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1、分類號(hào):密級(jí):UDC:學(xué)號(hào):406521412506南昌大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文朊蛋白在阿爾茨海默病和正常小鼠視網(wǎng)膜組織上的朊蛋白在阿爾茨海默病和正常小鼠視網(wǎng)膜組織上的表達(dá)研究表達(dá)研究ExpressionofprionproteininAlzheimersdiseasenmalmouseretinatissue陳娟培養(yǎng)單位(院、系):南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院指導(dǎo)教師姓名、職稱:周瓊教授主任醫(yī)師申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類:醫(yī)學(xué)學(xué)科專業(yè)名稱:眼科學(xué)論文答
2、辯日期:2015年6月答辯委員會(huì)主席:評(píng)閱人:2015年6月摘要II摘要目的:目的:通過觀察細(xì)胞型朊蛋白(cellularprionproteinPrPc)在阿爾茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)小鼠和正常小鼠視網(wǎng)膜組織上的表達(dá)情況,分析PrPc與AD小鼠視網(wǎng)膜組織改變之間存在的關(guān)系,為下一步研究PrPc在AD視網(wǎng)膜退行性病變上的發(fā)病機(jī)制研究奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ),也為阿爾茨海默病的早期診斷和早期治療提供一定的研究方向。方法:
3、方法:選取6月齡大小的雙轉(zhuǎn)基因(APPPS1)阿爾茨海默病C57小鼠30只作為實(shí)驗(yàn)組,6月齡大小30只正常健康的C57小鼠作為對(duì)照組,雌雄各半,相同的飼養(yǎng)環(huán)境。將小鼠過量麻醉處死后,暴露眼球,分離瞼結(jié)膜,剪斷視神經(jīng)取出眼球,在解剖顯微下迅速的取出視網(wǎng)膜,將視網(wǎng)膜放入EP管內(nèi),液氮凍存。首先通過HE染色技術(shù)觀察AD小鼠與正常小鼠視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)上的差異;免疫熒光檢測(cè)PrPc在AD及正常小鼠視網(wǎng)膜組織上的表達(dá)情況,共聚焦顯微鏡觀察PrPc的亞
4、細(xì)胞定位。通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RTPCR)檢測(cè)兩組小鼠視網(wǎng)膜組織中PrPc基因的表達(dá)差異;蛋白質(zhì)印跡法(WesternBlotWB)技術(shù)檢測(cè)兩組小鼠視網(wǎng)膜組織中PrPc蛋白的表達(dá)情況,利用上述的兩種實(shí)驗(yàn)方法以βactin作內(nèi)參因子。分析PrPc在阿爾茨海默病的視網(wǎng)膜組織的病理改變中是否存在作用,對(duì)進(jìn)一步研究PrPc在阿爾茨海默病視網(wǎng)膜病變中的發(fā)病機(jī)制提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。結(jié)果:結(jié)果:1.通過對(duì)AD小鼠及正常小鼠視網(wǎng)膜組織的HE染
5、色,結(jié)果顯示:在視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)中,AD小鼠視網(wǎng)膜組織中的內(nèi)、外核層細(xì)胞數(shù)量較正常小鼠視網(wǎng)膜組織明顯減少,其視盤盤周神經(jīng)上皮層厚度較正常小鼠變薄。2.通過對(duì)AD小鼠及正常小鼠視網(wǎng)膜組織免疫熒光染色,結(jié)果顯示:AD小鼠及正常小鼠視網(wǎng)膜組織中均可見PrPc表達(dá),但是AD小鼠視網(wǎng)膜組織中PrPc的表達(dá)明顯強(qiáng)于正常小鼠視網(wǎng)膜組織,其平均光密度值(MOD)比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),PrPc主要分布于視網(wǎng)膜內(nèi)外叢狀層、光感細(xì)胞層及神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層
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