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文檔簡介
1、目的:檢測有效氯68ppm、pH6.5、氧化還原電位825mV的Medilox離子水對微生物的殺菌效果及對HBsAg的滅活作用,進(jìn)行對胃鏡現(xiàn)場消毒試驗,為其臨床應(yīng)用提供依據(jù)。
方法:配制107cfu/ml濃度的耐甲氧西林金葡菌、鮑曼不動桿菌、肺炎鏈球菌、枯草桿菌黑色變種芽孢菌懸液。用金黃色葡萄球菌進(jìn)行中和劑鑒定試驗,試驗設(shè)平行6組,(1)第1組:吸取1.0ml試驗菌懸液于試管內(nèi),置20℃±1℃水浴中5min后,再吸加4.0
2、ml消毒劑于試管內(nèi),混勻。作用至預(yù)定時間,吸取此樣液0.5ml加于含有4.5ml稀釋液的試管中,混勻。吸取該樣液1.0ml,接種于平皿中,做活菌培養(yǎng)計數(shù)。(2)第2組:吸取1.0ml試驗菌懸液于試管內(nèi),置20℃±1℃水浴中5min后,再吸加4.0ml消毒劑于試管內(nèi),振蕩混勻。作用至預(yù)定時間,吸取此樣液0.5ml加于含4.5ml中和劑溶液管中,混勻,作用10min。吸取該樣液1.0ml,接種于平皿中,做活菌培養(yǎng)計數(shù)。(3)第3組:吸取0.
3、5ml試驗菌懸液于試管內(nèi),置20℃±1℃水浴中5min后,加入4.5ml中和劑,作用10min。吸取樣液1.0ml,分別接種于平皿中,做活菌培養(yǎng)計數(shù)。(4)第4組:吸取0.1ml試驗菌懸液于試管內(nèi),置20℃±1℃水浴中5min后,加入4.9ml中和產(chǎn)物溶液(以0.4ml消毒劑加4.5ml中和劑,作用10min配制而成)于試管內(nèi),作用10min。吸取該樣液1.0ml,分別接種于平皿中,做活菌培養(yǎng)計數(shù)。(5)第5組:吸取0.5ml試驗菌懸液
4、于試管內(nèi),置20℃±1℃水浴中5min后,加入4.5ml稀釋液,作用10min,吸取該樣液1.0ml,分別接種于平皿中,做活菌培養(yǎng)計數(shù)。(6)第6組:分別吸取稀釋液、中和劑各1.0ml于同一無菌平皿內(nèi),倒入上述試驗同批次的培養(yǎng)基25ml,培養(yǎng)觀察。根據(jù)結(jié)果判斷所選中和劑及其濃度是否合適。菌懸液殺菌試驗:將0.5 ml菌懸液與4.5ml中性離子水混勻,充分振蕩,作用至預(yù)定時間;吸取0.5 ml上述混合液加入含4.5ml中和劑的試管中,振敲
5、混勻,中和作用10 min;取該液1.0 ml接種培養(yǎng),作活菌計數(shù),計算平均殺滅率,試驗重復(fù)3次。采用懸液定量試驗法進(jìn)行乙肝表面抗原滅活實驗,向1.0mlMedilox離子水中加20μg HbsAg,混勻,作用到預(yù)定時間,加入1.0ml中和劑,中和作用10 min,用ELISA法(試劑靈敏度為1.0ng/ml)檢測HBsAg抗原性;同時按照上述試驗設(shè)計各對照組。試驗重復(fù)3次。結(jié)果以S/N的值<2.1為陰性,表示抗原性破壞合格。對胃鏡消毒
6、效果的檢測:分別用浸有PBS、中和劑的無菌棉拭子對消毒前、后胃鏡表面涂抹采樣;從活檢孔注入滅菌蒸餾水10ml,取灌洗液1ml分別加入對照管及含中和劑PBS管中,立即振打80次,采用傾注法以無菌操作取樣液1ml接種平皿,溫箱培養(yǎng)24h,計數(shù)菌落,計算殺菌率。物體表面和工作人員手的現(xiàn)場消毒試驗,按《消毒技術(shù)規(guī)范》(2002年版)的方法進(jìn)行。
結(jié)果:Medilox離子水對耐甲氧西林金葡菌、鮑曼不動桿菌、肺炎鏈球菌菌懸液,作用1m
7、in,殺滅率均達(dá)100.00%;Medilox離子水對枯草桿菌芽胞作用10min殺滅率達(dá)100.00%;在室溫條件下,用Medilox中性離子水原液作用1min實驗組的S/N值<2.1,2倍稀釋的Medilox中性離子水作用5 min、10 min時,S/N值<2.1,4倍稀釋的離子水作用10 min時仍不能滅活;消毒前從胃鏡檢出的細(xì)菌主要有甲型鏈球菌、奈瑟菌、腸桿菌、綠膿桿菌等條件致病菌。按常規(guī)方法清洗后,用Medilox中性離子水分
8、別作用1 min時即可殺滅細(xì)菌;經(jīng)3次重復(fù)實驗,菌懸液不含小牛血清時,消毒劑作用1min,對金黃色葡萄球菌的殺滅率均達(dá)100.00%;當(dāng)菌懸液分別含25%、50%小牛血清時,該消毒劑作用15分鐘時,殺滅率分別為100.00%和99.98%;一般物體表面的現(xiàn)場消毒試驗結(jié)果:消毒后細(xì)菌數(shù)均少于8 cfu/c㎡,殺滅對數(shù)>1,陰性對照組樣本經(jīng)培養(yǎng)均無菌生長。物體表面消毒后符合衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn),也符合消毒標(biāo)準(zhǔn);醫(yī)務(wù)人員手消毒現(xiàn)場試驗結(jié)果:對30人次現(xiàn)
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