地五養(yǎng)肝膠囊抑制2-AAF-PH大鼠肝癌前病變的作用及機制.pdf

1、目的：通過復(fù)制2-AAF/PH大鼠肝癌前病變模型，觀察體現(xiàn)“補腎生髓成肝”治療法則的地五養(yǎng)肝膠囊對正常肝臟再生和肝癌前病變的作用及其機制，提出中醫(yī)藥防治肝癌前病變的新策略，豐富“肝主生發(fā)”（髓生肝、髓失生肝、補腎生髓成肝）的科學(xué)內(nèi)涵，提高中醫(yī)藥防治肝癌的能力和水平。
　　方法：采用SPF級Wistar大鼠復(fù)制2-AAF/PH大鼠肝癌前病變模型，將實驗大鼠分為4組（每組16只），正常對照組（10 ml/kg/日生理鹽水灌胃）、假手術(shù)

2、對照組（2AAF+假手術(shù)+10 ml/kg/日生理鹽水灌胃）、模型組（PHx+2AAF+10 ml/kg/日生理鹽水灌胃）、DWYG組（PHx+2AAF+10 ml/kg/日地五養(yǎng)肝膠囊灌胃），每組從實驗開始分別實施上述干預(yù)，至到不同時間點處死實驗動物。按肝大部切除術(shù)后第8、10、14、17、19、22天不同時間點分6批處死實驗動物,共384只實驗大鼠，統(tǒng)計不同時間點大鼠死亡數(shù)，Log-rank法比較大鼠生存曲線。獲取肝組織標本和股骨標

3、本，顯微鏡下觀察肝臟病理變化；并采用免疫組化方法觀察肝組織內(nèi)卵圓細胞標志物CD34、AFP、CK19，造血細胞標志物CD45、Thy1.1，肝細胞標志物ALB表達；采用percoll密度梯度分離骨髓細胞中的單個核細胞，運用流式細胞術(shù)檢測單個核細胞中的CD34+CD45雙陽性細胞；運用Bio-Rad公司Bio-plex懸液芯片系統(tǒng)檢測再生肝組織內(nèi)的與肝再生密切相關(guān)的細胞因子；運用Western blot法檢測AFP、CK19、Thy1.1

4、、ALB、Wnt1、Wnt3、β-catenin、FZD2、GSK3β、C-myc、cyclinD1、EpCAM蛋白表達。
　　結(jié)果：DWYG組的生存曲線一直在模型組之上，并獲得統(tǒng)計差異，(p＜0.05，n=96)，提示DWYG組2-AAF/PH大鼠的生存預(yù)后優(yōu)于模型組。
　　不同時間點單位視野內(nèi)細胞核數(shù)目比較結(jié)果：術(shù)后第8天，模型組（718.00000±131.75740）高于空白組（487.33330±74.44640）

5、；術(shù)后第10天，模型組（675.44450±123.33200）高于空白組（467.83330±104.62010）和假手術(shù)組（416.55550±87.40296）；術(shù)后第14天，模型組（778.57140±74.99079）高于空白組（406.50000±73.45941）和假手術(shù)組（418.00000±98.00638）；術(shù)后第17天，模型組（985.83330±459.18690）高于空白組（466.50000±52.62984

6、）和假手術(shù)組（483.22220±79.32808）；術(shù)后第19天，模型組（932.33330±194.63780）高于空白組（450.16670±52.94305）和假手術(shù)組（546.88890±145.07880）；術(shù)后第22天，模型組（1030.8330±150.81830）高于空白組（407.33330±29.40521）和假手術(shù)組（645.3333±186.0255）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P＜0.01或P＜0

7、.05。
　　術(shù)后第10天，DWYG組（790.66670±155.25290）高于空白組（467.83330±104.62010）；術(shù)后第14天，DWYG組（632.88890±213.65130）高于空白組（406.50000±73.45941）；術(shù)后第17天，DWYG組（894.58330±166.37060）高于空白組（466.50000±52.62984）；術(shù)后第22天，DWYG組（794.83330±246.67020

8、）高于空白組（407.33330±29.40521）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P＜0.01或P＜0.05。
　　不同時間點單位視野內(nèi)細胞核面積總量比較結(jié)果：術(shù)后第10天，模型組（354634.1±61307.27）高于假手術(shù)組（193935.7±66317.37）；術(shù)后第14天，模型組（545256.9±139460.2）高于空白組（266762.6±81448.47）和假手術(shù)組（267810.2±68476.35）

9、；術(shù)后第17天，模型組（649764.0±352785.3）高于空白組（215684.8±49102.53）和假手術(shù)組（237966.6±41024.46）；術(shù)后第19天，模型組（931558.5±556737.7）高于空白組（233773.8±38409.17）和假手術(shù)組（302993.2±142219.0）；術(shù)后第22天，模型組（577851.2±185634.6）高于空白組（214124.7±37308.11）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處

10、理，均有顯著性差異，P＜0.01或P＜0.05。
　　術(shù)后第17天，DWYG組（614474.5±152446.6）高于空白組（215684.8±49102.53）；術(shù)后第19天，DWYG組（403424.6±126890.8）低于模型組（931558.5±556737.7）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P＜0.01或P＜0.05。
　　不同時間點單位視野內(nèi)細胞核平均直徑比較結(jié)果：術(shù)后第10天，模型組（25.308

11、16±1.31760）高于假手術(shù)組（23.06589±1.16258）；術(shù)后第17天，模型組（25.85540±1.61349）高于假手術(shù)組（23.39901±0.62696）；術(shù)后第19天，模型組（29.70243±4.58321）高于空白組（24.37762±0.60042）和假手術(shù)組（24.08170±2.40167）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P＜0.01或P＜0.05。
　　不同時間點單位視野內(nèi)細胞核IOD值

12、比較結(jié)果：術(shù)后第8天，模型組（151210.50±52440.44）高于假手術(shù)組（88003.13±11347.88）；術(shù)后第17天，模型組（235629.80±119848.80）高于空白組（94303.05±22828.83）和假手術(shù)組（90270.37±13371.88）；術(shù)后第19天，模型組（280996.10±121112.60）高于空白組（98838.04±3774.729）和假手術(shù)組（101573.60±46453.50）

13、；術(shù)后第22天，模型組（214187.60±61403.04）高于空白組（92825.63±21232.69）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P＜0.01或P＜0.05。
　　術(shù)后第17天，DWYG組（226990.10±47799.56）高于空白組（94303.05±22828.83）；術(shù)后第19天，DWYG組（133893.80±35922.41）低于模型組（280996.10±121112.60）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處

14、理，均有顯著性差異，P＜0.01或P＜0.05。
　　不同時間點肝癌前病變（肝組織結(jié)節(jié)數(shù)）比較結(jié)果：術(shù)后第8天，模型組（15.33333±2.08167）高于假手術(shù)組（3.66667±2.08167）；術(shù)后第10天，模型組（12.33333±3.78594）高于假手術(shù)組（2.66667±0.57735）；術(shù)后第14天，模型組（14.33333±5.50757）高于假手術(shù)組（1.00000±1.00000）；術(shù)后第17天，模型組（1

15、0.00000±1.00000）高于假手術(shù)組（0.66667±0.57735）；術(shù)后第19天，模型組（4.66667±1.15470）高于假手術(shù)組（1.66667±1.52753）；術(shù)后第22天，模型組（2.33333±0.57735）高于假手術(shù)組（0.00000±0.00000）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P＜0.01。
　　術(shù)后第8天，DWYG組（9.33333±2.51661）低于模型組（15.33333±2.0

16、8167）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.66667±0.57735）低于模型組（2.33333±0.57735）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P＜0.01。
　　不同時間點AFP的OD值比較：術(shù)后第17天，模型組（0.00143±0.00279）高于空白組（0.00005±0.00011）；術(shù)后第19天，模型組（0.00504±0.00494）高于空白組（0.00101±0.00213）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著

17、性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第14天，DWYG組（0.00704±0.00621）高于空白組（0.00181±0.00175），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P<0.05。術(shù)后第14天，DWYG組（0.00704±0.00621）高于模型組（0.00030±0.00032）；術(shù)后第17天，DWYG組（0.00001±0.00003）低于模型組（0.00143±0.00279）；術(shù)后第19天，DWYG組（0.00144±0.0027

18、3）低于模型組（0.00503±0.00494）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點CD34的OD值比較：術(shù)后第19天，模型組（0.00106±0.00149）高于空白組（0.00000±0.00001）；術(shù)后第22天，模型組（0.00004±0.00004）高于空白組（0.00000±0.00000），以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第17天，

19、DWYG組（0.00000±0.00000）低于模型組（0.00004±0.00006）；術(shù)后第19天，DWYG組（0.00001±0.00002）低于模型組（0.00106±0.00149）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.00000±0.00000）低于模型組（0.00004±0.00004）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點CK19的OD值比較：術(shù)后第17天，模型組（0.008

20、36±0.00770）高于空白組（0.00015±0.00018）；術(shù)后第8天，DWYG組（0.00714±0.00457）高于空白組（0.00154±0.00100）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第8天，DWYG組（0.00714±0.00457）高于模型組（0.00138±0.00215）；術(shù)后第17天，DWYG組（0.00169±0.00229）低于模型組（0.00836±0.00770）

21、；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點CD45的OD值比較：術(shù)后第8天，模型組（0.02223±0.01637）高于空白組（0.00063±0.00099）；術(shù)后第10天，模型組（0.01182±0.00432）高于空白組（00.00000±0.00000）；術(shù)后第22天，模型組（0.00062±0.00056）高于空白組（0.00001±0.00002）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯

22、著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第8天，DWYG組（0.00182±0.00336）低于模型組（0.02223±0.01637）；術(shù)后第10天，DWYG組（0.00311±0.00680）低于模型組（0.01182±0.00432）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.00000±0.00000）低于模型組（0.00062±0.00056）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點Th

23、y1.1的OD值比較：術(shù)后第19天，模型組（0.00488±0.00628）高于空白組（0.00028±0.00042），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P<0.01。術(shù)后第19天，DWYG組（0.00116±0.00154）低于模型組（0.00488±0.00628），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P<0.01。
　　不同時間點ALB的OD值比較：術(shù)后第14天，模型組（0.00193±0.00228）ALB的OD值在高于空白組（0.00006

24、±0.00008）；術(shù)后第17天，模型組（0.01740±0.01170）高于空白組（0.00223±0.00196）；術(shù)后第19天，模型組（0.00989±0.00447）高于空白組（0.00097±0.00121）；術(shù)后第22天，模型組（0.00044±0.00019）高于空白組（0.00002±0.00002）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第14天，DWYG組（0.00030±0.0003

25、9）低于模型組（0.00193±0.00228）；術(shù)后第17天，DWYG組（0.00092±0.00106）低于模型組（0.01740±0.01170）；術(shù)后第19天，DWYG組（0.00602±0.00253）低于模型組（0.00989±0.00447）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.00009±0.00017）低于模型組（0.00044±0.00019）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　

26、不同時間點AFP的蛋白表達水平比較：術(shù)后第17天，模型組（3.22937±0.67848）高于空白組（0.42980±0.00491）；術(shù)后第17天，DWYG組（1.74258±0.40137）高于空白組（0.42980±0.00491）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第17天，DWYG組（1.74258±0.40137）低于模型組（3.22937±0.67848），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P<0

27、.05。
　　不同時間點CK19的蛋白表達水平比較：術(shù)后第22天，模型組（0.97433±0.26563）高于空白組（0.49627±0.03081），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P<0.05。術(shù)后第10天，DWYG組（0.78806±0.28183）高于模型組（0.22565±0.05949），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P<0.01。
　　不同時間點Thy1.1的蛋白表達水平比較：術(shù)后第8天，模型組（0.99196±0.0383

28、6）高于空白組（0.50287±0.01344）；術(shù)后第17天，模型組（5.54601±0.05300）高于空白組（0.59333±0.02435）；術(shù)后第22天，模型組（3.75083±0.16050）高于空白組（0.53597±0.05286）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第8天，DWYG組（1.94592±0.22803）高于空白組（0.50287±0.01344）；術(shù)后第10天，DWYG

29、組（11.82147±5.36504）高于空白組（0.56464±0.06698）；術(shù)后第17天，DWYG組（2.48814±0.26399）高于空白組（0.59333±0.02435）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.97038±0.10725）高于空白組（0.53597±0.05286）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第8天，DWYG組（1.94592±0.22803）高于模型組（0.99196

30、±0.03836）；術(shù)后第17天，DWYG組（2.48814±0.26399）低于模型組（5.54601±0.05300）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.97038±0.10725）低于模型組（3.75083±0.16050）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點ALB的蛋白表達水平比較：術(shù)后第8天，模型組（0.27453±0.01486）低于空白組（1.03074±0.02754）；

31、術(shù)后第17天，模型組（1.84682±0.18736）高于空白組（1.14338±0.01306）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或 P<0.05。術(shù)后第8天，DWYG組（0.68833±0.23554）高于模型組（0.27453±0.01486），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P<0.05。
　　不同時間點CD34/CD45雙陽性細胞率結(jié)果比較:術(shù)后第10天,模型組（1.36±0.10）高于假手術(shù)組（0.54±0.

32、03）和正常對照組（0.80±0.10），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，P＜0.05。術(shù)后第10天,DWYG組（1.51±0.11）高于模型組（1.36±0.10）；術(shù)后第14天,DWYG組（1.32±0.05）高于模型組（0.64±0.05）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.05。
　　不同時間點Wnt-1的蛋白表達水平比較：術(shù)后第17天，模型組（1.32779±0.35836）高于空白組（0.36270±0.01673

33、），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.05。
　　不同時間點Wnt-3的蛋白表達水平比較：術(shù)后第19天，模型組（1.85876±0.54423）高于空白組（0.11918±0.01016），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第10天，DWYG組（0.04430±0.00041）低于空白組（0.10873±0.01290），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第10天，DWYG組（0.04430±0.00041）低于模型

34、組（0.09193±0.01315）；術(shù)后第19天，DWYG組（0.23867±0.06112）低于模型組（1.85876±0.54423）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點β-catenin的蛋白表達水平比較：術(shù)后第14天，模型組（0.60503±0.25672）高于空白組（0.18496±0.00238），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第17天，DWYG組（0.07

35、359±0.02606）低于空白組（0.19992±0.00922），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。
　　不同時間點FZD2的蛋白表達水平比較：術(shù)后第17天，模型組（0.76346±0.02471）高于空白組（0.47247±0.02180），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第14天，DWYG組（0.13873±0.01626）低于空白組（0.43712±0.00564），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)

36、后第10天，DWYG組（0.86342±0.30096）高于模型組（0.41012±0.10035）；術(shù)后第14天，DWYG組（0.13873±0.01626）低于模型組（0.29838±0.09992）；術(shù)后第17天，DWYG組（0.38007±0.08595）低于模型組（0.76346±0.02471）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點GSK3β的蛋白表達水平比較：術(shù)后第14天

37、，模型組（1.08911±0.04313）高于空白組（0.33607±0.00433）；術(shù)后第22天，模型組（0.72570±0.09099）高于空白組（0.31403±0.03097）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或 P<0.05。術(shù)后第10天，DWYG組（9.06168±2.25561）高于空白組（0.33082±0.03924），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第10天，DWYG組（9.06168±

38、2.25561）高于模型組（1.36823±0.11584）；術(shù)后第14天，DWYG組（0.39855±0.04579）低于模型組（1.08911±0.04313）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.20201±0.12896）低于模型組（0.72570±0.09099）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點C-myc的蛋白表達水平比較：術(shù)后第10天，模型組（0.38214±0.08574

39、）高于空白組（0.10696±0.01269）；術(shù)后第14天，模型組（0.41937±0.23529）高于空白組（0.10866±0.00140）；術(shù)后第19天，模型組（0.25829±0.04226）高于空白組（0.11362±0.00875）；術(shù)后第22天，模型組（0.05292±0.00212）低于空白組（0.10153±0.01001）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。術(shù)后第10天，DWYG組（

40、0.37789±0.07038）高于空白組（0.10696±0.01269），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第19天，DWYG組（0.13076±0.03385）低于模型組（0.25829±0.04226），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。
　　不同時間點cyclinD1的蛋白表達水平比較：術(shù)后第17天，模型組（1.39008±0.00242）高于空白組（0.06501±0.00300），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，

41、p<0.01。術(shù)后第10天，DWYG組（1.66466±0.27007）高于空白組（0.05921±0.00702）；術(shù)后第14天，DWYG組（2.05675±0.83282）高于空白組（0.06015±0.00078）；術(shù)后第17天，DWYG組（0.24702±0.05901）高于空白組（0.06501±0.00300）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.02090±0.01496）低于空白組（0.05620±0.00554）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)

42、統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或 P<0.05。術(shù)后第10天，DWYG組（1.66466±0.27007）高于模型組（0.17641±0.05093）；術(shù)后第14天，DWYG組（2.05675±0.83282）高于模型組（0.69284±0.29621）；術(shù)后第17天，DWYG組（0.24702±0.05901）低于模型組（1.39008±0.00242）；術(shù)后第22天，DWYG組（0.02090±0.01496）低于模型組（

43、0.05703±0.00188）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.01或P<0.05。
　　不同時間點EpCAM的蛋白表達水平比較：術(shù)后第19天，模型組（0.82235±0.13035）高于空白組（0.37034±0.02852），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第14天，DWYG組（0.08119±0.03697）低于空白組（0.35418±0.00457），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。術(shù)后第1

44、4天，DWYG組（0.08119±0.03697）低于模型組（0.33000±0.03355），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，差異顯著，p<0.01。
　　不同時間點IL-1檢測結(jié)果顯示：與正常組（981.99±303.24）相比，模型組顯著上調(diào)細胞因子IL-1在術(shù)后第10天（3967.33±1966.02）、術(shù)后第19天（2230.46±1883.23）的表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，未獲得統(tǒng)計差異。術(shù)后第10天，DWYG組（1554.40±554.75

45、）低于模型組（3967.33±1966.02）；術(shù)后第19天，DWYG組（827.53±254.19）低于模型組（2230.46±1883.23）；以上數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均有顯著性差異，P<0.05。
　　不同時間點IL-6檢測結(jié)果顯示：與正常組（614.93±287.00）相比，模型組顯著下調(diào)細胞因子IL-6在術(shù)后第10天（244.82±128.15）和術(shù)后第19天（241.52±5.28）的表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均獲得統(tǒng)計差異,

46、p＜0.05。
　　不同時間點GRO/KC檢測結(jié)果顯示：與正常組（76.66±25.83）相比，模型組顯著上調(diào)細胞因子GRO/KC在術(shù)后第10天（575.22±241.02）、術(shù)后第14天（716.44±317.68）、術(shù)后第19天（115.15±67.89）的表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，未獲得統(tǒng)計差異。術(shù)后第14天，DWYG組（145.89±120.66）低于模型組（716.44±317.68），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，獲得統(tǒng)計差異,p＜0.05

47、。
　　不同時間點IFN-γ檢測結(jié)果顯示：與正常組（167.83±90.62）相比，模型組顯著下調(diào)IFN-γ在術(shù)后第10天（48.08±12.92）、術(shù)后第14天（48.2±16.95）、術(shù)后第19天（50.53±11.7）的表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均獲得統(tǒng)計差異,p＜0.05。
　　不同時間點TNF-α檢測結(jié)果顯示：與正常組（440.9±114.57）相比，模型組顯著下調(diào)TNF-α在術(shù)后第10天（138.77±35.82）、術(shù)

48、后第14天（174.9±55.57）、術(shù)后第19天（152.39±41.05）的表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，均獲得統(tǒng)計差異,p＜0.05。
　　不同時間點VEGF檢測結(jié)果顯示：與正常組（147.74±35.31）相比，模型組顯著上調(diào)細胞因子VEGF在術(shù)后第19天（274.25±200.09）的表達，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，獲得統(tǒng)計差異,p＜0.05。術(shù)后第19天，DWYG組（101.42±7.55）低于模型組（274.25±200.09），經(jīng)統(tǒng)計學(xué)

49、處理，獲得統(tǒng)計差異,p＜0.05。
　　結(jié)論：地五養(yǎng)肝膠囊具有促進正常肝臟再生和抗肝癌前病變的作用。
　　地五養(yǎng)肝膠囊對卵圓細胞的增殖和分化具有雙向調(diào)節(jié)作用：肝再生早期（肝切除術(shù)后8-14天），地五養(yǎng)肝膠囊促進肝內(nèi)卵圓細胞和骨髓干細胞增殖和分化，有利于肝臟再生修復(fù)；肝再生晚期(肝切除術(shù)后17-22天)，地五養(yǎng)肝膠囊抑制卵圓細胞的過度增殖和異常分化，有利于防治肝細胞癌變，抑制?髓失生肝?。其分子機制之一可能是地五養(yǎng)肝膠囊在肝切

50、除術(shù)后8天或更早已激活Wnt/β-catenin通路，促進卵圓細胞的增殖以加速肝臟再生；而肝再生晚期(肝切除術(shù)后14-22天)，地五養(yǎng)肝膠囊發(fā)揮抑制卵圓細胞的過度增殖和異常分化，有利于防治肝細胞癌變的作用，其機制可能是在更早的加速肝臟修復(fù)之后，地五養(yǎng)肝膠囊抑制了Wnt/β-catenin通路的持續(xù)激活，從而抑制卵圓細胞的過度增殖和癌變傾向。
　　地五養(yǎng)肝膠囊通過改善肝再生微環(huán)境影響骨髓干細胞和卵圓細胞的分化方向及其相關(guān)信號通路可能