Ito細(xì)胞參與TPN誘發(fā)的肝功能障礙發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的: 為探究肝臟Ito細(xì)胞在長期應(yīng)用全腸道外營養(yǎng)(TPN)而誘發(fā)的肝臟功能障礙中形態(tài)和功能的變化，從而試圖揭示Ito細(xì)胞在TPN相關(guān)的肝臟病變發(fā)病機(jī)制中的重要性。 方法: 把16只幼豬隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，每組各8只。實(shí)驗(yàn)組幼豬禁食禁水2周，經(jīng)中心靜脈給予持續(xù)的TPN點(diǎn)滴；對(duì)照組允許進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)豬飼料和自由飲用自來水。兩組每日攝人大致相同的熱卡。每只豬分別于實(shí)驗(yàn)開始當(dāng)天(0天)和實(shí)驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天(14天)獲取血液標(biāo)本

2、和肝臟組織活檢標(biāo)本。血液標(biāo)本用于檢測(cè)肝生化功能指標(biāo)的變化；肝臟活檢標(biāo)本除了應(yīng)用普通顯微鏡評(píng)價(jià)肝臟組織學(xué)病理變化外；還分別用透射電子顯微鏡和免疫組織化學(xué)方法分析Ito細(xì)胞在這一病變中的相應(yīng)變化。 結(jié)果: 實(shí)驗(yàn)開始時(shí)(0天)，兩組血生化肝功能指標(biāo)以及活檢肝組織的形態(tài)學(xué)觀察無明顯異常；而且應(yīng)用免疫組織化學(xué)分析Ito細(xì)胞的分布和數(shù)量也未見異常。然而，TPN應(yīng)用14天后，實(shí)驗(yàn)組幼豬的肝臟血生化檢查結(jié)果血清總膽紅素水平和膽酸濃度明顯

3、異常；HE染色顯示輕度的炎癥細(xì)胞的浸潤，重度的肝細(xì)胞脂肪變性，以及膽管部分增生。其HE評(píng)分結(jié)果與對(duì)照組相比明顯異常。α-SMA免疫組織化學(xué)分析顯示活化的Ito細(xì)胞數(shù)目明顯增多，廣泛分布于竇周間隙，其染色陽性率與對(duì)照組相比明顯異常；透射電鏡觀察顯示Ito細(xì)胞胞漿內(nèi)粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯增多，細(xì)胞肥大，胞漿突起更為明顯；部分活化的Ito細(xì)胞伴隨著維生素A脂肪滴消失；胞漿外竇周間隙內(nèi)可觀察到膠原纖維的形成。而且，竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞下可見基底膜樣結(jié)構(gòu)的沉積

4、。由于增生肥大的Ito細(xì)胞的“擠壓”作用以及竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞外基底膜樣物質(zhì)的形成，可以觀察到竇狀隙變形并趨于狹窄，而Disse間隙相應(yīng)地變寬。激活的Ito細(xì)胞胞漿中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)明顯增多。 結(jié)論: (1)TPN應(yīng)用2周后，幼豬肝組織發(fā)生了以脂肪變性和小膽管增生為顯著特點(diǎn)的病理變化。而肝臟生化酶學(xué)卻表現(xiàn)出了相對(duì)“滯后”的現(xiàn)象。 (2)長期持續(xù)應(yīng)用TPN直接或間接激活了肝臟竇周間隙中的Ito細(xì)胞，使得該細(xì)胞由靜態(tài)貯脂細(xì)胞活

5、化并表現(xiàn)出肌纖維母細(xì)胞的形態(tài)和功能特征，大量增生，產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)并合成膠原纖維。 (3)活化的Ito細(xì)胞部分失去脂肪滴，表明脂肪滴的消失并非該細(xì)胞活化的必要條件，或者認(rèn)為脂肪滴的脫落存在著“時(shí)空不同步性”。此外，伴隨著Ito細(xì)胞中脂肪滴的部分脫落，相應(yīng)地，肝細(xì)胞中同時(shí)出現(xiàn)了較大的脂肪滴。這種現(xiàn)象可以推測(cè)肝臟的脂肪變陛也可能與活化的Ito細(xì)胞賦予的“脂肪滴轉(zhuǎn)移”現(xiàn)象有關(guān)。 (4)活化Ito細(xì)胞獲得的收縮特性使得竇周間隙的張