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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:舌鱗狀細(xì)胞癌(舌鱗癌)是常見的口腔癌之一,經(jīng)綜合序列治療后其5年生存率僅在60%左右。為提高晚期及復(fù)發(fā)舌癌患者的預(yù)后,目前在尋找新的治療模式——生物治療。其中,特異性分子靶點(diǎn)為研究的熱點(diǎn)。Aurora-A是一種關(guān)鍵的有絲分裂酶,與中心體功能密切相關(guān)。Aurora-A在在舌鱗癌中過(guò)表達(dá),而且在舌鱗癌的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。Aurora-A抑制劑VX-680在舌鱗癌細(xì)胞系中的抑瘤作用明顯,但在體內(nèi)研究方面罕見報(bào)道。
目的
2、:本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)舌鱗癌移植瘤模型研究Aurora-A激酶抑制劑VX-680對(duì)舌鱗癌細(xì)胞SCC-25的作用,探討Aurora-A在舌鱗癌發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制、Aurora-A激酶抑制劑VX-680抗舌鱗癌作用機(jī)制及Aurora-A作為舌鱗狀細(xì)胞癌生物治療靶點(diǎn)的可行性。
方法:體外培養(yǎng)舌鱗狀細(xì)胞癌SCC-25細(xì)胞株,傳代。每只BALB/C裸小鼠頭頸背部皮下接種0.75×107個(gè)細(xì)胞,建立移植瘤模型,共34只。待移植瘤體體積增大
3、至150-200mm3,隨機(jī)分為3組,為VX-680處理組(A組)、二甲基亞砜(DMSO)對(duì)照組(B組)和生理鹽水(NS)對(duì)照組(C組),分別是12只、11只和11只。A組按75mg/kg標(biāo)準(zhǔn)在裸小鼠移植瘤瘤體內(nèi)注射VX-680,B組和C組則瘤體內(nèi)注射等容積的DMSO和NS,連續(xù)2周,每天2次給藥。處理結(jié)束后1周,頸椎脫臼法處死全部動(dòng)物,收集腫瘤標(biāo)本。計(jì)算腫瘤的體積、重量,繪制腫瘤生長(zhǎng)曲線,計(jì)算抑瘤率;動(dòng)物瘤體大小進(jìn)行單因素方差分析;免
4、疫組織化學(xué)、Western-blot方法檢測(cè)各組中Auorora-A的表達(dá)差異;Tunel法檢測(cè)各組腫瘤細(xì)胞的凋亡水平。所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)最后用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件分析。
結(jié)果:⑴SCC-25細(xì)胞懸液接種成瘤率為100%。單因素方差分析結(jié)果表明A、B、C三組的體積的均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差分別為(895.76±335.61)mm3、(1599.48±899.12)mm3、(2097.24±680.85)mm3,A組瘤體體積與B或C組的差
5、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P均<0.01。A組的抑瘤率為88.07%(相對(duì)于B組)和88.44%(相對(duì)于C組)。⑵Aurora-A在A組的表達(dá)陽(yáng)性率為25%,明顯低于B組的72.73%和C組的81.82%,總體表達(dá)陽(yáng)性率為58.82%。x2檢驗(yàn)結(jié)果表明A組與B、C兩組的陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P=0.011。⑶免疫組織化學(xué)和Western-blot的檢測(cè)結(jié)果顯示A組中Aurora-A的表達(dá)強(qiáng)度明顯低于B組和C組。⑷Tunel法檢測(cè)三組的腫瘤細(xì)胞凋
6、亡水平結(jié)果顯示,A、B、C三組中腫瘤細(xì)胞的凋亡指數(shù)的均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差分別為為7.02±1.76,2.79±0.68、2.53±0.49。經(jīng)方差分析,A組與B、C兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P均<0.05。⑸三組腫瘤組織瘤體體積與凋亡指數(shù)的Spearman相關(guān)性分析得出,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.001,γ=-0.660。
結(jié)論:①Aurora-A在舌鱗癌的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。②Aurora-A激酶抑制劑VX-680促進(jìn)舌鱗癌移植瘤
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