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1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1在腫瘤中的表達(dá)及臨床意義的實(shí)驗(yàn)研究姓名:侯彥強(qiáng)申請學(xué)位級別:博士專業(yè):臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師:仲人前孔憲濤20050401細(xì)胞外基質(zhì)蛋白l在腫瘤中的表達(dá)及臨床意義的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要目的:研究細(xì)胞外基質(zhì)蛋白I(ECMl)在腫瘤中的表達(dá)及臨床意義。方法:采用熒光定量PcR技術(shù)檢測不同乳腺組織中ECMImRNA的表達(dá),免疫組化技術(shù)檢測ECMl蛋白在幾種癌組織中的表達(dá),并構(gòu)建了細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1的真核表達(dá)載
2、體,轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞(MCF7),然后分析轉(zhuǎn)染后細(xì)胞的生物學(xué)功能的變化。結(jié)果:癌組織中ECMl的表達(dá)明顯高于正常組織,轉(zhuǎn)移性癌組織明顯高于未轉(zhuǎn)移性癌組織;轉(zhuǎn)染ECMl后的腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)功能未有明顯變化;BcMl能顯著促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞體外增殖。結(jié)論:ECMI在腫瘤中高表達(dá),并且與腫瘤的轉(zhuǎn)移性相關(guān);在體外,ECMI對腫瘤細(xì)胞的功能未產(chǎn)生明顯的影響,但能顯著促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞體外增殖。關(guān)鍵詞:細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1:腫瘤;乳腺癌;轉(zhuǎn)移;增殖;綠色熒光蛋
3、白;真核表達(dá)載體;MCF7;人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;腫瘤標(biāo)志物ExperimentalstudyOntheexpressionanddinicalsigl曲canceofextracellularmatrixprotein1inUlmorsAbstract0bjective:Tostudytheexpressionandcliniraflsi鯽eanceofextracelhlarmatrixproteinI(ECMl)intllmogsMe
4、thod:Usingmlltimefluorescentqu肋titativep01Ⅺnaasee【lain代地dion“坨僦todetect世屺geneacc時。s婦ofECMlinseveraltypcsbreast畦愛黼immunohistochemicalEn、,isionmethodwasusedtodetectexpressionofECMlindifferenttissuesWehaveconstructedECMlEuk
5、aryoticExpressionVcctorECMlpEGFP小陀andECMlpEGFPN2wasWansfcc伽塒血LipofectamineintoMCF7cellsthenwehaveinvestigatedthebiologicalcharacteristicsofECMltmnsfectedMCF7InaddifioIl’wealsohavedetectedtheerectofECMlontheproliferationo
6、fhumanunbilicalveinendothelialcells(HUVEC)Results:1kresultsshowedthatthee)(n陀s如nofECMl(geneandproteinlevel)inPdmortissueswasbi出erthanlhatinrlolTllaltissuesandthattheexpressionofECMlinmetastatictumorswashigherthanthatinno
7、nmetastatictumorsn囂biologicalcharacteristicsofECMltmnsfectedMCB7cellswerenotsignificantlydifferentwiththoseuntreatedandmocktransfectedMCF7cellsProliferationofHUVECmECMltransfectedgroupwashi曲erthanthoseuntreatedandmockIra
8、nsfeetedgroupConclusion:ECMliSover吒xpressedintumorfissaeswhichisc刪atedwiththemetastasispropertiesofthetumor$,ECMlcansignificantlypromotetheproliferationofH【rVECbutithasnoeffectonMCF7invitrokeywords:舭l(fā)lularmatrixproteinI(
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