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文檔簡介
1、研究背景和目的:分化相關(guān)基因NDRG1(N-Myc downstream-regulated gene1)屬于 N-myc下游調(diào)節(jié)基因蛋白家族一成員,因在 N-myc全身性敲除的小鼠胚胎組織中高表達(dá)而得此名。NDRG1表達(dá)于多種腫瘤組織中,如肺癌、食管癌、乳腺癌、肝癌、前列腺癌、腎癌結(jié)腸癌;在某些腫瘤中,NDRG1的表達(dá)水平與細(xì)胞分化程度、臨床分期、轉(zhuǎn)移和侵襲有關(guān)。然而,目前人們對NDRG1在肝腫瘤和腸腫瘤中的表達(dá)的生物學(xué)意義仍不十分清
2、楚。本研究旨在探討NDRG1對人肝癌和腸癌細(xì)胞生長的體外生物學(xué)效應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:初步分析了15對肝癌和癌旁組織及不同肝癌和腸癌細(xì)胞系中NDRG1的表達(dá)情況,發(fā)現(xiàn)NDRG1在人肝癌組織樣本中的mRNA表達(dá)顯著高于相應(yīng)的癌旁組織;在多數(shù)的肝癌和腸癌細(xì)胞系中,NDRG1蛋白有一定水平表達(dá)。為進(jìn)一步研究NDRG1的功能,利用慢病毒系統(tǒng)將NDRG1表達(dá)單元轉(zhuǎn)入人肝癌細(xì)胞系Huh7、SMMC-7721和人腸癌細(xì)胞系 SW620、HCT8中
3、,并建立了相應(yīng)的過表達(dá)穩(wěn)定細(xì)胞系。MTT、克隆形成和細(xì)胞周期結(jié)果顯示,在細(xì)胞貼壁培養(yǎng)條件下,過表達(dá)NDRG1并不影響上述肝癌細(xì)胞生長與增殖;而在非貼壁培養(yǎng)條件下,NDRG1表達(dá)卻可顯著地抑制肝癌細(xì)胞的失巣凋亡,相伴隨的是磷酸化的AKT和p-38MAPK水平增高;在HepG2和Hep3B細(xì)胞中,敲降NDRG1表達(dá)促進(jìn)這兩種肝癌細(xì)胞的失巢凋亡。在細(xì)胞貼壁培養(yǎng)下,過表達(dá)NDRG1并不影響腸癌HCT8和SW620細(xì)胞的生長與增殖,但能夠抑制細(xì)胞
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