腺性膀胱炎中腫瘤相關(guān)指標(biāo)的研究與動(dòng)物模型的建立.pdf

1、第一部分:腺性膀胱炎中腫瘤相關(guān)指標(biāo)的研究隨著膀胱鏡檢查及活檢意識(shí)的增強(qiáng)，過去認(rèn)為比較罕見的腺性膀胱炎(Cystitisglandularis，CG)現(xiàn)在報(bào)道明顯增多，已經(jīng)成為臨床上的常見病和多發(fā)病。目前雖仍被歸入“炎癥”的范疇，但炎癥只是病變的起因之一，其本質(zhì)是移行上皮的增生和化生。正因?yàn)槿绱?，腺性炎癥有不同于一般泌尿道感染性炎癥的臨床病理特征和處理原則，即病變對(duì)抗生素療效不佳且有發(fā)生癌變可能。腺性膀胱炎最重要的臨床意義就在于其可能發(fā)生

2、癌變。目前關(guān)于腺性膀胱炎是否會(huì)惡變即是否為癌前病變，仍有爭議。有人認(rèn)為腺性膀胱炎只是正常變異，不會(huì)惡變；但在許多腺性膀胱炎發(fā)生惡變的文獻(xiàn)中，將其視為癌前病變。發(fā)生上述爭議的原因之一可能在于沒有認(rèn)識(shí)到腺性膀胱炎有不同類型，而不同的類型其生物學(xué)意義可能不同，故本文建議將腺性膀胱炎根據(jù)膀胱鏡下表現(xiàn)進(jìn)行分型：低危型和高危型。低危型腺性膀胱炎在膀胱鏡下表現(xiàn)為：膀胱粘膜呈顆粒狀凸凹不平、單個(gè)或數(shù)個(gè)小濾泡、小片絨毛樣水腫、粘膜充血或血管紋理增粗增多。

3、高危型腺性膀胱炎在膀胱鏡下表現(xiàn)為：乳頭狀瘤樣、大片絨毛樣水腫、實(shí)性團(tuán)塊瘤狀或紅潤型。低危型腺性膀胱炎基本沒有癌變可能，而高危型腺性膀胱炎有癌變可能即為癌前病變。本研究擬依次從細(xì)胞生物學(xué)水平和分子生物學(xué)水平檢測腫瘤相關(guān)指標(biāo)在腺性膀胱炎中的改變情況，來進(jìn)行深入研究。即通過檢測腺性膀胱炎組織細(xì)胞的DNA含量和腫瘤相關(guān)基因的表達(dá)，探討不同類型腺性膀胱炎的良惡性程度、惡變的可能性及可能的惡變機(jī)制，目的是判斷將腺性膀胱炎進(jìn)行臨床分型有無合理性，并為

4、臨床治療提供理論依據(jù)。 在本實(shí)驗(yàn)中根據(jù)膀胱鏡下表現(xiàn)將腺性膀胱炎分為低危型及高危型，用流式細(xì)胞術(shù)檢測25例腺性膀胱炎組織細(xì)胞的DNA含量(DNAindex，DI)，用原位雜交和免疫組化的方法研究38例腺性膀胱炎組織中端粒酶催化亞單位(humantelomerereversetranscriptase，hTERT)，增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)、突變型p53、p21ras、bcl-2及Rb等的表達(dá)。研究發(fā)現(xiàn)正常組DI值為1.00±0.

5、03，低危型腺性膀胱炎組為1.01±0.05，高危型組為1.05±0.07，各組之間的差異無顯著性(P＞0.05)；hTERT、p53及PCNA在高危型組中陽性表達(dá)分別為6例(33.3％)，4例(22.2％)和7例(38.9％)，在低危型組中分別為陰性表達(dá)(hTERT，p53)和1例(5.0％)陽性表達(dá)(PCNA)，在正常對(duì)照組均為陰性表達(dá)；高危型組與低危型組、正常組之間的差異均有顯著性(P＜0.05)，而低危型組與正常組之間無顯著性差

6、異(P＞0.05)。p21ras、bcl-2及Rb在高危型組、低危型組和正常組的表達(dá)無顯著性差異(P＞0.05)。 通過以上研究可得出以下結(jié)論：高危型腺性膀胱炎尚未出現(xiàn)顯著的細(xì)胞生物學(xué)惡性改變，即其和低危型腺性膀胱炎同為良性病變。高危型腺性膀胱炎中hTERT、PCNA、p53表達(dá)較低危型組和正常組顯著升高，提示高危型有可能發(fā)生惡變，因此將腺性膀胱炎分為高危型及低危型具有合理性。p53基因可能在高危型腺性膀胱炎的惡變過程中有重要作

7、用，這對(duì)于探討其惡變機(jī)制有重要意義。 第二部分:膀胱內(nèi)灌注脂多糖法建立腺性膀胱炎動(dòng)物模型的研究 由于腺性膀胱炎病因仍不清楚，故目前尚無可靠的動(dòng)物模型。病因不清也導(dǎo)致臨床治療的混亂局面。目前認(rèn)為腺性膀胱炎是膀胱移行上皮在慢性刺激長期作用下發(fā)生化生的結(jié)果。能引起膀胱移行上皮發(fā)生化生的刺激因素很多，如膀胱內(nèi)的慢性炎癥、梗阻、結(jié)石、腫瘤等都可能是腺性膀胱炎的誘因，但確切誘因尚未找到。從臨床實(shí)踐和文獻(xiàn)報(bào)道可知膀胱內(nèi)的慢性細(xì)菌感染與

8、腺性膀胱炎的發(fā)生有重要關(guān)系。作為細(xì)菌的內(nèi)毒素，脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)是革蘭氏陰性細(xì)菌的共有成分，與其致病性關(guān)系密切。本實(shí)驗(yàn)通過用膀胱內(nèi)灌注LPS的方法來探討LPS與腺性膀胱炎發(fā)病的關(guān)系，并探索建立腺性膀胱炎動(dòng)物模型的方法。 在本實(shí)驗(yàn)中將28只雌性Wistar大鼠分3組：正常對(duì)照組(A組，8只)、生理鹽水對(duì)照組(B組，10只)、脂多糖組(C組，10只)。用膀胱內(nèi)灌注脂多糖的方法制作腺性膀胱炎動(dòng)物模型