新型噠嗪酮類化合物對不同動(dòng)物離體心肌力學(xué)特性的影響.pdf

1、目的:研究新型噠嗪酮類Ⅰ號(hào)、Ⅱ號(hào)、Ⅲ號(hào)、Ⅳ號(hào)和Ⅴ號(hào)化合物對不同動(dòng)物離體心肌力學(xué)特性的影響及作用特點(diǎn),并初步探討其作用機(jī)制。
　　 方法:
　　 1新型噠嗪酮類Ⅰ-Ⅴ號(hào)化合物的合成
　　 1.1Ⅰ號(hào)化合物:取氰化鉀32.5 g(0.5 mol)置于三口燒瓶中,加入乙腈420 mL使其溶解,將420 mL含有153.5 g(0.5 mol)4-吡啶甲醛的乙腈溶液以及丙烯腈的乙腈溶液相繼滴加到三口瓶中,滴加完畢后,攪拌

2、過夜。次日蒸餾除去乙腈,向剩余固體中加入氯仿過濾,除去不溶物。濾液除去氯仿后,剩余物質(zhì)用甲苯萃取三次,合并甲苯層后蒸餾除去溶劑,得4-o-4(4-吡啶)丁腈。取4-o-4(4-吡啶)丁腈4 g(0.025 mol)加入到三口瓶中,加入無水乙醇,攪拌下使之溶解,然后加入50 mL0.2 mol/L的鹽酸肼溶液,回流過夜。次日停止加熱,溶液經(jīng)活性炭脫色后放冷析晶,將該晶體溶于水中制成濃溶液,然后向其中加入碳酸鈉飽和溶液,抽濾后得Ⅰ號(hào)化合物。

3、
　　 1.2Ⅱ號(hào)化合物:?、裉?hào)化合物0.7 g(4 mmol),絕對乙醇25ml,置于60℃水浴攪拌,滴加溴乙酸乙酯(1.5 g,7 mmol),滴加完畢后,加熱回流冷卻攪拌過夜。次日減壓蒸除反應(yīng)溶劑后,再加入丙酮50 ml,冷凍過夜后過濾得到淡黃色晶體Ⅱ號(hào)化合物。
　　 1.3Ⅲ號(hào)化合物:取產(chǎn)物Ⅱ號(hào)化合物1 g(2.8 mmol)溶于15 ml甲醇,加入硼氫化鈉1.1 g,次日蒸除反應(yīng)溶劑甲醇,得到白色固體殘?jiān)?將殘

4、渣處理后得到淡黃色物質(zhì),加入無水乙醇重結(jié)晶,過濾得Ⅲ號(hào)化合物。
　　 1.4Ⅳ號(hào)化合物:?、筇?hào)化合物330 mg(1.25 mmol)加入1 mol/L的鹽酸20 ml使其溶解,加熱使之反應(yīng),停止反應(yīng)后過濾,殘?jiān)訜o水乙醇重結(jié)晶,抽濾得Ⅳ號(hào)化合物。
　　 1.5Ⅴ號(hào)化合物:取產(chǎn)物Ⅱ號(hào)化合物0.85 g(2.5 mmol),溶于15 ml甲醇,加入硼氫化鈉0.9 g,次日蒸除反應(yīng)溶劑甲醇,得到白色固體殘?jiān)?。將殘?jiān)幚砗蟮玫?/p>

5、淡黃色物質(zhì),加入無水乙醇重結(jié)晶,過濾得Ⅴ號(hào)化合物。
　　 2離體心肌標(biāo)本的制備
　　 2.1大鼠、豚鼠離體心房肌標(biāo)本的制備
　　 健康大鼠用25％烏拉坦麻醉后,迅速開胸取出心臟,并立即放入預(yù)冷的經(jīng)95％O2+5％CO2氧飽和的Krebs液中,沿房室溝剪去心室,小心截取左右心房(含竇房結(jié)),注意勿損傷竇房結(jié)。將制備好的大鼠離體心房肌放入持續(xù)充氧的麥?zhǔn)喜鄣撞?另一端連接張力換能器,超級(jí)恒溫水浴循環(huán)。豚鼠心房肌標(biāo)本的制

6、備同上。
　　 2.2兔離體心室乳頭肌標(biāo)本的制備
　　 健康家兔用25％烏拉坦麻醉后,迅速開胸,取出心臟立即置于預(yù)冷的經(jīng)95％O2+5％CO2氧飽和的Krebs液中,沿心室緣將右心室剪開,選一完整的乳頭肌并將其兩端結(jié)扎后迅速放入持續(xù)充氧的盛有20 ml Krebs液的麥?zhǔn)喜鄣撞?心肌標(biāo)本一端連接張力換能器,電刺激驅(qū)動(dòng)乳頭肌收縮,調(diào)整最適前負(fù)荷直至乳頭肌肌張力達(dá)到最大值為止,超級(jí)恒溫水浴循環(huán)。
　　 3新型噠嗪酮類

7、化合物對不同動(dòng)物離體心肌力學(xué)特性影響的測定
　　 3.1新型噠嗪酮類化合物變力作用(inotropic effects)的測定
　　 動(dòng)物心肌標(biāo)本掛好后,調(diào)整給予的前負(fù)荷,直至標(biāo)本前負(fù)荷達(dá)到最大值即肌張力達(dá)到最大后,平衡45 min,用10-3mol/L的腎上腺素連續(xù)激活標(biāo)本2次后開始按不同濃度梯度給藥,使其終濃度依次達(dá)到10-7,3×10-7,10-6,3×10-6,10-5,3×10-5,10-4,3×10-4 mo

8、l/L,給藥結(jié)束后溫浴2 h,再用異丙腎上腺素梯度給藥,使其終濃度依次達(dá)到10-10,3×10-10,10-9,3×10-9,10-8,3×10-8,10-7,3×10-7,10-6,3×10-6,10-5 mol/L作為對照。利用MS4000U-1C生物信號(hào)定量記錄分析系統(tǒng)記錄肌張力變化,累積給藥法計(jì)算心肌變力作用(藥后值-藥前值/藥前值的百分比),并對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,比較新型噠嗪酮類化合物和異丙腎上腺素的心肌變力作用。
　　

9、 3.2不同阻斷劑對Ⅲ號(hào)化合物正性變力作用的影響
　　 3.2.1β受體阻斷劑:先將Ⅲ號(hào)化合物不同濃度梯度累積給藥,使其終濃度依次達(dá)到10-7,3×10-7,10-6,3×10-6,10-5,3×10-5,10-4,3×10-4 mol/L,沖洗溫浴2 h后加入β受體阻斷劑噻嗎洛爾10-6 mol/L,最后再次將Ⅲ號(hào)化合物不同濃度梯度給藥。
　　 3.2.2α受體阻斷藥:給藥方案同上。Α受體阻斷藥酚妥拉明濃度為10-6

10、mol/L,觀察酚妥拉明給藥前后Ⅲ號(hào)化合物正性變力作用變化。
　　 3.2.3鈣通道阻斷藥:給藥方案同上。鈣通道阻斷藥硝苯地平濃度為10-6mol/L,觀察硝苯地平給藥前后Ⅲ號(hào)化合物正性變力作用變化。
　　 3.3新型噠嗪酮類化合物變頻作用(chronotropic effects)的測定
　　 心肌標(biāo)本制備、給藥方法同大鼠變力作用測定。利用MS4000U-1C生物信號(hào)定量記錄分析系統(tǒng)記錄心搏頻率變化,累積給藥法

11、計(jì)算藥物的變頻作用(藥后值-藥前值/藥前值的百分比),并對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,比較新型噠嗪酮類化合物和異丙腎上腺素的變頻作用。
　　 3.4新型噠嗪酮類化合物變舒作用(lusitropic effects)的測定
　　 心肌標(biāo)本制備、給藥方法同大鼠變力作用測定。利用MS4000U-1C生物信號(hào)定量記錄分析系統(tǒng)記錄達(dá)到峰值張力的時(shí)間(time to peaktension,TTP)、50％舒張時(shí)間即張力從峰值下降到峰值一半的

12、時(shí)間(timeto half relaxation,T50％)、舒張時(shí)間(relaxation time,Rt)、總收縮和舒張時(shí)間(total twitch duration,Tt)。對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,比較新型噠嗪酮類化合物和異丙腎上腺素的變舒作用。
　　 結(jié)果:
　　 1新型噠嗪酮類化合物的變力作用
　　 1.1對大鼠、豚鼠離體左右心房肌肌張力的影響
　　 Ⅰ號(hào)和Ⅱ號(hào)化合物對心房肌肌張力無顯著影響(P

13、＞0.05),Ⅲ號(hào)和Ⅴ號(hào)化合物在最高濃度3×10-4mol/L對大鼠和豚鼠的離體左右心房肌肌張力均有顯著的正性變力作用,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。而作為對照藥的異丙腎上腺素也能非常顯著地增加離體心房肌的肌張力并存在劑量依賴性。
　　 1.2不同阻斷劑對Ⅲ號(hào)化合物正性變力作用的影響
　　 α受體阻斷藥酚妥拉明、β受體阻斷劑噻嗎洛爾和鈣通道阻斷劑硝苯地平對Ⅲ號(hào)化合物的正性變力作用無顯著影響。
　　 1.3對兔心

14、室乳頭肌肌張力的影響
　　 Ⅰ號(hào)和Ⅱ號(hào)化合物對兔心室乳頭肌的肌張力無顯著影響(P＞0.05)。Ⅲ號(hào)、Ⅳ號(hào)和Ⅴ號(hào)化合物在最高濃度3×10-4 mol/L時(shí),對兔心室乳頭肌肌張力均有顯著的正性變力作用。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,乳頭肌肌張力與給藥前相比有顯著增加(P＜0.01);同樣,異丙腎上腺素也能顯著增強(qiáng)兔心室乳頭肌肌張力并呈劑量依賴性。
　　 2新型噠嗪酮類化合物的變頻作用
　　 Ⅰ號(hào)、Ⅱ號(hào)、Ⅲ號(hào)和Ⅴ號(hào)化合物對不同動(dòng)物離體

15、右心房心搏頻率均無顯著影響(P＞0.05),無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與之相反,異丙腎上腺素能顯著增強(qiáng)右心房的心搏頻率并呈劑量依賴性。
　　 3新型噠嗪酮類化合物的變舒作用
　　 Ⅲ號(hào)和Ⅴ號(hào)化合物對大鼠和豚鼠心房肌TTP、T50％、Rt、Tt、Ⅲ號(hào)、Ⅳ號(hào)和Ⅴ號(hào)化合物對兔心室乳頭肌TTP、T50％、Rt、Tt無顯著影響。
　　 結(jié)論:Ⅰ號(hào)、Ⅱ號(hào)化合物對大鼠、豚鼠和兔離體心肌力學(xué)特性無顯著影響;Ⅲ號(hào)、Ⅳ號(hào)、Ⅴ號(hào)化合物在最高濃度3