髓系細胞觸發(fā)受體-1、血清淀粉樣蛋白A和降鈣素原在慢性阻塞性肺疾病急性加重中的應用.pdf

1、背景:
　　慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是一種慢性呼吸系統(tǒng)疾病。
　　AECOPD可能與感染等因素導致COPD肺部和全身炎癥過程進一步放大有關;引起AECOPD的病因不同,機體的炎癥反應也可能存在差異。因此,從炎癥介質和細胞因子中尋找AECOPD的生物標記,建立AECOPD早期診斷和分型分級標準,具有科學性和可行性。
　　髓系細胞觸發(fā)受體-1(

2、triggering receptor expressed on myeloid cell-1,TREM-1)、血清淀粉樣蛋白A(serum amyloid A,SAA)和降鈣素原(Procalcitionin,PCT)是新近較受關注的生物標志物,有研究顯示三者在AECOPD早期診斷、病原學診斷上有重要價值。TREM-1和SAA可能為AECOPD的病情嚴重程度判斷上提供客觀依據(jù)。
　　TREM-1是新近發(fā)現(xiàn)的細胞膜受體,具有激發(fā)和

3、放大炎癥反應的作用,最初發(fā)現(xiàn)于膿毒血癥,在炎癥反應中發(fā)揮主導作用,是診斷感染性疾病的標志物。TREM-1屬于免疫球蛋白超家族,在髓系細胞上表達。TREM-1通過特殊的細胞信號轉導途徑促進促炎介質的產生、抑制抗炎介質的表達而激活和放大炎癥級聯(lián)反應,從而放大感染所致的炎性反應信號。同時TREM-1能引起中性粒細胞脫顆粒、呼吸爆發(fā)和吞噬反應,延長炎癥部位中性粒細胞和單核細胞的生存。研究表明,細菌和真菌感染可使痰液和血液的TREM-1的表達明顯

4、上調,但在非感染炎癥性疾病以及由分枝結核桿菌引起的肉芽腫性炎癥或異物肉芽腫中TREM-1卻是低表達。Radsak的研究顯示穩(wěn)定期COPD患者的TREM-1較健康者顯著增高。Rohde的新近研究發(fā)現(xiàn)痰病毒PCR陽性的AECOPD患者血清TREM-1的水平明顯低于陰性的患者。TREM-1出現(xiàn)早,半衰期短,與體內感染同步,可作為感染性疾病診斷的新指標,在AECOPD的病因分型和分級中,可能具有非常重要的意義。
　　血清淀粉樣蛋白A(se

5、rum amyloid A,SAA)是一個非常敏感的急性時相蛋白。是由同一簇基因編碼的一組多形性蛋白,主要在肝細胞合成,但肝外器官也可產生,在正常組織中、動脈粥樣硬化、阿爾茨海默病、炎癥反應和腫瘤組織中可表達。當機體受到各種炎癥因素刺激時,8h～12h內SAA即可達到峰值,反應快速,增高幅度可達正常值的1000倍;半衰期也極短,只有50min,因此機體炎癥控制后,可迅速降至正常。這種特性使得SAA成為目前最敏感的炎癥標志物之一,較血沉和

6、白細胞升高更早、更靈敏可靠,動態(tài)監(jiān)測SAA水平或許有助于判斷病情的變化。Yamada的研究顯示SAA在細菌和病毒感染時均升高,細菌感染時升高明顯。Hutchinson的研究顯示SAA在AECOPD患者病毒感染時升高。Bozinovski等報道在AECOPD中SAA升高,且其與嚴重度分級密切相關。SAA可能有助于AECOPD的早期識別、病因診斷和病情嚴重度分級評估。
　　降鈣素原(Procalcitionin,PCT)是降鈣素的前肽

7、,由116個氨基酸組成,相對分子質量為13000,血清中半衰期約為25h～30h,生理狀態(tài)下降鈣素原由甲狀腺c細胞產生,血清中含量極低。細菌感染和膿毒血癥等情況下,降鈣素原水平明顯升高,但自身免疫性炎癥或病毒感染時降鈣素原水平升高并不明顯。因此被認為是診斷細菌感染、預測其病情和預后的良好的生物標記。Stolz的研究結果提示,根據(jù)PCT水平指導AECOPD的抗生素治療,可以安全地減少下呼吸道低濃度細菌感染患者的抗生素應用。Lacoma的研

8、究提示PCT在肺炎及AECOPD患者中較穩(wěn)定期COPD患者均升高。
　　感染是AECOPD的主要誘因,TREM-1、SAA和PCT與AECOPD、感染具有較強的相關性,通過研究TREM-1、SAA和PCT在AECOPD中的變化及其與病原學的相關性,在COPD的防治和機制研究中將有重要的意義和廣泛的應用前景。
　　目的:
　　探討髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)、血清淀粉樣蛋白A(SAA)、降鈣素原(PCT)在慢性阻

9、塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)的臨床應用。
　　方法:
　　1.納入對象2010年1月至2011年6月因COPD在門診或住院部診治的穩(wěn)定期患者40例,GOLD(肺功能)分級:Ⅰ級5例,Ⅱ級16例,Ⅲ級13例,Ⅳ級6例。
　　2.納入標準
　　患者年齡40～80歲,COPD診斷需符合慢性阻塞性肺疾病診治指南(2007年修訂版)診斷標準。所有患者前一年至少有1次AECOPD,處于穩(wěn)定期即近4周無呼吸道感染及急性

10、加重。
　　3.排除標準
　　(1)合并嚴重心腦血管疾病或嚴重軀體疾病(如心肌梗塞、不穩(wěn)定型心絞痛、腦血管意外、惡性腫瘤、腎功能不全等)。
　　(2)除COPD外的長期慢性炎癥疾病,如結締組織病、既往診斷明確的哮喘和支氣管擴張。
　　(3)本次調查后1周內發(fā)生AECOPD者。
　　(4)妊娠、哺乳期婦女。
　　(5)有慢性酗酒史、精神病史或濫用藥物史或任何影響依從性的因素。
　　(6)不能留取血

11、、痰或尿液標本者。
　　(7)無法完成肺功能檢測者。
　　(8)正在參加其它藥物試驗者。
　　(9)其它情況無法完成實驗者。
　　4.資料及標本收集
　　(1)記錄患者的一般資料,吸煙狀況、家族史、呼吸道癥狀(咳嗽、咳痰、喘息、氣促和其它)、急性加重情況(呼吸道癥狀、用藥和住院情況)、呼吸困難和癥狀評分和合并疾病等。
　　(2)對患者進行體格檢查及X線胸片、心電圖、肺通氣功能+支氣管舒張試驗、外周血氧

12、飽和度檢查及血常規(guī)等常規(guī)檢查,并留取靜脈血標本待測。
　　(3)與患者保持電話聯(lián)系密切隨訪,詳細告知什么情況下為穩(wěn)定期、急性加重,出現(xiàn)病情變化時及早到院診治,進行體格檢查及X線胸片、心電圖、肺通氣功能+支氣管舒張試驗、外周血氧飽和度檢查及血常規(guī)等常規(guī)檢查,并再次留取靜脈血及痰液標本。痰液標本立即送檢行病原學檢查,所有靜脈血標本經處理后均于-70℃凍存待測。
　　5.測定方法
　　TREM-1、SAA檢測方法:均采用EL

13、ISA法,操作按試劑盒和相關說明書進行(TREM-1試劑盒為美國R&D System公司生產,SAA試劑盒為美國BIOSOURCE公司生產)。
　　PCT檢測方法:采用酶聯(lián)熒光分析法(ELFA法),使用法國梅里埃BioMerieux公司VIDAS全自動酶聯(lián)熒光分析儀及配套試劑進行血清PCT全自動定量檢測。
　　病原學檢測:痰細菌培養(yǎng):可用咳深部痰或誘導痰標本,涂片檢查為合格痰標本后送檢,采用法國生物梅里埃(BioMerieu

14、x)公司的VITEK2 Compact全自動微生物分析儀將分離菌株鑒定到種。病毒檢測:采用痰標本,采用美國ABI公司的ABI7500熒光定量PCR儀運用聚合酶鏈反應技術(PCR)方法進行鑒定。
　　6.統(tǒng)計學分析
　　全部數(shù)據(jù)采用SPSS15.0統(tǒng)計軟件處理。計量資料為正態(tài)分布時用x±s描述,兩樣本間比較用t檢驗,多樣本間比較用方差分析;計量資料呈非正態(tài)分布,用中位數(shù)描述,采用非參數(shù)分析檢驗。計數(shù)資料采用χ2檢驗。P<0.0

15、5有統(tǒng)計學差異。
　　結果:
　　1、入選40例COPD患者中,男性患者37例,女性患者3例,平均年齡66.13±6.32歲。吸煙者34例,非吸煙者5例,戒煙者1例。既往有肺部手術史(炎癥假瘤)者1例,高血壓病史者4例,胃腸疾病史3例,骨關節(jié)疾病史2例。所有COPD患者穩(wěn)定期胸片檢查符合COPD表現(xiàn),急性加重時胸片無肺實質滲出性炎癥改變。心電圖均為竇性心律,偶發(fā)室性早搏者2例,偶發(fā)房性早搏者3例,有完全或不完全性右束支傳導阻

16、滯者5例,T波輕度低平者2例。急性加重時有3例患者出現(xiàn)竇性心動過速,余患者心電圖較穩(wěn)定期無明顯變化。
　　2、AECOPD患者血白細胞、中性粒細胞絕對值、血清TREM-1、SAA水平及血清PCT陽性率均較穩(wěn)定期升高。
　　3、痰細菌培養(yǎng)結果陽性AECOPD患者血清TREM-1水平、PCT陽性率較陰性患者均升高,但SAA水平差異無統(tǒng)計學意義。痰病毒PCR結果陽性AECOPD患者血清SAA水平較陰性患者升高,但TREM-1水平、

17、PCT陽性率差異無統(tǒng)計學意義。
　　4、將AECOPD患者按Anthonisen標準分為Ⅰ～Ⅲ型共三組,運用非參數(shù)秩和檢驗對比各組間TREM-1、SAA水平,差異無統(tǒng)計學意義。
　　結論:
　　1、SAA、PCT可作為早期判斷AECOPD的客觀指標。
　　2、AECOPD患者中如其TREM-1水平升高、PCT陽性提示急性加重的誘因可能與下呼吸道細菌感染有關。
　　3、AECOPD患者中如其SAA水平升高、T