河北和內(nèi)蒙古馬鈴薯黑痣病菌遺傳多樣性研究.pdf

1、馬鈴薯黑痣病為土傳真菌性病害,在世界各大馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生,目前已成為影響馬鈴薯產(chǎn)量和質(zhì)量的重要因素之一。本試驗(yàn)對(duì)采自河北內(nèi)蒙古兩省17縣的馬鈴薯黑痣病菌進(jìn)行了融合群鑒定和遺傳多樣性分析,同時(shí)測(cè)定了病原菌對(duì)多種藥劑的敏感性。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.自內(nèi)蒙古和河北兩省馬鈴薯黑痣病病樣分離獲取190株立枯絲核菌菌株。融合群測(cè)定結(jié)果表明,這些菌株分屬于9類融合群:AG1-IB、AG2-1、AG3、AG4HG-Ⅰ、AG4 HG-

2、Ⅱ、AG4 HG-Ⅲ、AG-5、AG9和AG A。其中AG3為主要致病群,占總菌株的77.37％:其次是AG2-1和AG4 HG-Ⅱ,分別占總菌株的7.37%和6.84%。
　　 2.通過(guò)ITS序列對(duì)馬鈴薯黑痣病不同融合群代表菌株的親緣關(guān)系進(jìn)行了分析,并結(jié)合菌絲融合反應(yīng)確定了四株分屬于不同融合群的標(biāo)準(zhǔn)菌株。四株標(biāo)準(zhǔn)菌株為JGY-17、JWC-11、JWC-13和MYK-18,隸屬的融合群為AG2-1、AG4 HG-Ⅰ、AG4HG

3、-Ⅲ和AG A。來(lái)自同一融合群內(nèi)部菌株同來(lái)自不同融合群的菌株相比親緣關(guān)系要近,同樣,同一融合群內(nèi)部亞群間的親緣關(guān)系比融合群間要近。因此ITS可以很好的區(qū)分不同融合群及其亞群,可用于菌株的融合群的鑒定及親緣關(guān)系的分析。
　　 3.通過(guò)菌絲融合反應(yīng)、ITS序列分析結(jié)合藥劑敏感性測(cè)定對(duì)馬鈴薯黑痣病菌AG2-1和AG3兩個(gè)融合群進(jìn)行了遺傳變異研究。AG3菌株間完全融合,而AG2-1菌株間可發(fā)生完全融合反應(yīng)和不完全融合反應(yīng),而據(jù)不完全融合

4、反應(yīng)可將AG2-1劃分為兩組。ITS序列構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)表明AG3形成單一分支,而AG2-1可明顯分為兩個(gè)分支,且與不完全融合反應(yīng)劃分的兩組完全吻合。AG2-1內(nèi)部分化出兩個(gè)亞分支長(zhǎng)度比AG3融合群還要大,表明AG2-1正在經(jīng)歷著明顯的遺傳分化。同時(shí)甲基硫菌靈和惡霉靈的藥劑敏感性測(cè)定也表明AG2-1-1和AG2-1-2之間存在顯著的毒力差異,因此,不完全融合現(xiàn)象可作為融合群不斷分化的參考指標(biāo)。
　　 4.測(cè)定了11種藥劑對(duì)馬鈴薯

5、黑痣病菌AG2-1和AG3的毒力,篩選出了毒力效果好的5種藥劑:咯菌腈、嘧菌酯、噻呋酰胺、甲基立枯磷和異菌脲,平均EC50值分別為0.0079、0.019、0.046、0.11、0.42μg/mL。并且明確了藥劑在不同融合群間的毒力差異。
　　 5.利用3對(duì)多態(tài)性高、穩(wěn)定性好的選擇性擴(kuò)增引物,對(duì)供試的136株馬鈴薯黑痣病菌進(jìn)行了SSR擴(kuò)增,共擴(kuò)增出21條譜帶,多態(tài)性譜帶為100%。遺傳多樣性分析表明馬鈴薯黑痣病群體間遺傳多樣性較