環(huán)氧化酶-2、CD44V6和MMP-9在大腸癌的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：檢測環(huán)氧化酶-2（COX-2）、CD44V6和MMP-9在大腸癌組織中表達(dá)情況，以便進(jìn)一步探討其表達(dá)與腫瘤細(xì)胞侵襲性的關(guān)系及在大腸癌發(fā)生發(fā)展中的作用，為大腸癌的治療提供新的思路。
　　 方法：收集河北大學(xué)附屬醫(yī)院病理科2006年3月-2007年10月手術(shù)治療的68例大腸癌病人（其中男性35例、女性33例）的病理標(biāo)本，年齡41-72歲，平均年齡54.12歲。其中結(jié)腸癌31例，直腸癌37例。另取癌周遠(yuǎn)端腸壁組織15例作為對照。

2、按WHO（2000）消化道腫瘤的病理及分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行組織學(xué)分級(jí)及大腸癌Duke's分期。本研究68例大腸癌中，高分化腺癌（Ⅰ級(jí)）18例（26.5％），中分化腺癌（Ⅱ級(jí)）31例（45.6％），低分化及粘液腺癌（Ⅲ級(jí)）19例（27.9％）。Duke's分期A期18例、B期22例、C期19例、D期9例。有腸系膜淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移19例（27.9％），有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移9例（13.2％）。全部標(biāo)本遠(yuǎn)端均未見癌浸潤。HE染色，鏡檢明確診斷，均為腺癌。采用免疫組化技

3、術(shù)檢測15例對照組腸組織、68例大腸癌組織中COX-2及CD44V6、 MMP-9的表達(dá)情況。
　　 免疫組化結(jié)果判定，所有的切片均在光學(xué)顯微鏡下盲法評分。隨機(jī)選擇5個(gè)高倍鏡視野（x400）進(jìn)行判斷， COX-2、MMP-9陽性細(xì)胞以胞漿著色為主，陽性信號(hào)為細(xì)胞漿呈棕黃色著色。而CD44V6陽性細(xì)胞以胞膜及少量胞漿呈棕黃色著色為主。以腫瘤細(xì)胞陽性百分?jǐn)?shù)及染色強(qiáng)度進(jìn)行腫瘤細(xì)胞陽性計(jì)分，2個(gè)分值相加即為該標(biāo)本的免疫組化陽性計(jì)分。染色

4、強(qiáng)度評分：0分為無色；1分為細(xì)胞染色呈淺黃色（輕度）；2分為細(xì)胞染色呈黃色（中度）；3分為細(xì)胞染色呈棕褐色（重度）。陽性細(xì)胞比例評分：無陽性細(xì)胞表達(dá)為0；陽性細(xì)胞比例1％-25％為1分；陽性細(xì)胞比例26％-50％為2分；陽性細(xì)胞比例51％-75％為3分；陽性細(xì)胞比例76％－100％為4分。每例細(xì)胞染色積分按上述二者評分之和分為：陰性表達(dá)或無表達(dá)（－），0－1分；弱陽性（+），2－3分；陽性（++），4－5分；強(qiáng)陽性（+++），6－7分。

5、積分>=2分，為陽性。
　　 統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS12.0軟件包。對免疫組化結(jié)果采用卡方檢驗(yàn)和單因素方差分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.COX-2在大腸癌及癌旁遠(yuǎn)端正常腸壁組織中的表達(dá)
　　 COX-2主要表達(dá)于大腸癌細(xì)胞的胞漿，68例大腸癌組織中COX-2的表達(dá)陽性率為61.8％（42/68），38.2％為陰性（26/68）。15例遠(yuǎn)端腸壁組織中COX-2蛋白表達(dá)均為陰性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大腸癌組織和遠(yuǎn)端正

6、常腸壁組織COX-2的表達(dá)有顯著性差異（P<0.05），COX-2在大腸癌組織高表達(dá)。
　　 2.CD44V6在大腸癌及癌旁遠(yuǎn)端正常腸壁組織中的表達(dá)
　　 CD44V6陽性表達(dá)的大腸癌細(xì)胞胞膜呈棕黃色均勻著色，陽性腫瘤細(xì)胞散在分布。68例大腸癌組織中CD44V6表達(dá)的總陽性率為73.5％（50/68），CD44V6在15例遠(yuǎn)端正常腸壁組織表達(dá)為陰性，二者比較有顯著性差異（P<0.05）；CD44V6在大腸癌組織中高表達(dá)。

7、
　　 3.MMP-9在大腸癌及癌旁遠(yuǎn)端正常腸壁組織中的表達(dá)
　　 MMP-9陽性染色主要表達(dá)于腫瘤細(xì)胞胞漿，呈棕黃色彌漫分布，著色較強(qiáng)的位于腫瘤細(xì)胞浸潤區(qū)域。MMP-9在大腸癌組織中陽性率為72.1％（49/68），在15例遠(yuǎn)端正常腸壁組織中未見明顯染色；兩者比較有顯著性差異（P<0.05），MMP-9在大腸癌組織中表達(dá)明顯高于遠(yuǎn)端正常腸壁組織。
　　 4.COX-2與CD44V6和MMP-9在大腸癌中表達(dá)的關(guān)

8、系
　　 COX-2表達(dá)陽性組，CD44V6陽性表達(dá)率為68.57％明顯高于COX-2表達(dá)陰性組的38.09％（P<0.05）。經(jīng)檢驗(yàn)，COX-2與CD44V6蛋白在大腸癌的表達(dá)呈正相關(guān)性（P=0.000）。COX-2表達(dá)陽性組，MMP-9陽性表達(dá)率為88.57％，明顯高于COX-2表達(dá)陰性組的38.09％（P<0.05）。經(jīng)檢驗(yàn)COX-2與MMP-9蛋白表達(dá)有正相關(guān)性（P=0.000）。
　　 5.COX-2、CD44

9、V6和MMP-9的高表達(dá)與大腸癌臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系
　　 實(shí)驗(yàn)顯示COX-2、CD44V6和MMP-9在癌組織中高表達(dá)與大腸癌患者性別、年齡及部位沒有關(guān)系（P>0.05）。但隨著Dukes'分期增高、漿膜浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，COX-2、CD44V6和MMP-9表達(dá)陽性率顯著增高。COX-2的高表達(dá)和大腸癌的病理分化有關(guān)。高、中分化組表達(dá)率與低分化組（Ⅲ）COX-2陽性表達(dá)率84.2％比較，均有顯著差異（X2=8.045，P=

10、0.018），低分化組明顯高于高、中分化組；不同病理分化程度的大腸癌中CD44V6的陽性表達(dá)率隨分化程度的降低而增高，但三者（高、中、低分化）間的陽性表達(dá)率均無顯著性差異（P>0.05），CD44V6表達(dá)與大腸癌的病理分化程度無關(guān)。MMP-9在大腸癌中的表達(dá)隨著病理分化程度的降低而增強(qiáng)，低分化組陽性表達(dá)率100％明顯高于高分化組44.4％、中分化組70.9％；且三者比較均有顯著性差異，（X2=14.203，P=0.001）。
　　

11、 結(jié)論：
　　 1、正常大腸組織COX-2及CD44V6和MMP-9均呈陰性表達(dá)。
　　 2、COX-2蛋白在大腸癌過度表達(dá)，并與病理分級(jí)密切相關(guān)，低分化大腸癌COX-2表達(dá)明顯高于高、中分化的腫瘤。
　　 3、大腸癌CD44V6和MMP-9的表達(dá)均明顯增加，且隨腫瘤級(jí)別的增高而增高。這兩種蛋白在大腸癌的表達(dá)與COX-2的表達(dá)呈正相關(guān)性。
　　 4、COX-2及CD44V6和MMP-9在大腸癌形成、演化