去除ABO血型抗體制備通用型血液制劑的研究.pdf

1、與同型輸注血液制劑比較，通用型血液制劑具有很多優(yōu)點：不需要血型鑒定及交叉配血，節(jié)省時間，減少由于血型不合引起的溶血性輸血反應，可用于任何一種血型患者輸用等。對于O型血液來說，確定O型血液中ABO血型抗體的分布、選擇合適的ABO血型抗體吸附劑、探尋去除抗體吸附劑的方法，從而為臨床提供安全有效的通用型血液制劑是制備去除ABO血型抗體的通用型血液制劑成功的關鍵及難點。從這個研究理念出發(fā)，筆者進行了三個部分的研究工作： 一、O型紅細胞懸

2、液或全血中ABO血型抗體的分布情況研究。確定北京地區(qū)ABO血型抗體在O型紅細胞懸液及O型全血中的分布情況，研究制備新型通用型紅細胞的可行性。采用鹽水法測定IgM型抗體效價，采用二巰基乙醇破壞IgM型抗體后，采用凝聚胺試驗檢測IgG型抗體效價的方法，檢測北京地區(qū)263例“O”型紅細胞懸液中IgM型、IgG型抗-A、抗-B效價及255例“O”型全血中IgM型、IgG型抗-A、抗-B效價，結果顯示，抗-A抗體(IgM型和IgG型)主要分布在效

3、價16-128之間，以效價64最多；抗-B抗體(IgM型和IgG型)主要分布在效價8-64，以效價16、32、64分布最多；O型紅細胞懸液血漿中的ABO血型抗體的分布與O型全血血漿中ABO血型抗體(IgM型和IgG型)的分布相似；從效價分布看出，如果以效價64為安全的受血效價，有近30％的A型和B型的受血者接受效價高于64的O型血液將會引起輸血反應。因此，選擇合適的ABO血型抗體吸附劑是下一步研究的內容。 二、ABO血型抗體吸附

4、劑--凍干紅細胞膜的制備、保存及特性檢測研究。確定A型、B型凍干紅細胞膜為ABO血型抗體吸附劑，結果顯示，海藻糖作為凍干保護劑能很好的保存紅細胞膜的抗原性，冰凍干燥技術保存了紅細胞膜的抗原性(凍干后，作為吸附劑吸附前后，抗體效價比較無顯著性差異P＜0.01)。確定了復溶的凍干紅細胞膜液與O型血血漿的最適反應條件為：復溶的凍干紅細胞膜液與O型紅細胞懸液血漿體積比為1：10，在室溫條件(20±3℃)下，反應25±5min。 三、通用

5、型血液制劑的制備研究。研究發(fā)現，O型紅細胞懸液或全血中分別加入凍干的A型、B型紅細胞膜后，血漿中的血型抗體(IgM型抗體和IgG型)效價有不同程度的降低，降低程度為80％-99％。凍干紅細胞膜作為固體吸附劑去除紅細胞懸液或全血血漿中的血型抗體后，紅細胞懸液中紅細胞的功能沒有改變：吸附前后ATP無明顯變化，變形指數、脆性試驗、上清游離Hb含量實驗前后的差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；全血中紅細胞的功能指標沒有改變：ATP、變形指數、脆

6、性試驗、上清游離Hb含量、乙酰膽堿酯酶在吸附前后比較無明顯差異(P＞0.05)，全血血漿中凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ活性吸附前后無顯著性差異(P＞0.05)：O型血漿中加入凍干紅細胞膜前后，血漿中凝血因子活性無顯著性差異(P＞0.05)。探討了凍干紅細胞膜在O型紅細胞懸液和血漿中的去除方法，實驗顯示，通過適當的離心，O型紅細胞懸液中紅細胞膜的清除率可達到77％，而高速離心(3500轉/min，3min)，去除血漿中紅細胞膜碎片效果最好，清除率可