天舒膠囊物質基礎及其在生產過程中轉移規(guī)律.pdf

1、　　目的：指認天舒膠囊(Tianshu capsule,TSC)HPLC指紋圖譜各色譜峰并對其進行藥味歸屬；采用化學計量學方法開展天舒膠囊治療偏頭痛的譜效關系研究,快速辨識其可能的藥效成分群；明確天舒膠囊主要藥效物質在生產過程中的變化及其質量傳遞規(guī)律。
　　方法：(1)收集天舒膠囊樣品 5批,采用 2010版《中國藥典》天舒膠囊標準【指紋圖譜】項下方法測定,開展 HPLC指紋圖譜分析,盡可能全面的表征其化學成分類別。(2)采用

2、 HPLC對比分析,對 TSC與原料藥材中化學成分的色譜峰進行相關性研究,對各個色譜峰進行藥源性歸屬。在對照品對照、在線紫外吸收光譜和質譜裂解規(guī)律的基礎上,鑒定天舒膠囊 HPLC圖中的色譜峰。采用 HPLC 方法同步測定天舒膠囊中 3 個主要成分,天麻素、5-羥甲基糠醛和阿魏酸,并進行了方法學驗證。(3)根據(jù)天舒膠囊 HPLC圖中各色譜峰代表的化學成分的極性大小和物理化學特性,采用 Flash(快速液相儀)進行不同極性組分的制備,并對各

3、組分進行 HPLC指紋分析。(4)開展與 TSC治療偏頭痛相關的體外藥理模型的研究,如 TSC組分對 PC12細胞增殖抑制作用、對微血管內皮細胞的作用、對氧糖剝奪模型腦神經(jīng)膠質細胞的保護作用。(5)選擇主要藥效成分天麻素、阿魏酸和藳本內酯,開展溫度、pH值、光照對其化學穩(wěn)定性的影響。( 6)選擇天舒膠囊生產過程中的關鍵環(huán)節(jié),采用指紋圖譜結合多指標定量,評價天麻素、阿魏酸和藁本內酯在生產過程中的傳遞規(guī)律。
　　結果：(1)測定的

4、 5 批天舒膠囊樣品,批與批之間質量具有很好的一致性。(2)基于對照品對照、在線全波長紫外吸收以及 LC-MS/MS、LC-IT-TOF-MS提供的質譜信息,對典型樣品中的主要色譜峰進行了指認,從中推斷和指認了38個化合物。將天舒膠囊與原料藥材進行 HPLC比對分析,其中 9個色譜峰來源于天麻,29個色譜峰來源于川芎。 (3) 采用 Flash快速制備技術制備天舒膠囊水提組分 6個和醇提組分 6個,并對各組分進行了 HPLC指紋圖譜分析

5、和色譜峰指認。(4)天舒醇提-1、醇提-5、醇提-6和天舒水提-1對 PC12細胞增殖有抑制作用；水提-1、醇提-3、醇提-4和醇提-6表現(xiàn)出對氧糖剝奪的腦微血管內皮細胞的保護作用；天舒膠囊水提和醇提組分均對氧糖剝奪的腦神經(jīng)膠質細胞有保護作用。(5)明確阿魏酸、藳本內酯在高溫 80℃和 100℃下都有降解、異構,天麻素在室溫下與時間無明顯量時關系；阿魏酸在低 pH值條件下有明顯的異構物產生,天麻素在不同 pH 值的環(huán)境中無明顯變化；阿魏

6、酸在光照條件下 5h 有順勢異構體異阿魏酸產生,藳本內酯在光 照條件下 5h 有明顯的開環(huán)脫羥和脫羰的降解反應。(6)模擬在不同溫度下的生產工藝, 80℃、100℃下,醇提取的步驟中天麻素、阿魏酸的轉移率占總轉移率的 82%以上；在醇提步驟原藥材中主要藥效物質已被提取出來,水提部位的提取率就較小,在 1.15%~6.80%之間。在醇提取液和水提取液濃縮過程中,天麻素、阿魏酸的含量無明顯變化,由于藁本內酯的光敏及熱敏性,藁本內酯的含量有所

7、降低。
　　結論：首次明確了天舒膠囊的化學組成,在化學成分的類別和數(shù)目以及相對和絕對含量上,天舒膠囊批與批之間都保持了很好的一致性；天舒醇提各組分和水提各組分對所選體外模型均表現(xiàn)出一定的藥理活性；天舒膠囊中的阿魏酸、藁本內酯是光敏、熱敏性成分,天麻素在高溫下亦表現(xiàn)一定程度的熱不穩(wěn)定性；天麻素和阿魏酸在不同溫度下皆有動態(tài)變化現(xiàn)象,在現(xiàn)有的工藝下,天舒膠囊中天麻素、阿魏酸總體可以維持在一個相對穩(wěn)定的水平,從而保證了天舒膠囊的產品質