生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)對(duì)肝硬化大鼠缺血再灌注的保護(hù)作用和機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　 研究生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)對(duì)肝硬化大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其可能的機(jī)制。
　　 方法:
　　 將20只大鼠用四氯化碳和食用酒精誘導(dǎo)肝硬化模型。造模成功后，將20只模型大鼠隨機(jī)分為A1和B1組各10只，再將40只普通大鼠隨機(jī)分為A2組、A3組、B2組和B3組各10只。A組為生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)組，其中A1組為肝硬化缺血再灌注組、A2組為肝缺血再灌注組和A3組僅給予生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)；B組為普通飼料組，其中B1為肝硬

2、化缺血再灌注組、B2組為肝缺血再灌注組和B3組僅給予普通飼料組。A組大鼠在術(shù)前7天給予生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)，對(duì)缺血再灌注組大鼠采用Kume法阻斷肝十二指腸韌帶致肝臟缺血30分鐘，松開血管夾恢復(fù)灌注并關(guān)腹。復(fù)灌2小時(shí)后處死各組大鼠，并取血清及肝組織作為檢測(cè)標(biāo)本。一部分肝組織用4％甲醛溶液及時(shí)固定，做石蠟切片，HE染色后光鏡下觀察肝組織的變化；一部分肝組織手工迅速勻漿，-20℃冰箱保存后待用比色法測(cè)定肝細(xì)胞內(nèi)丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD

3、)的含量，血清檢測(cè)谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)，動(dòng)態(tài)濁度法檢測(cè)內(nèi)毒素，酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清TNF-α。
　　 結(jié)果:
　　 (1)肝臟大體變化及HE染色后光鏡下觀察：
　　 B1和B2組在缺血再灌注后肝臟顏色變?yōu)榘导t色，可見大片壞死區(qū)和無灌注區(qū)，且B1組壞死區(qū)和無灌注區(qū)范圍明顯較B2組大；A1和A2組在缺血再灌注后肝臟色澤較均勻，且A1僅有少部分點(diǎn)狀壞死。光鏡下，B2組肝血竇中央靜脈有不同程度的淤血，肝小

4、葉結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞水腫明顯，濁腫變性，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)明顯，并有散在的肝細(xì)胞片狀壞死灶，B1組肝小葉結(jié)構(gòu)消失或破壞，有假小葉形成，中央靜脈缺如，大片肝細(xì)胞壞死，結(jié)構(gòu)不規(guī)則；A2組肝細(xì)胞損傷較輕，偶見單個(gè)壞死細(xì)胞，A1組仍有假小葉形成，有散在點(diǎn)狀壞死灶。
　　 (2)血清ALT、TNF-α、內(nèi)毒素和肝組織MDA、SOD檢測(cè)：
　　 血清ALT-T、TNF-α、內(nèi)毒素檢測(cè)提示：A1組低于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A

5、2組低于B2組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A2組低于A1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A3組低于A1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B2組低于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B3組低于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A3組與B3組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而肝組織MDA檢測(cè)提示：A1組低于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A2組低于B2組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A2組低于A1組(P<0.05)，

6、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A3組低于A1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B2組低于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B3組低于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。肝組織SOD檢測(cè)提示：A1組高于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A2組高于B2組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A2組高于A1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；A3組高于A1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B2組高于B1組(P<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；B3組高于B1組(P

7、<0.05)，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)論:
　　 (1)肝臟缺血后再灌注加重肝臟的損傷，表現(xiàn)為肝細(xì)胞腫脹、肝瘀血、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)以及肝細(xì)胞壞死，尤其是本來就是病變的肝組織。早期運(yùn)用生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)有助于減輕這種損害。
　　 (2)肝臟缺血再灌注損傷后，肝功能出現(xiàn)損害，表現(xiàn)為ALT水平增高，病變肝組織損害更重。早期運(yùn)用生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)有助于減輕肝功能損害。
　　 (3)生態(tài)免疫營(yíng)養(yǎng)能通過減少TNF-α的表達(dá)，減輕細(xì)胞