金花茶內(nèi)源激素變化規(guī)律及頂生金花茶遺傳多樣性的SSR分析.pdf

1、金花茶組植物是我國珍稀瀕危保護物種，具有較高的觀賞價值、保健、藥用和研究價值。本研究通過采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，對不同開花量（花多植株、花少植株、無花植株）金花茶(Camellia nitidissima)植株內(nèi)源激素含量進行周年測定;以及對4種金花茶組植物[龍州金花茶(C.longzhouensis)、顯脈金花茶(C.euphlebia)、東興金花茶(C.tunghinensis)和凹脈金花茶(C.impressinervi

2、s)]在花期和結(jié)實期的內(nèi)源激素含量比較分析，摸清金花茶內(nèi)源激素含量動態(tài)變化規(guī)律，研究結(jié)果有助于深刻認識金花茶組植物內(nèi)源激素對其開花的影響。另一方面，利用SSR分子標記技術(shù)對頂生金花茶（C.pingguoensisD.Fang var.terminalis）自然居群遺傳多樣性及遺傳結(jié)構(gòu)進行分析，為合理保護和物種恢復(fù)提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　花芽分化期，金花茶葉內(nèi)源IAA、ZR含量先高后低，GA3含量整體上升，ABA先低后

3、高，其中，花多植株ZR含量高于花少植株和無花植株，而IAA、GA3、ABA含量則低于花少植株或無花植株;開花期間，IAA、GA3、ABA含量整體下降，ZR含量先低后高，其中，花多植株葉內(nèi)源IAA、ZR、GA3含量高于花少植株和無花植株，ABA含量低于花少植株或無花植株。激素之間具有促進作用或拮抗作用，ZR/IAA比值在營養(yǎng)生長旺盛時數(shù)值大，生殖生長強烈時值較小，(IAA+GA3)/ZR與之相反;刺激型激素ZR是金花茶生長中調(diào)節(jié)花形態(tài)分化

4、、促進金花茶成花量的重要調(diào)節(jié)激素，在花芽分化前期人工調(diào)控植株內(nèi)源激素的含量和比例，提高ZR、IAA含量或降低GA3、ABA含量，有利于花形態(tài)建成、提高坐果率、減少落花落果、促進高產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)。
　　花期內(nèi)，龍州金花茶各組織內(nèi)源激素含量高低排序為:果枝葉＞營養(yǎng)枝葉，果枝＞營養(yǎng)枝，盛花＞始花＞蕾，在結(jié)實期，果枝葉＞營養(yǎng)枝葉，營養(yǎng)枝＞果枝，幼果IAA含量最高;低IAA、GA3有利于蕾的休眠，高濃度GA3以及低濃度ABA、ZR有利于金花茶花形態(tài)

5、分化，高濃度IAA、GA3低濃度ABA有利于幼果生長;內(nèi)源ABA含量和GA3/ABA比值在花芽分化時期上升，是其從營養(yǎng)生長轉(zhuǎn)向生殖生長的依據(jù)，可將ABA、GA3/ABA比值的變化位點作為龍州金花茶生殖生長的生理標記;在花形態(tài)建成過程中,龍州金花茶花內(nèi)源ZR、GA3、ABA互相促進，而幼果中IAA和ABA互相拮抗。
　　顯脈金花茶植株不同組織內(nèi)源IAA平均含量大小為:枝＞葉、果＞花＞蕾;GA3平均含量大小為:葉＞枝、果＞蕾＞花;ZR

6、平均含量大小為:葉＞枝、蕾＞花＞果;ABA平均含量大小為:枝＞葉、花＞蕾＞果;花芽分化期，蕾內(nèi)源IAA/ABA、ZR/ABA、（IAA+GA3）/ZR比值逐漸上升;花形態(tài)分化期，花內(nèi)源IAA/ABA、ZR/ABA比值下降;幼果形成期，果內(nèi)源IAA/ABA、（IAA+GA3）/ZR比值大幅度上升，表明植株IAA/ABA、ZR/ABA、(IAA+GA3)/ZR比值上升有利于花芽分化，IAA/ABA、ZR/ABA比值下降有利于花形態(tài)分化，而I

7、AA/ABA、（IAA+GA3）/ZR比值上升有利于結(jié)實。
　　東興金花茶植株枝條內(nèi)源激素平均含量高于葉片，花果期內(nèi)，果葉IAA、ABA先低后高，GA3、ZR先高后低，果枝內(nèi)源IAA、ABA為“低-高-低-高”，ZR先高后低，GA3先低后高;花芽分化期，蕾內(nèi)源GA3、 ABA含量上升而IAA、ZR含量下降;花形態(tài)分化期，花IAA、ZR含量上升而GA3、ABA含量下降;幼果形成過程中，果內(nèi)源IAA、GA3含量上升，而ZR、ABA含量

8、下降。表明高GA3、ABA低IAA、ZR含量利于花芽分化，而高IAA、ZR低GA3、ABA含量有利于花形態(tài)分化，相對高ZR含量是成花的關(guān)鍵因素，高濃度ABA利于花朵脫落，高濃度IAA、GA3低濃度ABA利于有利于幼果生長。
　　凹脈金花茶植株內(nèi)源IAA、ZR平均含量大小為:果葉＞果枝，果枝＞營養(yǎng)枝，而內(nèi)源GA3、ABA平均含量大小為:營養(yǎng)枝葉＞果枝葉，營養(yǎng)枝＞果枝，蕾、花、果中內(nèi)源IAA平均含量大小為:果＞花＞蕾，ZR為:蕾＞花＞

9、果，GA3為:果＞蕾＞花，ABA為:花＞蕾＞果?；ㄑ糠只冢僦衂R含量、ZR/ABA比值下降;花形態(tài)建成期，花ZR含量以及IAA/ABA、ZR/ABA比值大幅度上升;幼果形成期，幼果內(nèi)源IAA、GA3含量和IAA/ABA、GA3/ABA、(IAA+GA3)/ZR比值上升，表明ZR含量和ZR/ABA比值減小有利于芽向生殖方向轉(zhuǎn)變，而高ZR含量和ZR/ABA比值利于促進花形態(tài)分化，IAA、GA3含量上升有利于幼果發(fā)育。
　　利用9對

10、SSR引物對4個頂生金花茶野生居群中的123份樣品進行遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)分析。結(jié)果表明，等位基因數(shù)(Na)為6.417，等位基因的豐富度(AR)為6.132，多態(tài)信息含量(PIC)為0.721，多態(tài)位點百分率（P）為100％;由雜合度(Ho=0.564，He=0.679)可知，頂生金花茶群體仍保持著中等遺傳多樣性水平;根據(jù)F統(tǒng)計和AMOVA分析，居群遺傳變異主要存在于居群間，在居群內(nèi)出現(xiàn)近交繁殖，經(jīng)Hardy-Weinberg平衡檢測