產(chǎn)婦子宮平滑肌CPI-17信號通路介導(dǎo)的鈣敏感性變化與宮縮乏力性產(chǎn)后出血關(guān)系的研究.pdf

1、目的:研究PKCα/β特異性抑制劑Go6976、PKCβ特異性抑制劑LY333531和Rho激酶特異性抑制劑Y-27632對宮縮乏力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌自發(fā)性收縮和收縮潛能的抑制作用，及宮縮乏力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌CPI-17信號通路分子CPI-17表達(dá)、PKC及Rho激酶活性變化，探討CPI-17信號通路介導(dǎo)的鈣敏感性變化在宮縮乏力性產(chǎn)后出血發(fā)病中的作用。
　　方法:選擇2010年11月至2011年12月住福建省婦幼保健

2、院產(chǎn)科，擇期子宮下段剖宮產(chǎn)分娩初產(chǎn)婦60例，分為宮縮乏力性產(chǎn)后出血組（病例組，n=30）和宮縮良好無產(chǎn)后出血組（對照組，n=30）。
　　采用肌條等長張力測定方法檢測產(chǎn)婦子宮下段平滑肌分別在PKCα/β特異性抑制劑Go6976、PKCβ特異性抑制劑LY333531和Rho激酶特異性抑制劑Y-27632作用下自發(fā)性收縮功能變化；同時檢測病例組子宮下段平滑肌及其分別在PKCβ特異性抑制劑LY333531、Rho激酶特異性抑制劑 Y-2

3、7632作用下對梯度濃度縮宮素（10-4U/mL~10-1 U/mL）誘導(dǎo)的收縮潛能變化。
　　采用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)和免疫印跡法檢測產(chǎn)婦子宮下段平滑肌CPI-17mRN A和 p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)；采用非放射性蛋白激酶檢測法和免疫印跡法分別檢測產(chǎn)婦子宮下段平滑肌PKC活性和p-MYPT-1（Thr696）蛋白表達(dá)（代表Rho激酶活性）；并分析產(chǎn)婦子宮平滑肌PKC活性、Rho激酶活性與p-CPI-17（

4、Thr38）蛋白的表達(dá)水平及PKC活性、Rho激酶活性、p-CPI-17（Thr38）蛋白的表達(dá)水平與其自發(fā)性收縮活動力、產(chǎn)后24h出血量的相關(guān)性。
　　結(jié)果:1.病例組產(chǎn)后24h出血量和子宮平滑肌自發(fā)性收縮幅度、頻率及活動力均低于對照組（P<0.05）。
　　2.10-6mol/LPKCα/β特異性抑制劑Go6976、10-6mol/LPKCβ特異性抑制劑LY333531和10-5mol/LRho激酶特異性抑制劑 Y-27

5、632均顯著抑制兩組產(chǎn)婦子宮平滑肌收縮幅度及活動力（P<0.05），對病例組抑制作用均小于對照組（P<0.05）。
　　3.在縮宮素濃度為10-3U/mL、10-2U/mL、10-1U/mL時，病例組的收縮潛能均小于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；PKCβ特異性抑制劑LY333531和Rho激酶特異性抑制劑Y-27632均可顯著降低病例組收縮潛能，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　4.病例組子宮平滑肌CPI-

6、17mRN A表達(dá)水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；病例組子宮平滑肌p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)水平低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　5.病例組子宮平滑肌PKC活性和Rho激酶活性均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　6.相關(guān)性分析結(jié)果顯示：兩組產(chǎn)婦子宮平滑肌 PKC活性、Rho激酶活性與p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)水平均呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<

7、0.05）；兩組產(chǎn)婦子宮平滑肌PKC活性、Rho激酶活性及p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)水平與其自發(fā)性收縮活動力均呈正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；兩組產(chǎn)婦子宮平滑肌PKC活性、Rho激酶活性及p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)水平與產(chǎn)后24h出血量均呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論:1.宮縮乏力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌收縮功能明顯減弱及對梯度濃度縮宮素誘導(dǎo)的收縮潛能明顯降低，提示宮縮乏

8、力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌對縮宮素的反應(yīng)性低于宮縮良好無產(chǎn)后出血產(chǎn)婦。
　　2. PKCα/β特異性抑制劑Go6976、PKCβ特異性抑制劑LY333531和Rho激酶特異性抑制劑Y-27632對宮縮乏力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌收縮幅度及活動力的抑制作用均小于宮縮良好無產(chǎn)后出血產(chǎn)婦，且PKCβ特異性抑制劑LY333531和Rho激酶特異性抑制劑 Y-27632均可顯著降低宮縮乏力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌收縮潛能。PKCα、PKCβ

9、和Rho激酶調(diào)節(jié)子宮平滑肌收縮，可能參與宮縮乏力性產(chǎn)后出血的發(fā)生。
　　3.子宮平滑肌組織p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)水平及PKC活性、Rho激酶活性與其收縮活動力均呈正相關(guān)，與產(chǎn)后24h出血量均呈負(fù)相關(guān)，表明CPI-17蛋白的磷酸化及P K C活性、Rho激酶活性調(diào)控子宮平滑肌的收縮功能。
　　4.宮縮乏力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌組織p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)低于宮縮良好無產(chǎn)后出血產(chǎn)婦，與宮縮乏力性產(chǎn)

10、后出血的發(fā)生相關(guān)。
　　5.宮縮乏力性產(chǎn)后出血產(chǎn)婦子宮平滑肌組織PKC活性低于宮縮良好無產(chǎn)后出血產(chǎn)婦，且PKC活性與p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)水平密切相關(guān)，PKC/CPI-17信號通路活化受阻可能是宮縮乏力性產(chǎn)后出血發(fā)病的重要因素之一。
　　6.宮縮乏力性產(chǎn)后出血子宮平滑肌組織 Rho激酶活性低于宮縮良好無產(chǎn)后出血產(chǎn)婦，且Rho激酶活性與p-CPI-17（Thr38）蛋白表達(dá)水平密切相關(guān)，Rho激酶/CPI-17