雄黃量子點(diǎn)的抗腫瘤研究.pdf

1、第一部分雄黃量子點(diǎn)對(duì)肝癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞的凋亡誘導(dǎo)作用
　　目的：在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中，雄黃已被用于解毒、燥濕、截瘧、祛痰等癥。但是它難溶的特性限制了臨床應(yīng)用。本課題組獲贈(zèng)粒徑在（6.11±1.19 nm)的雄黃量子點(diǎn)。應(yīng)用肝癌細(xì)胞株HepG2研究雄黃量子點(diǎn)對(duì)人肝癌細(xì)胞的作用及可能機(jī)制。
　　方法：MTT法檢測(cè)雄黃量子點(diǎn)對(duì)正常肝細(xì)胞（L02）和肝癌細(xì)胞（HepG2）的毒性。流式細(xì)胞儀Annexin V-FITC/PI雙染法檢測(cè)雄黃

2、量子點(diǎn)誘導(dǎo)的壞死和凋亡細(xì)胞。RT-PCR法檢測(cè)凋亡相關(guān)基因Bax、B-cell lymphoma/leukemia2(Bcl-2)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因CHOP10、(glucose-regulated protein78) GRP78的表達(dá)。Western blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2。以JC-1為探針用共聚焦顯微鏡檢測(cè)線粒體膜電位變化。結(jié)果：雄黃量子點(diǎn)對(duì)正常肝細(xì)胞和肝癌細(xì)胞的毒性呈現(xiàn)濃度依賴性，對(duì)HepG2細(xì)胞和L02的

3、IC50分別是23μg/mL和50μg/mL。肝癌細(xì)胞（HepG2）比正常肝細(xì)胞（L02）更敏感。濃度為15μg/mL時(shí)，晚期凋亡和壞死細(xì)胞占15以上％，而當(dāng)濃度為30μg/mL時(shí)，晚期凋亡和壞死細(xì)胞占60%。雄黃量子點(diǎn)30μg/mL處理組抗凋亡蛋白Bcl-2水平下降50%，促凋亡蛋白Bax隨濃度增加而增加，7.5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL組與對(duì)照組比較有顯著差異。雄黃量子點(diǎn)（30μg/mL）處理組線粒體膜電位下降。內(nèi)質(zhì)

4、網(wǎng)應(yīng)激基因CHOP10和GRP78隨雄黃量子點(diǎn)濃度增加升高。
　　結(jié)論：雄黃量子點(diǎn)能有效抑制肝癌細(xì)胞增值，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激引起的細(xì)胞凋亡和壞死是其可能機(jī)制之一。
　　第二部分雄黃量子點(diǎn)對(duì)荷瘤小鼠子宮頸癌的抑制作用
　　目的：觀察雄黃量子點(diǎn)和含雄黃中藥六神丸對(duì)荷瘤小鼠宮頸癌的抑制作用。
　　方法：U14瘤株接種 C57小鼠腹腔傳代，傳第三代時(shí)在無菌條件下取腹水，接種昆明種小鼠右側(cè)腋窩皮下。接種后隨機(jī)將昆明種小鼠分為模型組

5、、順鉑組、雄黃量子點(diǎn)組、六神丸組。接種次日開始預(yù)防性給藥，順鉑組腹腔注射3 mg/ kg，隔日1次；分別給予雄黃量子點(diǎn)10 mg/kg、六神丸100 mg/kg灌胃給藥，每日1次；模型組給予等體積飲用水灌胃，每日1次，持續(xù)14 d。觀察體重變化并測(cè)量腫瘤大小。造模第15日處死小鼠稱體重、瘤重，計(jì)算腫瘤指數(shù)、肝腎指數(shù)和抑瘤率。
　　結(jié)果：與模型組比較，順鉑組小鼠體重下降明顯（P<0.05），六神丸組和雄黃量子點(diǎn)組無顯著改變（P>0.