中國(guó)馬鈴薯青枯菌致病力和遺傳多樣性研究.pdf

1、中國(guó)是最大的馬鈴薯種植國(guó)，隨著馬鈴薯主糧化戰(zhàn)略的實(shí)施，我國(guó)對(duì)馬鈴薯產(chǎn)量和品質(zhì)的要求越來(lái)越高。由于全球氣候變暖，馬鈴薯青枯病在世界范圍內(nèi)爆發(fā)的頻率越來(lái)越高，流行的區(qū)域越來(lái)越廣。而我國(guó)對(duì)馬鈴薯青枯病的調(diào)查與檢測(cè)還比較薄弱，因此對(duì)我國(guó)馬鈴薯青枯病進(jìn)行系統(tǒng)性的調(diào)查與鑒定是很有必要的。
　　本研究系統(tǒng)性收集了四個(gè)馬鈴薯栽培區(qū)21個(gè)?。ㄊ校?0多個(gè)地點(diǎn)的疑似馬鈴薯青枯病自然病樣。然后用稀釋劃線法和特異性引物759/760對(duì)青枯菌進(jìn)行了分離鑒定

2、，結(jié)果在四個(gè)馬鈴薯栽培區(qū)的11個(gè)?。ㄊ校?4個(gè)地點(diǎn)分離到了123個(gè)青枯菌，甚至在內(nèi)蒙古牙克石也分離到了青枯菌。這說(shuō)明我國(guó)馬鈴薯青枯病比較嚴(yán)重，中原二作區(qū)和西南單、雙季混作區(qū)尤甚，并且北遷趨勢(shì)嚴(yán)峻。
　　然后通過(guò)生化變種和演化型分類框架對(duì)123個(gè)菌株進(jìn)行了分類鑒定。結(jié)果91％的菌株屬于生理小種3生化變種2(Race3 Biovar2，R3Bv2)，演化型ⅡB序列變種1(PhylotypeⅡB Sequevar1，ⅡB/1)，并且該類

3、菌株廣泛分布于四個(gè)馬鈴薯栽培區(qū)。說(shuō)明危害我國(guó)馬鈴薯的青枯菌主要是R3Bv2類菌株。而其它菌株則屬于生化變種3演化型Ⅰ序列變種13，14M，16，17或者18。其中，序列變種16在我國(guó)是首次在馬鈴薯中分離得到，14M是一個(gè)新的序列變種。因?yàn)樗谙到y(tǒng)發(fā)育樹(shù)中與序列變種14的參考菌株P(guān)ss81和Zo4遺傳距離最近，所以命名為14M。
　　對(duì)不同地點(diǎn)的R3Bv2類菌株進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析能夠推測(cè)其大概的傳播過(guò)程。本研究用多位點(diǎn)序列分析(Mul

4、tilocus Sequence Analysis，MLSA)構(gòu)建了37個(gè)代表性的R3Bv2類菌株的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)。結(jié)果分為兩個(gè)群體，群體一包括來(lái)自四個(gè)馬鈴薯栽培區(qū)的34個(gè)菌株，群體二只包括中原二作區(qū)的3個(gè)菌株。據(jù)此推測(cè)大部分的R3Bv2類菌株可能沿一條主線傳入我國(guó)，最終傳播至四個(gè)馬鈴薯栽培區(qū)，而中原二作區(qū)可能還存在其它的傳入途徑。
　　為了研究R3Bv2類菌株對(duì)馬鈴薯致病力的差異，本研究首先選擇了34個(gè)代表性菌株在低溫20℃條件下接

5、種了3個(gè)馬鈴薯材料C9、W5337.4X和CT7-6，調(diào)查分析其致病力。結(jié)果只有R3Bv2類菌株在低溫條件下有較強(qiáng)或者中等致病力，而其它類型的菌株都沒(méi)有或者只有很弱的致病力，從而證明R3Bv2類菌株具有低溫適應(yīng)性的特點(diǎn)。但是不同的R3Bv2類菌株在低溫條件下的致病力也存在顯著性差異。為了進(jìn)一步的探究溫度對(duì)致病力的影響，本研究選擇了低溫致病力不同的代表性菌株9個(gè)，調(diào)查其在28℃和20℃的致病力。結(jié)果溫度對(duì)青枯菌致病力存在極顯著性影響，但是

6、不同菌株的致病力受溫度影響的程度也存在極顯著性差異。對(duì)發(fā)病過(guò)程進(jìn)一步的分析，結(jié)果表明溫度主要延長(zhǎng)了病原菌與植物的互作過(guò)程，說(shuō)明可能存在某些與溫度有關(guān)的致病因子。所以下一步可以用受溫度影響程度不同的菌株進(jìn)一步探究受溫度調(diào)控的致病因子。
　　總之，本研究對(duì)馬鈴薯青枯病進(jìn)行了系統(tǒng)性采樣調(diào)查，并對(duì)其病原菌進(jìn)行了分離鑒定。據(jù)此推測(cè)出危害我國(guó)馬鈴薯的主要菌株為R3Bv2類，并對(duì)該類菌株的致病力和遺傳多樣性進(jìn)行了研究和總結(jié)。這對(duì)馬鈴薯青枯病的防