脂聯(lián)素對高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜色素上皮細胞的影響.pdf

1、研究背景：糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)是糖尿病(DM)最為常見和最嚴重的微血管并發(fā)癥之一，已成為大多數(shù)發(fā)達國家致盲的首要原因。視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細胞位于視網(wǎng)膜感覺層和脈絡膜之間，構成視網(wǎng)膜外屏障，病理研究表明RPE細胞參與了DR的晚期病理變化，引起了眼內的病理性新生血管形成。脂聯(lián)素(Adiponectin)是最近發(fā)現(xiàn)的一種由脂肪細胞分泌的特異蛋白質，臨床和基礎研究均表明，脂聯(lián)素與DR發(fā)生、發(fā)展

2、有密切關系。本研究通過脂聯(lián)素對RPE細胞分泌的VEGF及PEDF的影響，旨在探討其在DR發(fā)生發(fā)展中的作用，并可能為治療DR提供一條新的途徑。 目的：觀察脂聯(lián)素對高糖環(huán)境下人視網(wǎng)膜色素上皮(hRPE)細胞活性及血管內皮生長因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)分泌的影響，以闡明脂聯(lián)素對糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)可能具有的保護作用。 方法：體外培養(yǎng)人視網(wǎng)膜色素上皮細胞，隨機分為四組：①正常對照組(5.5 mmol/L葡

3、萄糖)，②高糖組(33mmol/L葡萄糖)，③甘露醇組：(5.5mmol/L葡萄糖＋27.5 mmol/L甘露醇)④高糖+脂聯(lián)素組(33mmol/L葡萄糖+2.5μg/ml脂聯(lián)素)，用四甲基偶氮唑藍(MTT)方法檢測不同情況下48h后對hRPE細胞活性的影響。再將hRPE細胞分為三組①正常對照組(5.5 mmol/L葡萄糖)，②高糖組(33 mmol/L葡萄糖)，③高糖+不同濃度的脂聯(lián)素組(33mmol/L葡萄糖+2.5，5，10，20

4、μg/ml脂聯(lián)素)，作用48小時后運用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定hRPE細胞上清液中VEGF及PEDF的含量。 結果：甘露醇組細胞活力與對照組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。高糖組抑制hRPE細胞活性，高糖組細胞活力明顯低于對照組(P＜0.01)；加入脂聯(lián)素干預后，細胞活力比高糖組和對照組顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。與正常對照組相比，高糖組VEGF水平明顯升高，PEDF水平明顯下降，加入2.5μg/

5、ml脂聯(lián)素對于VEGF及PEDF水平影響不大，脂聯(lián)素濃度達到5～20μg/ml時和高糖組相比，VEGF水平顯著降低、PEDF水平顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。 結論：高糖明顯降低hRPE細胞活力，損傷hRPE細胞的功能，高糖可以導致hRPE細胞分泌VEGF增多，分泌PEDF減少，參與DR的發(fā)生發(fā)展；脂聯(lián)素可以促進hRPE增殖，減輕細胞損傷；生理濃度(5～20μg/ml)脂聯(lián)素可糾正高糖誘導的VEGF和PEDF水平的