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1、目的:通過(guò)藥理動(dòng)物實(shí)驗(yàn),從氣道炎癥及免疫失衡方面初步探討廣西蛤蚧治療哮喘緩解期的作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:取健康清潔級(jí)昆明種小鼠72只,體重(18±2)g,雌雄各半,隨機(jī)分組,每組12只。分組如下:A組(空白組),B組(模型組),C組(地塞米松組),D組(蛤蚧高劑量組),E組(蛤蚧中劑量組),F(xiàn)組(蛤蚧低劑量組)。B、C、D、E、F組建立哮喘模型。除A組外,其余各組小鼠于第1、7、14天采用腹腔注射抗原液致敏,
2、第15天起,B、C、D、E、F組以引喘液霧化激發(fā),連續(xù)7d。在每次霧化激發(fā)30min之后,D、E、F組給予不同劑量的廣西蛤蚧灌胃(ig)(劑量分別為1.536、0.768、0.384g生藥/kg),C組給予地塞米松(3mg/kg),A、B組給予等體積蒸餾水,均按20mL/kg體重ig給藥。觀察各組小鼠引喘潛伏期、外周血及肺泡灌洗液中的嗜酸性粒細(xì)胞的數(shù)量;各組小鼠肺組織切片做HE染色,光鏡下觀察支氣管肺組織病理形態(tài)改變情況;ELISA方法
3、檢測(cè)各組小鼠血清中IgE、IL-4、IFN-γ的含量及各組小鼠血漿中PAF的表達(dá)。
結(jié)果:1.一般狀態(tài):激發(fā)時(shí),小鼠出現(xiàn)躁動(dòng)不安,搔抓顏面皮毛等過(guò)敏癥狀,呼吸急促,腹式呼吸明顯,口鼻、四肢及尾尖輕度紫紺,拉軟便;造模后,小鼠逐漸出現(xiàn)精神不振,反應(yīng)遲鈍,毛色失去光澤。各給藥組亦出現(xiàn)呼吸急促,幅度增強(qiáng)等表現(xiàn),但與模型組相比較輕。2.引喘潛伏期:模型組小鼠的引喘潛伏期縮短,與空白組比較,有極顯著性差異(P<0.01)。高、中、低劑量
4、組小鼠引喘潛伏期延長(zhǎng),與模型組比較,有極顯著性差異(P<0.01)。3.外周血及肺泡灌洗液(BALF)中EOS計(jì)數(shù):模型組外周血及BALF中EOS百分比值均明顯升高,與空白組比較,有極顯著性差異(P<0.01)。地塞米松組及高、中、低劑量組均明顯降低,與模型組比較,有極顯著性差異(P<0.01)。4.血清IgE含量:模型組小鼠血清IgE含量升高,與空白組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。高、中劑量組明顯降低,與模型組比較,有明顯差
5、異(P<0.05)。低劑量組IgE含量降低,但與模型組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.血漿PAF含量:模型組小鼠血漿PAF含量升高,與空白組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。地塞米松組及高、中劑量組明顯降低,與模型組比較,有明顯差異(P<0.05)。低劑量組PAF含量降低,但與模型組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.血清IL-4/IFN-γ平衡:模型組小鼠血清IL-4含量升高,IFN-γ含量明顯降低,與空白組比較,均有極顯著性差異(P<0.
6、01)。地塞米松組及高、中、低劑量組血清中 IL-4含量明顯降低,與模型組比較,有極顯著性差異(P<0.01);IFN-γ含量明顯升高,與模型組比較,均有極顯著性差異(P<0.01)。模型組IL-4/IFN-γ明顯升高,與空白組比較(P<0.01);地塞米松組及高、中、低劑量組IL-4/IFN-γ降低,與模型組比較,有極顯著性差異(P<0.01)。7.肺組織病理改變:空白組肺組織結(jié)構(gòu)完整,氣道上皮細(xì)胞無(wú)損傷,周圍組織無(wú)水腫;模型組的支氣
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