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1、 目的:分析膝關(guān)節(jié)韌帶成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性和觀察酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(acid fibroblast growth factor, aFGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)、表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor,EGF)和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(endothelial cell growth factor,ECGF)對(duì)其增殖行為的影響。
2、 方法:采用膠原酶消化培養(yǎng)法或組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)原代新西蘭大白兔的膝關(guān)節(jié)前十字韌帶(anterior cruciate ligament,ACL)、內(nèi)側(cè)副韌帶(medial collateral ligament,MCL)及人膝關(guān)節(jié)ACL細(xì)胞,選擇合適的條件進(jìn)行體外培養(yǎng),觀察膝關(guān)節(jié)韌帶成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特性;在培養(yǎng)液中分別加入aFGF、bFGF、EGF和ECGF,以XTT法測(cè)定細(xì)胞的增殖行為。
結(jié)果:在含體積分?jǐn)?shù)為10%胎牛血
3、清的DMEM培養(yǎng)液中細(xì)胞生長(zhǎng)良好、增殖快。在體外培養(yǎng)條件下兔ACL和MCL細(xì)胞形態(tài)相似,都具成纖維細(xì)胞表型,但MCL細(xì)胞較ACL細(xì)胞生長(zhǎng)快;兩種細(xì)胞合成膠原的總量相同,相對(duì)于MCL細(xì)胞,ACL細(xì)胞合成的Ⅰ型膠原多而Ⅲ型膠原較少。人ACL細(xì)胞在體外亦具成纖維細(xì)胞表型,免疫細(xì)胞學(xué)方法檢測(cè)表明人ACL細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型膠原及纖維連接蛋白表達(dá)呈陽(yáng)性。aFGF、bFGF、EGF和ECGF四種生長(zhǎng)因子對(duì)兔膝關(guān)節(jié)韌帶成纖維細(xì)胞有明顯的促增殖作用,在某一濃度
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