去甲基化酶FBXL10通過抑制FOXC1促進乳腺癌增殖.pdf

1、組蛋白去甲基化酶FBXL10(F-box and leucine.rich repeat protein10)是最大的組蛋白去甲基化酶亞家族JmjC蛋白家族的成員之一,編碼它的基因定位于12q24.31,具有特異性的H3K4me3和H3K36me2／1去甲基化酶活性。FBXL10又名JHDM1B(Jmjcdomian—containing histone demethylase1B)、KDM2B(lysine(K)-specific d

2、emethylase2B)、Ndy-1(Not deadyet-1),FBXL10蛋白具有JmjC去甲基化酶活性結(jié)構(gòu)域,CXXC DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域,PHD植物同源結(jié)構(gòu)域,proline-rich脯氨酸富集結(jié)構(gòu)域,F-box結(jié)構(gòu)域和leucine-rich repeat結(jié)構(gòu)域。關(guān)于FBXL10在癌癥方面的功能研究頗有爭議,根據(jù)細胞背景的不同,可分為抑癌和致癌兩方面,已有報道FBXL10在人類淋巴瘤和乳腺癌中有高表達。
　　 轉(zhuǎn)錄因

3、子FOxC1是Forkhead box(Fox)家族中的亞家族FOxC的成員之一,FOXC1蛋白含有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)區(qū)、DNA結(jié)合區(qū)和一些其他的結(jié)構(gòu)。我們的實驗發(fā)現(xiàn)FBXL10與FOXC1在兩種轉(zhuǎn)移能力不同的乳腺癌細胞系MCF-7和MDA—MB-231中的表達水平呈現(xiàn)明顯負相關(guān),進一步分別過表達和干涉實驗證實FBXL10能夠調(diào)控FOXC1基因的轉(zhuǎn)錄。本實驗室此前的研究表明,FOXC1在乳腺癌細胞系中的外源表達能夠抑制乳腺癌細胞的增殖,PcG家族

4、蛋白EZH2能夠通過影響FOXC1基因啟動子處組蛋白乙酰化和H3K27的三甲基化來抑制FOXC1,而組蛋白去甲基化酶FBXL10在乳腺癌中的功能以及此功能的實現(xiàn)是否與FOXC1有關(guān)仍未見報道。
　　 本論文旨在研究組蛋白去甲基化酶FBXL10對乳腺癌細胞增殖的影響及其功能的實現(xiàn)是否通過FOXC1起作用。MTT結(jié)果顯示,外源過表達去甲基化酶FBXL10能明顯促進乳腺癌細胞MCF7的增殖。熒光素酶報告基因、反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR