只成年大鼠，分為對(duì)照組、鈍挫傷即刻組(Contusion，D0)、24h組(D24)、48h組(D48)，每組各一只。于鈍挫傷后不同時(shí)間點(diǎn)，取一側(cè)股直肌迅速用2.5％戊

3、二醛固定，制作電鏡超薄切片，透射電子顯微鏡下觀察骨骼肌的超微結(jié)構(gòu)變化。取另一側(cè)股外側(cè)肌，進(jìn)行衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)。另取一只乳鼠，亦進(jìn)行股外側(cè)肌衛(wèi)星細(xì)胞培養(yǎng)。
　　 結(jié)果:
　　 1)一次力竭運(yùn)動(dòng)后，力竭運(yùn)動(dòng)組(E0、E24、E48)骨骼肌超微結(jié)構(gòu)變化明顯：
　　 ①肌原纖維疏松變細(xì)，H帶、I帶界限不清，M線、Z線模糊，出現(xiàn)Z線流變、扭曲、消失;
　　 ②細(xì)胞間質(zhì)水腫、肌間隙增寬;
　　 ③內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有輕度變形

4、，甚至扭曲;
　　 ④部分基質(zhì)變淺，線粒體明顯變形、扭曲，甚至腫大破裂。隨著時(shí)間的延續(xù)，力竭運(yùn)動(dòng)組的肌細(xì)胞的破壞程度越來(lái)越重。
　　 2)鈍挫傷組(D0、D24、D48)骨骼肌結(jié)構(gòu)明顯遭受破壞，具體表現(xiàn):
　　 ①肌原纖維排列混亂;
　　 ②肌細(xì)胞膜突起或不完整;
　　 ③基質(zhì)變淺，可明顯看線粒體大小不均，或腫脹或固縮，分布不均，模糊不清;
　　 ④肌肉內(nèi)出現(xiàn)空泡變性，顆粒變性和透明變性。

5、隨著時(shí)間的延續(xù)，鈍挫傷組的肌細(xì)胞的破壞程度越來(lái)越重。
　　 3)ELISA結(jié)果顯示:經(jīng)過(guò)一次力竭訓(xùn)練后，組織指標(biāo)中HGF的有較大的變化，力竭運(yùn)動(dòng)組E0、E24、E48與安靜對(duì)照組相比，(P＜0.01)均有特顯著性差異。從血清中HGF的變化結(jié)果來(lái)看，力竭運(yùn)動(dòng)組E0、E24、E48與安靜對(duì)照組相比，(P＜0.01)均有特別顯著性差異。
　　 4)通過(guò)對(duì)鈍挫傷及恢復(fù)期間的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(SC)的體外培養(yǎng)的觀察，結(jié)果顯示:鈍挫傷

6、組D0、D24、D48的衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)目比對(duì)照組的多，而且隨著鈍挫傷后時(shí)間的推移，衛(wèi)星細(xì)胞數(shù)目呈增加趨勢(shì)。且后期培養(yǎng)過(guò)程中，增殖能力更強(qiáng)。另一方面，乳鼠的肌肉組織中的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(SC)的含量比成年大鼠肌肉組織中的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(SC)絕對(duì)含量少，但單位組織中的骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(SC)含量較高，且增殖能力更強(qiáng)。鈍挫傷能夠激活休眠中的衛(wèi)星細(xì)胞。
　　 結(jié)論:
　　 1)電鏡結(jié)果顯示:一次力竭運(yùn)動(dòng)能夠引起骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的顯著變化

7、:肌原纖維排列紊亂;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有輕度變形，甚至扭曲;線粒體明顯變形、扭曲，甚至腫大破裂;細(xì)胞間質(zhì)水腫、肌間隙增寬。隨著時(shí)間的延續(xù)，力竭組的肌細(xì)胞的破壞程度越來(lái)越重。另一方面，鈍挫傷能夠引起骨骼肌超微結(jié)構(gòu)的顯著變化，且隨著時(shí)間的延續(xù)，鈍挫傷組的肌細(xì)胞的破壞程度表現(xiàn)越來(lái)越重。
　　 2)力竭運(yùn)動(dòng)及恢復(fù)期間，大鼠血清及骨骼肌組織的肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)在力竭后即刻及24h、48h均明顯增多。提示肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)可能加速軟組織、微