接枝MPC鈦板聯(lián)合外周使用青霉素對菌膜形成的動物實驗研究.pdf

1、目的：通過動物實驗來驗證在體內環(huán)境中接枝MPC的鈦板聯(lián)合外周使用青霉素是否具有進一步增強MPC對細菌生物膜形成的抑制作用及MPC抗細菌黏附的程度。
　　方法：取直徑為1cm厚度為0.8mm的圓形醫(yī)用鈦板86枚隨機分成兩組，每組43枚，其中一組經一系列化學接枝方法將MPC接枝到醫(yī)用鈦板表面，另外一組43枚鈦板不接枝，將這86枚醫(yī)用鈦板分別置入隨機分配好的四組每組7只的健康成年SD級大鼠（雌雄不限）的背部肌肉組織中，A組接枝MPC的鈦

2、板聯(lián)合使用青霉素、B組接枝MPC的鈦板未使用青霉素、C組未接枝MPC的鈦板使用青霉素、D組未接枝MPC的鈦板未使用青霉素組四個組，每只大鼠體內放置相應的3枚鈦板;同時將事先培養(yǎng)好的標準金黃色葡萄球菌配成107 CFU/ml數量級懸濁液在手術過程中分別注入醫(yī)用鈦板周圍軟組織中，使其塑造一個局部感染模型，按時注射青霉素或生理鹽水，由于生物膜形成時間為1～2天，手術后24小時在每組中隨機處死一只大鼠取出醫(yī)用鈦板一枚用掃描電子顯微鏡(SEM)觀

3、察細菌粘附數量及生物膜形態(tài)，一枚用通過刀豆球蛋白A/碘化丙啶(FITC-ConA/PI)進行胞外多糖及細胞核雙染色激光共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察生物膜形態(tài);48小時后將剩余的大鼠全部處死，取出的每只大鼠體內的3枚鈦板1枚用CLSM觀察生物膜生長情況;1枚用SEM觀察生物膜形態(tài)，1枚超聲洗滌浮游菌，培養(yǎng)24小時后測其活菌數量行統(tǒng)計學分析。
　　結果：
　　1、在SEM下接枝MPC后的鈦板表面較未接枝者更光滑、平坦;在相同的時

4、間段相同的高倍視野下細菌粘附數量變化為A組＜B組≈C組＜D組;在動物體內培養(yǎng)48小時后在高倍鏡下D組呈現明顯的菌膜生成，細菌粘附量較多;B、C組有少量菌膜生成細菌的粘附量也相應的減少;A組只有微量細菌粘附，未見明顯的生物膜形成。
　　2、在相同時間段用CLSM觀察發(fā)現D組出現細菌、菌膜的數量最多，鋪滿整個視野，A組最少視野內呈零星散在分布，B、C組均稍多。
　　3、各組鈦板經超聲洗脫生物膜內活菌體外培養(yǎng)24小時后活菌數量A組