梁子湖中華沙塘鱧核型、DNA含量及外周血細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、中華沙塘鱧，隸屬鱸形目，鰕虎魚亞目，沙塘鱧科，沙塘鱧屬，是一種小型底棲肉食性魚類。中華沙塘鱧不僅含肉率高，而且肉嫩味美，是江浙一帶備受歡迎的傳統(tǒng)名貴食用魚。2010年“世博第一菜”的美譽更加使得人們對中華沙塘鱧及沙塘鱧屬其他魚類的需求量與日俱增。然而，近年來由于我國自然水域的環(huán)境日益惡化，加上無節(jié)制的捕撈，野生的中華沙塘鱧資源量銳減，其捕撈產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足人們的需求，規(guī)?；斯ゐB(yǎng)殖潛力巨大。為了掌握中華沙塘鱧的細(xì)胞遺傳學(xué)及血液學(xué)特征，同

2、時也為沙塘鱧屬魚類的良種選育以及規(guī)模化養(yǎng)殖等方面的研究提供一些參考資料，本研究采用頭腎-PHA體內(nèi)注射法、流式細(xì)胞儀法及瑞氏-吉姆薩染色法研究了梁子湖中華沙塘鱧的核型、DNA含量和外周血細(xì)胞的顯微結(jié)構(gòu)。研究結(jié)果如下:
　　1.中華沙塘鱧的核型分析
　　本研究以梁子湖中華沙塘鱧為實驗材料，采取PHA-活體注射法制備其染色體標(biāo)本，對中華沙塘鱧的染色體數(shù)目、核型公式、臂數(shù)等特征進(jìn)行了研究。挑選并計數(shù)了128個清晰可見且分散較開的中

3、期分裂相。結(jié)果表明:梁子湖中華沙塘鱧為二倍體魚類。染色體數(shù)目2n=44的體細(xì)胞占總數(shù)的61.72％，因此，可以確定梁子湖中華沙塘鱧的染色體數(shù)目2n=44。未見異型性染色體、隨體或次縊痕等。根據(jù)分析測量結(jié)果，梁予湖中華沙塘鱧的44條染色體最終可以配成22對，其中最大的為第1對，相對長度5.91％;最小的為第22對，相對長度3.33％，而且均為端部著絲粒染色體(T)，核型2n=44T，NF=44。
　　2.中華沙塘鱧核DNA含量研究<

4、br>　　本研究采用外標(biāo)法，并以公雞血細(xì)胞核DNA絕對含量(2.50 pg/2C)為參考標(biāo)準(zhǔn)，用流式細(xì)胞儀檢測了梁子湖中華沙塘鱧的血細(xì)胞核DNA含量。統(tǒng)計結(jié)果顯示，梁子湖中華沙塘鱧血細(xì)胞核DNA絕對含量為（2.38±0.03）pg/2C;基因組大小為1.17×109bp。
　　3.中華沙塘鱧外周血細(xì)胞顯微結(jié)構(gòu)
　　采用血球計數(shù)板、常規(guī)血涂片及瑞氏-吉姆薩染色法對梁子湖中華沙塘鱧外周血細(xì)胞的數(shù)量、形態(tài)和大小進(jìn)行了觀測。最終可鑒

5、別出5種類型的血細(xì)胞，即紅細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、血栓細(xì)胞;此外，本研究還觀察到了少量的幼稚紅細(xì)胞、分裂紅細(xì)胞以及分解紅細(xì)胞。中華沙塘鱧外周血細(xì)胞中紅細(xì)胞占大多數(shù)，其密度為（1.47±0.12）×1012個/L;血紅蛋白含量為（51.61±7.96）g/L。中華沙塘鱧的白細(xì)胞中，血栓細(xì)胞數(shù)量占絕對優(yōu)勢，為58.65％;緊隨其后的是淋巴細(xì)胞（小:12.02％;大:8.80％）以及嗜中性粒細(xì)胞(15.54％);而單核細(xì)胞最少

6、，僅4.99％。在中華沙塘鱧的白細(xì)胞大小上，嗜中性粒細(xì)胞的體積最大，其細(xì)胞大小為（16.62±1.34）μm×（14.27±2.09）μm，細(xì)胞核大小為（11.03±0.98）.μm×(8.61±0.64)μm;血栓細(xì)胞最小，其細(xì)胞大小為（9.26±0.95）μm×（8.48±0.79）μm，細(xì)胞核大小為（8.86±0.92）μm×（7.22±0.77）μm。本研究還分析了中華沙塘鱧的外周血細(xì)胞特征，結(jié)果表明，這些血細(xì)胞特征與其底棲生活