外傷性急性肺損傷患者NF-κB的活性以及NO、iNOS的含量變化.pdf

1、急性肺損傷(Acute lung injury,ALI)是現(xiàn)代危重病醫(yī)學(xué)中的一項(xiàng)難題,若不能得到較為及時(shí)有效的診治,常會(huì)發(fā)展成為急性呼吸窘迫綜合癥(Acute respiratory distress syndrome,ARDS),從而嚴(yán)重威脅患者生命,且常需耗費(fèi)大量醫(yī)療資源。ALI通常繼發(fā)于膿毒癥、嚴(yán)重感染、多發(fā)傷、戰(zhàn)傷、誤吸、大量輸血以及缺血再灌注損傷等臨床常見的急危重病癥,臨床中屬于常見病、多發(fā)病。
　　 急性肺損傷由多種

2、致病因素引起,以多形核中性粒細(xì)胞(Polymorphonuclear neutrophil,PMN)為主的炎性細(xì)胞在肺微血管內(nèi)大量的積聚、浸潤,過度表達(dá)并釋放大量炎癥介質(zhì),如TNF-α、IL-6、IL-8、ICAM-1、氧自由基等,使肺泡膜受到損傷,通透性增加,進(jìn)而引起ALI的發(fā)生。
　　 核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)在調(diào)控參與ALI炎癥介質(zhì)眾多基因的表達(dá)上起著關(guān)鍵作用,NF-κB活化

3、與ALI的發(fā)生關(guān)系密切,這在國內(nèi)外的許多基礎(chǔ)和臨床研究中均得到了驗(yàn)證。如何有效抑制NF-κB活化,避免炎癥反應(yīng)的“級(jí)聯(lián)放大”,從而防止ALI甚至ARDS的發(fā)生,是一個(gè)尚未解決的難題。盡管目前臨床上有多種多樣的治療手段,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也進(jìn)行了各種新的治療方法的研究,但尚未有突破性進(jìn)展。理想的有效治療似乎應(yīng)當(dāng)圍繞NF-κB活化的抑制以及防止PMN積聚、浸潤和損傷肺血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行,這兩個(gè)關(guān)鍵點(diǎn),已經(jīng)成為目前探討急性肺損傷發(fā)病機(jī)理和尋求治療手段的新

4、方向。
　　 一氧化氮(NO)是目前研究較多的一個(gè)具有自由基性質(zhì)的生物信息分子和效應(yīng)分子；一氧化氮合酶(NOS)則是生成NO的關(guān)鍵,也是唯一的限速酶。NF-κB作為一種具有多向性調(diào)節(jié)作用的快反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子,能與多種基因啟動(dòng)子部位的κB位點(diǎn)特異性結(jié)合進(jìn)而促進(jìn)其轉(zhuǎn)錄。近年來的研究發(fā)現(xiàn)NF-κB可通過改變NOS的表達(dá)狀況來調(diào)節(jié)NO生成,并在急性肺損傷中起重要作用。
　　 NF-κB激活后致使多種炎性細(xì)胞因子過度釋放是引起炎癥反應(yīng)

5、失控的關(guān)鍵；而中性粒細(xì)胞在細(xì)胞因子和趨化因子的作用下于肺部大量積聚、黏附、浸潤,并釋放大量氧自由基、蛋白酶等炎癥介質(zhì)致傷則是最終造成肺泡毛細(xì)血管基膜損傷、通透性增加的關(guān)鍵。
　　 目的:本研究旨在通過觀察急性肺損傷患者血液NO、NOS以及中性粒細(xì)胞胞核中NF-κB含量的變化,探尋急性肺損傷時(shí)體內(nèi)炎癥反應(yīng)的病理機(jī)制,為臨床治療提供理論依據(jù)。
　　 方法:收集2007年8月至2008年11月入住ICU的ALI患者50例為急性

6、肺損傷組,以2008年1月至2008年10月健康體檢人員50例為對(duì)照組,兩組性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性。分別抽取兩組肘靜脈血5ml,采用硝酸還原酶法測(cè)定NO含量；采用化學(xué)比色法測(cè)定NOS水平；中性粒細(xì)胞胞核中NF-κB活性測(cè)定采用Western Blot方法進(jìn)行檢測(cè)。
　　 結(jié)果:急性肺損傷時(shí),血清中NO含量顯著上升,與對(duì)照組比較,差異有顯著性,P<0.01；血清中誘生型一氧化氮合酶(iNOS)含量顯著上升,與

7、對(duì)照組比較,差異有顯著性,P<0.01；而固有型一氧化氮合酶(cNOS)含量變化不明顯,與對(duì)照組比較,差異無顯著性。
　　 Western Blot結(jié)果顯示:急性肺損傷組胞核中NF-κB P65蛋白的表達(dá)與對(duì)照組比較,有顯著升高,P<0.01.
　　 相關(guān)性分析:急性肺損傷時(shí),中性粒細(xì)胞胞核中,NF-κB p65表達(dá)水平與血清中iNOS及NO的含量呈顯著正相關(guān),r值分別為0.569,0.510,P均<0.05；而與血清中