感覺神經(jīng)肽對缺血對缺血后處理保護(hù)作用的影響及機(jī)制研究.pdf

1、研究背景：
　　隨著心臟體外循環(huán)、冠狀動脈搭橋術(shù)、經(jīng)皮冠狀動脈介入治療等技術(shù)的推廣應(yīng)用，心肌缺血一一再灌注損傷(I/R)已成為臨床麻醉面臨的一種常見的病理生理變化，其成為阻礙心臟血管外科手術(shù)療效的主要難題。2003年缺血后處理(lschemiapostconditioning，IpostC)概念的提出，使得IpostC對缺血一再灌注損傷保護(hù)作用及相關(guān)機(jī)制的研究成為近年研究熱點。降鈣素基因相關(guān)肽(calcitoningene-rel

2、atedpeptide，CGRP)和P物質(zhì)(substanceP，SP)是支配心臟的感覺神經(jīng)纖維中共存的兩種重要的神經(jīng)肽，參與調(diào)節(jié)機(jī)體多種生命活動。大量研究提示SP和CGRP參與心臟功能的調(diào)節(jié)，但對二者在缺血后處理中的作用缺乏系統(tǒng)研究，詳細(xì)作用機(jī)制還不是十分清楚。心臟感覺神經(jīng)及其主要遞質(zhì)SP和CGRP是否參與缺血后處理的保護(hù)作用？其作用機(jī)制又是如何？本實驗擬對此進(jìn)行研究。
　　研究目的：
　　1．確定成年大鼠在體心臟急性心肌

3、缺血后即刻給予缺血后處理能否促進(jìn)感覺神經(jīng)肽CGRP和SP的表達(dá)和釋放；
　　2．評價內(nèi)源性CGRP和SP是否參與缺血后處理的保護(hù)作用，即其對再灌后心肌梗死面積，再灌后心臟血流動力學(xué)，室性心律失常的影響及其可能的作用機(jī)制。
　　研究內(nèi)容及方法：采用體重為350-380g的健康雄性SD大鼠，建立急性心肌缺血再灌注模型和缺血后處理模型，實驗共分為四個部分
　　第一部分利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzymelinkedimmuno

4、sorbentassay，ELISA)，對大鼠心臟缺血再灌注及缺血后處理再灌后不同時點(15min，2.5H)缺血心肌組織和血清中CGRP和SP表達(dá)進(jìn)行檢測，分析缺血再灌注及缺血后處理心肌組織和血清中SP、CGRP表達(dá)的變化；
　　第二部分在大鼠心臟缺血再灌注前分別給予CGRP受體拮抗劑CGRP8_37(10-6，10-7mol.L-l)，SP受體拮抗劑RP67580（l0-5，10-6mol.L-l）及聯(lián)合應(yīng)用CGRP8_37(

5、10-6mol.L.l)和RP67580（10-6mol.L-l），觀察內(nèi)源性CGRP和SP對缺血后處理再灌后心肌梗死面積的影響；
　　第三部分在大鼠心臟缺血再灌注前分別給予CGRP受體拮抗劑CGRP8_37(10-6，10-7mol.L-l)，SP受體拮抗劑RP67580（10-5，10-6mol.L-l）及聯(lián)合應(yīng)用CGRP8_37（10-6mol.L-l）和RP67580（10-6mol.L-l），觀察內(nèi)源性CGRP和SP對大

6、鼠心臟缺血后處理再灌注血流動力學(xué)的影響；
　　第四部分在大鼠心臟缺血再灌注前分別給予CGRP受體拮抗劑CGRP8_37(10-6，10-7mol.L.l)，SP受體拮抗劑RP67580(10-5，10-6mol.L.l)及聯(lián)合應(yīng)用CGRP8_37(10-6mol.L.l)和RP67580(10-6mol.L.l)，觀察心肌缺血后處理對心肌缺血再灌注誘發(fā)室性心律失常的影響及內(nèi)源性CGRP和SP在其中的作用。
　　研究結(jié)果：

7、r>　　1．心肌缺血再灌注以及缺血后處理心肌組織和血清中SP和CGRP濃度的變化。
　　與I/R組相比，IpostC組可以使再灌后(15min，2.5H)心肌組織和血清中CGRP和SP的表達(dá)上調(diào)。
　　2．內(nèi)源性CGRP和SP對大鼠心臟缺血后處理再灌后心肌梗死面積的影響。
　　實驗各組缺血危險區(qū)面積百分比AAR/LV％無差異。與I/R組相比，IpostC組可以顯著降低再灌后心肌梗死區(qū)面積百分比IS/AAR%；與Ipos

8、tC組相比，給予CGRP8_37，RP67580以及聯(lián)合應(yīng)用二者都可以明顯增加梗死區(qū)面積百分比IS/AAR%。
　　3．內(nèi)源性CGRP和SP對大鼠心臟缺血后處理再灌注后血流動力學(xué)的影響。
　　與I/R組相比，IpostC組可以顯著降低再灌后SAP和DAP，降低再灌后PAP，增加再灌后HR;與IpostC組相比，給予CGRP8_37可以增加再灌后SAP和DAP，降低PAP，同時可以降低HR;給予RP67580可以顯著增加再灌后

9、SAP和DAP，降低PAP，降低HR;二者聯(lián)合應(yīng)用可以顯著增加再灌后SAP和DAP，降低HR。
　　4．心肌缺血后處理對心肌缺血再灌注誘發(fā)室性心律失常的影響及內(nèi)源性CGRP和SP在其中的作用。
　　與I/R組相比，IpostC組可以顯著降低再灌注后室性心律失常發(fā)生，峰值降低，時限延后；與IpostC組相比，不同濃度的CGRP8_37，RP67580以及聯(lián)合應(yīng)用二者均可以增加再灌注后室性心律失常的發(fā)生，出現(xiàn)峰值增高，時限提前。