人原發(fā)性肝癌胰島素樣生長因子2基因印跡狀態(tài)的研究.pdf

1、四川大學(xué)碩士學(xué)位論文人原發(fā)性肝癌胰島素樣生長因子2基因印跡狀態(tài)的研究姓名：何文智申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：覃揚(yáng)20040501人原發(fā)性肝瘡胰島素樣生長因子z塞因的印跡狀態(tài)方法收集38例人原發(fā)性肝癌患者外科手術(shù)切除的癌和遠(yuǎn)癌組織標(biāo)本，提取基因組DNA和組織總RNA，利用IGF2基因第九外顯子上含有單核普酸多態(tài)性位點(diǎn)的ApaI酶切位點(diǎn)，采用PCRRFLP方法檢測標(biāo)本雜合子狀態(tài)。對雜合子樣本以flactin為內(nèi)參照

2、，用半定量RTPCR及限制性片段長度多態(tài)性分別分析IGF2每條等位基因mRNA表達(dá)量。分析IGF2基因印跡狀態(tài)的改變類型及其與人原發(fā)性肝癌的關(guān)系。結(jié)果38例人原發(fā)性肝癌有47.1%(1838)為IGF2基因雜合子，可以用于等位基因表達(dá)分析50%(1938)為IGF2基因純合子一例標(biāo)本遠(yuǎn)癌組織為雜合狀態(tài)，癌組織為純合狀態(tài)。在18例雜合子中有10例(55.6%)標(biāo)本癌組織IGF2mRNA呈單等位基因表達(dá)，或者以單等位基因表達(dá)為主，也即這些腫

3、瘤組織重新獲得了印跡(gainofimprintingGOO。與之相對應(yīng)的遠(yuǎn)癌組織有6例(61033.3%)呈單等位基因表達(dá)，也獲得了印跡，經(jīng)病理檢查這等位基因表達(dá):6例均為肝硬化組織，其余4例正常遠(yuǎn)癌組織呈雙另有6例(61833.3%)癌與遠(yuǎn)癌組織IGF2了GF2mRNA均為雙等位基因表達(dá)。有2例(21811.1%)遠(yuǎn)癌組織mRNA呈單等位基因表達(dá)，而癌組織呈雙等位基因表達(dá)。對18例雜合子IGF2基因表達(dá)量的檢測顯示肝癌組織中IGF2