Effe of Progesterone on GABA transporter 1 and glutamate transporter 1 expression in the cerebral cortex of developing rast aft.pdf

1、目的:為了研究發(fā)育期大鼠反復(fù)驚厥后大腦皮質(zhì)區(qū)γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1(γ-aminobutyric acid transport1，GAT-1)及谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體2（glutamate transport1，GLT-1）的表達(dá)變化以及應(yīng)用孕酮(Progesterone)干預(yù)后對兩者的具體影響，以期探索GAT-1與GLT-1在發(fā)育期驚厥性腦損傷發(fā)病過程中的作用以及孕酮發(fā)揮抗驚厥作用的可能機(jī)制。
　　 方法:生后(postnatal，PN)

2、7天的SD大鼠共72只，隨機(jī)分為三組:對照組、驚厥組、孕酮干預(yù)組，每組各24只大鼠，各組再隨機(jī)分為三個部分，分別于最后一次驚厥后(after recurrent seizures，ARS)1d、3d、7d斷頭取腦。其中驚厥組與孕酮干預(yù)組大鼠予以三氟乙醚反復(fù)吸入（連續(xù)6天，每天1次），分別于最后一次驚厥后1d、3d、7d斷頭取腦，分離大腦皮質(zhì)，分別應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色及Western blot方法測定各組大鼠在不同時間點(diǎn)大腦皮質(zhì)GAT-1

3、和GLT-1蛋白及mRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果:（一）免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:①在對照組中，GAT-1在、ARS-3d及ARS-7d三個時間點(diǎn)時免疫組織化學(xué)平均光密度（average optical density，AOD）值表達(dá)無明顯差異;反復(fù)驚厥后大鼠大腦皮質(zhì)GAT-1免疫組化AOD值在各時間點(diǎn)的表達(dá)均較對照組明顯上調(diào)(P＜0.01)，組間差異不顯著;孕酮干預(yù)后大鼠大腦皮質(zhì)GAT-1免疫組化AOD值較驚厥組明顯下調(diào)(P＜0.0

4、1)，組間差異不明顯;②在對照組中GLT-1免疫組化AOD值在ARS-1d、ARS-3d及ARS-7d三個時間點(diǎn)無顯著性差異;反復(fù)驚厥后GLT-1免疫組化AOD值在各時間點(diǎn)均較對照組明顯上調(diào)(P＜0.01）;孕酮干預(yù)后各時間點(diǎn)大鼠大腦皮質(zhì)GLT-1免疫組化AOD值進(jìn)一步上調(diào)，顯著高于驚厥組和對照組(P＜0.01)。
　　 (二)Western blot結(jié)果顯示:①在對照組中，ARS-1d、ARS-3d及ARS-7d大鼠大腦皮質(zhì)內(nèi)

5、GAT-1 mRNA表達(dá)無明顯差異(P＜0.01);反復(fù)驚厥后各組大鼠GAT-1 mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)(P＜0.01）;孕酮干預(yù)后GAT-1 mRNA表達(dá)水平在各時間點(diǎn)較驚厥組顯著下調(diào)(P＜0.01)，組間差異不顯著;②對照組中，ARS-1d、ARS-3d及ARS-7d時，大鼠大腦皮質(zhì)GLT-1 mRNA表達(dá)無顯著性差異;反復(fù)驚厥后各組大腦皮質(zhì)GLT-1 mRNA表達(dá)均較對照組明顯上調(diào)(P＜0.01)，組間差異不顯著;孕酮干預(yù)后各組

6、大鼠大腦皮質(zhì)GLT-1 mRNA表達(dá)水平進(jìn)一步上調(diào)，與驚厥組及對照組比較具有顯著差異(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 (1)發(fā)育期大鼠反復(fù)驚厥能夠誘發(fā)大腦皮質(zhì)區(qū)GAT-1及GLT-1表達(dá)的異常，兩者表達(dá)的失衡可能導(dǎo)致腦內(nèi)興奮-抑制系統(tǒng)平衡紊亂，從而誘發(fā)發(fā)育期反復(fù)驚厥后腦損傷.
　　 (2)孕酮可能對發(fā)育期反復(fù)驚厥后所致大腦皮質(zhì)區(qū)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)體系統(tǒng)具有調(diào)控作用，通過作用于GAT-1和GLT-1維系腦內(nèi)興奮-抑制