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文檔簡介
1、改良稻米的蒸煮食用品質(zhì)已成為近年來我國水稻研究的熱點和重點,稻米的蒸煮食用品質(zhì)主要由直鏈淀粉含量(AC)決定。為了提高直鏈淀粉含量,目前主要通過兩種途徑:第一,誘導(dǎo)淀粉合成相關(guān)基因突變,從中選擇高直鏈淀粉含量的突變體;第二,利用轉(zhuǎn)基因的方法人工調(diào)控淀粉合成相關(guān)基因的表達,從而改變稻米淀粉的結(jié)構(gòu)和組成,最終培育符合生產(chǎn)需求的水稻新品種。為了改良并提高現(xiàn)有水稻品種的直鏈淀粉含量,我們主要進行了以下幾方面的研究,主要研究結(jié)果如下:
2、1.本研究分別測定了5個不同AC品種稻米籽粒淀粉的理化性質(zhì),結(jié)果表明它們籽粒淀粉顆粒特征和糊化溫度都不相同。接下來我們對它們發(fā)育種子(開花后3、5、7天)的10個淀粉合成關(guān)鍵基因進行了Q-PCR檢測,結(jié)果表明,Wx、RBE1和RBE3在水稻發(fā)育中的種子中表達豐富且在不同品種間差異較大,其中Wx基因在發(fā)育中胚乳的表達豐度與AC值的大小呈正相關(guān)。
2.本實驗室從通過Tilling篩選和基因測序一批經(jīng)EMS誘變后的中花11的突變體群
3、體,鑒定出一個在BEⅡa(RBE4)基因的第四個外顯子上有一個G到A的單堿基突變的純和突變體,這個堿基的改變導(dǎo)致此處的氨基酸由絲氨酸(S)變?yōu)榱颂於0?N)。對BEⅡa基因進行蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)域分析發(fā)現(xiàn),該突變位點位于蛋白質(zhì)的非保守區(qū)域中,接下來通過對中花11和突變體的BEⅡa基因做定量表達分析,結(jié)果也表明該基因表達量在二者之間并無明顯差異。對該突變體稻米淀粉的理化性質(zhì)檢測結(jié)果表明,該突變體的AC與野生型相比有一定程度增加,平均增加比例為4
4、.97%,且突變體的糊化溫度類型也由原來野生型中等(70~74℃)變?yōu)榈偷?≤70℃)。對它們的淀粉顆粒進行電鏡掃描觀察發(fā)現(xiàn)突變體的淀粉顆粒與野生型相比變大且輪廓不明顯,此外它們的大小、形態(tài)相同且無規(guī)律,但排列較為緊湊。
3.根據(jù)查閱的文獻資料以及我們前期的實驗結(jié)果,我們發(fā)現(xiàn)Wx、RBE1和RBE3這三個基因?qū)λ咀蚜5闹辨湹矸酆坑绊戄^大。我們利用RT-PCR的方法,從秈稻品種IR36的未成熟種子中克隆到完整的水稻W(wǎng)x基因的
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